Samling av vävnadsprover för analys och etablering av cellkulturer

Bakgrund:

Det är nu uppenbart att praktiskt taget varje mänsklig postnatal vävnad innehåller någon typ av stam-/fadercellspopulation som är ansvarig för vävnadsomsättning och reparation. Våra tidigare studier har identifierat en undergrupp av humana benmärgsstromaceller (BMSCs) som är multipotenta och kan regenerera ben, brosk, myelostödjande stroma och adipocyter, medan stromaceller härrörande från mänsklig mjälte (SpSCs) och tymus (TSCs) endast bildar myelostödjande stroma. Nyligen genomförda studier tyder på att humana fetthärledda stromaceller (ASC) kan likna BMSC, medan stromaceller härrörande från human dermis (DSC) inte har någon av dessa egenskaper (och fungerar som en negativ kontroll för de flesta experiment in vitro och in vivo) . Hur lika eller olika dessa olika stromacellpopulationer är har ännu inte bestämts. Molekylär profilering behövs för att jämföra dessa olika populationer och för att belysa de faktorer som styr differentiering av stromaceller till en eller annan celltyp.

Mål:

Kirurgiskt avfall (ben med röd märg, dermis och fettvävnader) från män och kvinnor i olika åldrar som genomgår kliniskt indikerade kirurgiska ingrepp kommer att användas för att etablera stromacellkulturer för att studera den molekylära profilen och differentieringskapaciteten hos stromacellpopulationerna från olika vävnader och för att ytterligare karakterisera regleringen av genuttryck och proteinsyntes i dessa stam-/faderceller.

Behörighet:

Varje patient som genomgår kliniskt indicerad operation som innebär att ben med röd märg, dermis och fettvävnad avlägsnas.

Design:

Normalt kirurgiskt avfall (ben med röd märg, dermis och fett) från ingrepp som utförs på män och kvinnor på barnsjukhuset kommer att placeras i näringsmedium (tillhandahålls av NIDCR) och skickas till NIDCR för etablering av cellodlingsstammar. Endast ålder, kön, plats från vilken vävnaden togs bort och klinisk diagnos kommer att registreras. Cellkulturerna från de olika vävnaderna kommer att användas för att bestämma deras fenotypiska karaktär och differentieringsegenskaper genom molekylär profilering, och för studier för att belysa regleringen av genuttryck och proteinsyntes. På liknande sätt kommer en del av proverna som erhålls på barnsjukhuset att användas för att generera histologiska sektioner av vävnaderna. I vissa fall kommer RNA att extraheras från vävnaderna för RT-PCR-analys. Normala prover (celler, sektioner, mRNA) kommer också att fungera som normala kontroller för studier utförda på prover som erhållits från patienter med olika sjukdomar rekryterade till NIH enligt nuvarande NIH-protokoll (97-D-0055, 97-D-0145, 01-D- 0184). Patologiska prover (celler, snitt, mRNA) kommer att studeras för att belysa orsaken till sjukdomen.