Coleta de Amostras de Tecido para Análise e Estabelecimento de Culturas Celulares

Fundo:

Agora é aparente que praticamente todos os tecidos pós-natais humanos contêm algum tipo de população de células-tronco/progenitoras que é responsável pela renovação e reparo do tecido. Nossos estudos anteriores identificaram um subconjunto de células estromais da medula óssea humana (BMSCs) que é multipotente e capaz de regenerar osso, cartilagem, estroma mielossuportador e adipócitos, enquanto células estromais derivadas do baço humano (SpSCs) e timo (TSCs) apenas formam estroma mielossuportador. Estudos recentes sugerem que as células estromais derivadas do tecido adiposo humano (ASCs) podem ser semelhantes às BMSCs, enquanto as células estromais derivadas da derme humana (DSCs) não possuem nenhuma dessas propriedades (e servem como controle negativo para a maioria dos experimentos in vitro e in vivo). . Quão semelhantes ou diferentes são essas diferentes populações de células estromais ainda não foi determinado. O perfil molecular é necessário para comparar essas diferentes populações e para elucidar os fatores que controlam a diferenciação das células estromais em um ou outro tipo de célula.

Objetivos.

Resíduos cirúrgicos (osso com medula vermelha, derme e tecido adiposo) de homens e mulheres de várias idades submetidos a procedimentos cirúrgicos clinicamente indicados serão utilizados para estabelecer culturas de células estromais para estudar o perfil molecular e a capacidade de diferenciação das populações de células estromais de diferentes tecidos , e caracterizar ainda mais a regulação da expressão gênica e da síntese proteica nessas células-tronco/progenitoras.

Elegibilidade:

Qualquer paciente submetido a cirurgia clinicamente indicada que envolva a remoção de osso com medula vermelha, derme e tecido adiposo.

Projeto:

Resíduos cirúrgicos normais (osso com medula vermelha, derme e tecido adiposo) de procedimentos realizados em homens e mulheres no Hospital Infantil serão colocados em meio nutriente (fornecido pelo NIDCR) e enviados ao NIDCR para o estabelecimento de cepas de cultura celular. Serão registrados apenas a idade, o sexo, o local de retirada do tecido e o diagnóstico clínico. As culturas de células dos diferentes tecidos serão utilizadas para determinar seu caráter fenotípico e propriedades de diferenciação por perfis moleculares, e para estudos para elucidar a regulação da expressão gênica e síntese proteica. Da mesma forma, parte das amostras obtidas no Hospital Infantil será utilizada para gerar cortes histológicos dos tecidos. Em alguns casos, o RNA será extraído dos tecidos para análise por RT-PCR. Amostras normais (células, cortes, mRNA) também servirão como controles normais para estudos realizados em amostras obtidas de pacientes com várias doenças recrutados para o NIH sob os protocolos atuais do NIH (97-D-0055, 97-D-0145, 01-D- 0184). Amostras patológicas (células, cortes, mRNA) serão estudadas a fim de elucidar a causa da doença.