Teobromina, función vascular y producción de apoA-I intestinal

Justificación: a pesar de los esfuerzos exitosos para reducir las concentraciones de colesterol de lipoproteínas de baja densidad (LDL) séricas aterogénicas, persiste un riesgo cardiovascular residual sustancial. Una estrategia adicional para reducir aún más este riesgo residual puede ser mediante el aumento de las concentraciones de lipoproteínas de alta densidad (HDL), y en particular las de su principal componente proteico, la apolipoproteína A-I (apoA-I). Según varios estudios, la teobromina puede ser un candidato prometedor en este sentido. Recientemente, se demostró que la teobromina aumenta las concentraciones séricas de colesterol HDL (HDL-C) en 0,16 mmol/L o 10 % y los niveles de apoA-I en un 8 %. La pregunta es si este aumento en las concentraciones de HDL-C y apoA-I observado se traduce en una mejor funcionalidad de los vasos sanguíneos. Los efectos de la teobromina sobre la función vascular nunca se han evaluado en un estudio de intervención en humanos controlado con placebo.

Objetivo: El objetivo principal es evaluar los efectos a largo plazo de la teobromina sobre la función vascular en sujetos sanos con un HDL-C ligeramente reducido en ayunas y en estado posprandial. El segundo objetivo principal es evaluar los efectos a largo plazo de la teobromina en los niveles de expresión de proteínas y ARNm de apoA-I intestinal en sujetos sanos con un HDL-C ligeramente reducido en ayunas y en estado posprandial.

Los objetivos secundarios son estudiar los efectos a largo plazo de la teobromina en (1) las concentraciones séricas de HDL-C en ayunas, (2) la capacidad de salida del colesterol y (3) el metabolismo posprandial de los lípidos y la glucosa.

Diseño del estudio: un diseño cruzado aleatorizado, doble ciego, controlado con placebo. La duración total del estudio será de 12 semanas, que constará de un período experimental de 4 semanas, un período de lavado de 4 semanas y un período de control de 4 semanas. Al final de los períodos experimental y de control, se realizará una prueba posprandial.

Población de estudio: Cuarenta y ocho hombres sanos de 45 a 70 años y mujeres de 50 a 70 años, con concentraciones de HDL-C ligeramente bajas (hombres

Intervención: Durante el período experimental, los sujetos consumirán diariamente en el desayuno una bebida que contenga 500 mg de teobromina. Durante el período de placebo, los sujetos consumirán diariamente en el desayuno la misma bebida sin teobromina. Durante el período de lavado, no consumirán ninguna de las bebidas.

Principales parámetros/criterios de valoración del estudio: Las mediciones se realizarán al final de ambos períodos de intervención de 4 semanas. Los efectos de la teobromina se calcularán como las diferencias absolutas entre los valores obtenidos al final de cada periodo. El criterio principal de valoración es el cambio en la función vascular definido como % de cambio en la dilatación mediada por flujo (FMD) después de la ingesta de un factor estresante diario, un batido que proporciona los tres macronutrientes diferentes. El segundo criterio de valoración principal es el cambio en la expresión de proteína y ARNm de apoA-I al final de cada período 5 horas después de la ingesta del batido.

Naturaleza y alcance de la carga y los riesgos asociados con la participación, el beneficio y la relación con el grupo: Antes del estudio, los sujetos serán examinados dos veces para determinar la elegibilidad durante dos visitas de 15 minutos. Durante estas visitas, se medirá el peso corporal, la altura y la presión arterial. Además, se extraerá una muestra de sangre venosa (5,5 ml en cada ocasión). Durante el estudio, los sujetos recibirán las bebidas de control y de teobromina en orden aleatorio. En los días 1 y 14 se extraerá una muestra de sangre venosa en ayunas (16,5 ml y 7 ml respectivamente) y se medirá el peso corporal y la presión arterial. En los días 25 y 81 nuevamente se tomará una muestra de sangre en ayunas (28 mL). Además, el día 28 de cada período experimental, a las t=0 horas, se extraerá una muestra de sangre venosa en ayunas (30 ml) y se medirá la función vascular, seguido de una prueba posprandial de 2,5 h con nuevamente las mediciones de la función vascular. Como comida posprandial, los sujetos recibirán un batido alto en grasa. Antes de la prueba posprandial se colocará una cánula y se tomará muestra de sangre en t=0, 15, 30, 45, 60, 90, 120 y 240 (volumen total 129,5 mL). Por lo tanto, durante todo el período de 13 semanas (selección y estudio), se extraerán un total de 444 ml de sangre. Las mediciones de la función vascular incluyen un panel de mediciones no invasivas, es decir, FMD, tonometría arterial endoperiférica (endoPAT), velocidad de onda de pulso (PWV) e imágenes de la retina. Se les pedirá a los sujetos que completen un cuestionario de frecuencia de alimentos dos veces y que lleven un diario de estudio durante 12 semanas. En raras ocasiones, la extracción de sangre puede causar hematomas o hematomas. Las mediciones de la función vascular no son invasivas y no causarán molestias.

En un subgrupo de 10 voluntarios, 5 horas después del inicio de la prueba posprandial, se tomarán biopsias de intestino delgado en el duodeno para determinar la diferencia en la expresión de ARNm y proteína de apoA-I intestinal. La obtención de biopsias de intestino delgado por gastroscopia flexible estándar induce molestias locales en la faringe solo durante el procedimiento, que dura unos 15 minutos, y provoca un riesgo teórico de perforación (1:1000) y un riesgo de infección de 1:1.800.000, con menor riesgo para los sujetos sanos. La complicación es grave y los sujetos deberán permanecer en el hospital. Si hay molestias graves después de la gastroscopia (p. vómitos con o sin sangre, o dolor de estómago) los sujetos deben advertir al líder del proyecto o a su médico.

La inversión de tiempo total para los sujetos será de aproximadamente 14,5 horas y 17,5 horas en el subgrupo del que se tomarán las biopsias, excluyendo el tiempo de viaje.