Theobromin, vaskulær funktion og intestinal apoA-I produktion

Begrundelse: På trods af vellykkede bestræbelser på at sænke atherogent serum low-density lipoprotein (LDL) kolesterolkoncentrationer, er der stadig en væsentlig resterende kardiovaskulær risiko. En additiv strategi til yderligere at sænke denne resterende risiko kan være ved at øge koncentrationerne af high-density lipoprotein (HDL), og især koncentrationerne af dets hovedproteinbestanddel apolipoprotein A-I (apoA-I). Baseret på flere undersøgelser kan theobromin være en lovende kandidat i denne henseende. For nylig har theobromin vist sig at øge serum HDL-kolesterol (HDL-C) koncentrationer med 0,16 mmol/L eller 10 % og apoA-I niveauer med 8 %. Spørgsmålet er, om denne stigning i observerede HDL-C- og apoA-I-koncentrationer udmønter sig i en forbedret funktionalitet af blodkarrene. Effekter af theobromin på vaskulær funktion er aldrig blevet evalueret i et placebokontrolleret humant interventionsstudie.

Formål: Det primære formål er at evaluere de langsigtede virkninger af theobromin på vaskulær funktion hos raske forsøgspersoner med en let sænket HDL-C i fastende og postprandial tilstand. Det andet primære mål er at evaluere de langsigtede virkninger af theobromin på intestinalt apoA-I mRNA og proteinekspressionsniveauer hos raske forsøgspersoner med en let sænket HDL-C i fastende og postprandial tilstand.

Sekundære mål er at studere de langsigtede virkninger af theobromin på (1) fastende serum HDL-C koncentrationer, (2) kolesterol efflux kapacitet og (3) postprandial lipid og glucose metabolisme.

Undersøgelsesdesign: Et randomiseret, dobbeltblindt, placebokontrolleret cross-over-design. Den samlede undersøgelsesvarighed vil være 12 uger, bestående af en 4 ugers forsøgsperiode, en 4 ugers udvaskning og en 4 ugers kontrolperiode. Ved afslutningen af ​​forsøgs- og kontrolperioderne vil en postprandial test finde sted.

Undersøgelsespopulation: 48 raske mænd i alderen 45-70 år og kvinder i alderen 50-70 år, med lidt lavere HDL-C-koncentrationer (mænd

Intervention: I løbet af forsøgsperioden indtager forsøgspersonerne dagligt ved morgenmaden en drink indeholdende 500 mg theobromin. I placeboperioden indtager forsøgspersonerne dagligt til morgenmad den samme drik uden theobromin. I udvaskningsperioden vil de ikke indtage nogen af ​​drikkevarerne.

Hovedundersøgelsesparametre/endepunkter: Målinger vil blive udført i slutningen af ​​begge 4-ugers interventionsperioder. Effekterne af theobromin vil blive beregnet som de absolutte forskelle mellem værdier opnået ved slutningen af ​​hver periode. Det primære endepunkt er ændringen i vaskulær funktion defineret som % ændring i flow-medieret dilatation (FMD) efter indtagelse af en daglig stressor, en milkshake, der giver alle de tre forskellige makronæringsstoffer. Det andet primære endepunkt er ændringen i apoA-I mRNA og proteinekspression i slutningen af ​​hver periode 5 timer efter indtagelse af milkshaken.

Arten og omfanget af byrden og risici forbundet med deltagelse, fordele og gruppeforhold: Inden undersøgelsen vil forsøgspersoner blive screenet to gange for at bestemme egnethed under to besøg af 15 minutter. Under disse besøg vil kropsvægt, højde og blodtryk blive målt. Derudover vil der blive udtaget en venøs blodprøve (5,5 ml ved hver lejlighed). Under undersøgelsen vil forsøgspersonerne modtage kontrol- og theobromin-drikkene i tilfældig rækkefølge. På dag 1 og 14 vil der blive udtaget en fastende venøs blodprøve (henholdsvis 16,5 mL og 7 mL), og kropsvægt og blodtryk vil blive målt. På dag 25 og 81 vil der igen blive taget en fastende blodprøve (28 ml). Derudover vil der på dag 28 i hver forsøgsperiode, ved t=0 timer, blive udtaget en fastende venøs blodprøve (30 ml), og vaskulær funktion vil blive målt, efterfulgt af en 2,5 timers postprandial test med igen de vaskulære funktionsmålinger. Som et postprandial måltid vil forsøgspersonerne modtage en mælkeshake med højt fedtindhold. Før den postprandiale test vil der blive placeret en kanyle, og der tages blodprøver ved t=0, 15, 30, 45, 60, 90, 120 og 240 (samlet volumen 129,5 ml). I løbet af hele perioden på 13 (screening og undersøgelse) vil der således i alt blive udtaget 444 ml blod. Vaskulære funktionsmålinger omfatter et panel af ikke-invasive målinger, dvs. MKS, endo perifer arteriel tonometri (endoPAT), pulsbølgehastighed (PWV) og retinal billeddannelse. Forsøgspersonerne vil blive bedt om at udfylde et madhyppighedsspørgeskema to gange og føre en undersøgelsesdagbog i 12 uger. I sjældne tilfælde kan blodprøvetagning forårsage blå mærker eller hæmatom. De vaskulære funktionsmålinger er ikke-invasive og vil ikke forårsage nogen belastning.

I en undergruppe på 10 frivillige vil der 5 timer efter starten af ​​den postprandiale test blive taget tyndtarmsbiopsier i duodenum for at bestemme forskellen i intestinalt apoA-I mRNA og proteinekspression. Indhentning af tyndtarmsbiopsier ved standard fleksibel gastroskopi inducerer kun lokalt ubehag i svælget under proceduren, som tager omkring 15 minutter, og forårsager en teoretisk risiko for perforationer (1:1000) og en infektionsrisiko på 1:1.800.000, med lavere risiko for raske forsøgspersoner. Komplikationen er alvorlig, og forsøgspersoner bliver nødt til at blive på hospitalet. Hvis der er alvorlige klager efter gastroskopien (f.eks. opkastning med eller uden blod eller mavepine) skal forsøgspersoner advare projektlederen eller deres læge.

Samlet tidsinvestering for forsøgspersonerne vil være ca. 14,5 timer, og 17,5 timer i den undergruppe, hvorfra der tages biopsier, eksklusiv rejsetid.