Raccolta di campioni di tessuto per l'analisi e l'istituzione di colture cellulari

Sfondo:

Ora è evidente che praticamente ogni tessuto postnatale umano contiene un qualche tipo di popolazione di cellule staminali/progenitrici che è responsabile del ricambio e della riparazione dei tessuti. Nostri studi precedenti hanno identificato un sottogruppo di cellule stromali del midollo osseo umano (BMSC) che è multipotente e in grado di rigenerare ossa, cartilagine, stroma mielosupportivo e adipociti, mentre le cellule stromali derivate solo dalla milza umana (SpSC) e dal timo (TSC) forma uno stroma mielosupportivo. Studi recenti suggeriscono che le cellule stromali derivate da adiposo umano (ASC) possono essere simili alle BMSC, mentre le cellule stromali derivate dal derma umano (DSC) non hanno nessuna di queste proprietà (e servono come controllo negativo per la maggior parte degli esperimenti in vitro e in vivo) . Quanto simili o dissimili siano queste diverse popolazioni di cellule stromali deve ancora essere determinato. Il profilo molecolare è necessario per confrontare queste diverse popolazioni e per chiarire i fattori che controllano la differenziazione delle cellule stromali in un tipo di cellula o in un altro.

Obiettivi:

I rifiuti chirurgici (osso con midollo rosso, derma e tessuto adiposo) di maschi e femmine di età diverse sottoposti a procedure chirurgiche clinicamente indicate saranno utilizzati per stabilire colture di cellule stromali per studiare il profilo molecolare e la capacità di differenziazione delle popolazioni di cellule stromali da diversi tessuti e caratterizzare ulteriormente la regolazione dell'espressione genica e della sintesi proteica in queste cellule staminali/progenitrici.

Eleggibilità:

Qualsiasi paziente sottoposto a intervento chirurgico clinicamente indicato che comporti la rimozione di osso con midollo rosso, derma e tessuto adiposo.

Progetto:

I normali rifiuti chirurgici (osso con midollo rosso, derma e adiposo) derivanti da procedure eseguite su maschi e femmine presso l'ospedale pediatrico saranno collocati in mezzo nutritivo (fornito da NIDCR) e inviati al NIDCR per la creazione di ceppi di coltura cellulare. Verranno registrati solo l'età, il sesso, il sito da cui è stato rimosso il tessuto e la diagnosi clinica. Le colture cellulari dei diversi tessuti saranno utilizzate per determinare il loro carattere fenotipico e le proprietà di differenziazione mediante profili molecolari e per studi volti a chiarire la regolazione dell'espressione genica e della sintesi proteica. Allo stesso modo, una parte dei campioni ottenuti presso il Children's Hospital sarà utilizzata per generare sezioni istologiche dei tessuti. In alcuni casi, l'RNA verrà estratto dai tessuti per l'analisi RT-PCR. I campioni normali (cellule, sezioni, mRNA) serviranno anche come normali controlli per gli studi eseguiti su campioni ottenuti da pazienti con varie malattie reclutati presso NIH secondo gli attuali protocolli NIH (97-D-0055, 97-D-0145, 01-D- 0184). Verranno studiati campioni patologici (cellule, sezioni, mRNA) per chiarire la causa della malattia.