Indsamling af vævsprøver til analyse og etablering af cellekulturer

Baggrund:

Det er nu tydeligt, at stort set ethvert humant postnatalt væv indeholder en eller anden type stam-/progenitorcellepopulation, der er ansvarlig for vævsomsætning og reparation. Vores tidligere undersøgelser har identificeret en undergruppe af humane knoglemarvsstromaceller (BMSC'er), der er multi-potente og i stand til at regenerere knogle, brusk, myelostøttende stroma og adipocytter, hvorimod stromaceller afledt af human milt (SpSC'er) og thymus (TSC'er) kun danner myelostøttende stroma. Nylige undersøgelser tyder på, at humane fedtafledte stromaceller (ASC'er) kan ligne BMSC'er, hvorimod stromaceller afledt af human dermis (DSC'er) ikke har nogen af ​​disse egenskaber (og tjener som en negativ kontrol for de fleste eksperimenter in vitro og in vivo) . Hvor ens eller forskellige disse forskellige stromale cellepopulationer er, er endnu ikke bestemt. Molekylær profilering er nødvendig for at sammenligne disse forskellige populationer og for at belyse de faktorer, der styrer differentiering af stromale celler til en eller anden celletype.

Mål:

Kirurgisk affald (knogle med rød marv, dermis og fedtvæv) fra mænd og kvinder i forskellige aldre, der gennemgår klinisk indicerede kirurgiske procedurer, vil blive brugt til at etablere stromale cellekulturer for at studere den molekylære profil og differentieringskapacitet af stromacellepopulationerne fra forskellige væv. og for yderligere at karakterisere reguleringen af ​​genekspression og proteinsyntese i disse stam-/progenitorceller.

Berettigelse:

Enhver patient, der gennemgår klinisk indiceret operation, der indebærer fjernelse af knogle med rød marv, dermis og fedtvæv.

Design:

Normalt kirurgisk affald (knogle med rød marv, dermis og fedt) fra procedurer, der udføres på mænd og kvinder på børnehospitalet, vil blive anbragt i næringsmedium (leveret af NIDCR) og sendt til NIDCR for etablering af cellekulturstammer. Kun alder, køn, sted hvorfra vævet blev fjernet og klinisk diagnose vil blive registreret. Cellekulturerne fra de forskellige væv vil blive brugt til at bestemme deres fænotypiske karakter og differentieringsegenskaber ved molekylær profilering og til undersøgelser for at belyse reguleringen af ​​genekspression og proteinsyntese. Tilsvarende vil en del af prøverne opnået på børnehospitalet blive brugt til at generere histologiske snit af vævene. I nogle tilfælde vil RNA blive ekstraheret fra vævene til RT-PCR-analyse. Normale prøver (celler, sektioner, mRNA) vil også tjene som normale kontroller for undersøgelser udført på prøver opnået fra patienter med forskellige sygdomme rekrutteret til NIH under de nuværende NIH-protokoller (97-D-0055, 97-D-0145, 01-D- 0184). Patologiske prøver (celler, snit, mRNA) vil blive undersøgt for at belyse årsagen til sygdom.