Teobromiini, verisuonten toiminta ja suoliston apoA-I:n tuotanto

Perustelut: Huolimatta onnistuneista yrityksistä alentaa aterogeenisen seerumin matalatiheyksisten lipoproteiinien (LDL) kolesterolipitoisuuksia, huomattava kardiovaskulaarinen riski on edelleen olemassa. Lisäävä strategia tämän jäännösriskin pienentämiseksi edelleen voi olla korkeatiheyksisten lipoproteiinien (HDL) pitoisuuksien nostaminen ja erityisesti sen pääproteiinin, apolipoproteiini A-I:n (apoA-I) pitoisuuksien nostaminen. Useiden tutkimusten perusteella teobromiini voi olla lupaava ehdokas tässä suhteessa. Äskettäin teobromiinin on osoitettu lisäävän seerumin HDL-kolesterolin (HDL-C) pitoisuuksia 0,16 mmol/l eli 10 % ja apoA-I-pitoisuuksia 8 %. Kysymys kuuluu, näkyykö tämä havaittu HDL-C- ja apoA-I-pitoisuuksien lisääntyminen verisuonten parantuneessa toiminnassa. Teobromiinin vaikutuksia verisuonten toimintaan ei ole koskaan arvioitu lumekontrolloidussa ihmisen interventiotutkimuksessa.

Tavoite: Ensisijaisena tavoitteena on arvioida teobromiinin pitkän aikavälin vaikutuksia verisuonten toimintaan terveillä koehenkilöillä, joiden HDL-kolesteroli on hieman alentunut paaston ja aterian jälkeisessä tilassa. Toinen ensisijainen tavoite on arvioida teobromiinin pitkäaikaisia ​​vaikutuksia suoliston apoA-I-mRNA- ja proteiinien ilmentymistasoihin terveillä koehenkilöillä, joiden HDL-kolesterolipitoisuus on hieman alentunut paaston ja aterian jälkeisessä tilassa.

Toissijaisena tavoitteena on tutkia teobromiinin pitkän aikavälin vaikutuksia (1) seerumin HDL-C-pitoisuuteen paastossa, (2) kolesterolin ulosvirtauskykyyn ja (3) aterian jälkeiseen lipidi- ja glukoosiaineenvaihduntaan.

Tutkimussuunnitelma: Satunnaistettu, kaksoissokkoutettu, plaseboohjattu cross-over-malli. Tutkimuksen kokonaiskesto on 12 viikkoa, joka koostuu 4 viikon koejaksosta, 4 viikon pesujaksosta ja 4 viikon kontrollijaksosta. Koe- ja kontrollijakson lopussa suoritetaan aterian jälkeinen testi.

Tutkimuspopulaatio: 48 tervettä 45-70-vuotiasta miestä ja 50-70-vuotiasta naista, joiden HDL-kolesterolipitoisuudet ovat hieman alentuneet (miehet

Interventio: Kokeilujakson aikana koehenkilöt nauttivat päivittäin aamiaisella juoman, joka sisältää 500 mg teobromiinia. Plasebojakson aikana koehenkilöt nauttivat päivittäin aamiaisella samaa juomaa ilman teobromiinia. Pesujakson aikana he eivät käytä juomia.

Tärkeimmät tutkimusparametrit/päätepisteet: Mittaukset suoritetaan molempien 4 viikon interventiojaksojen lopussa. Teobromiinin vaikutukset lasketaan kunkin jakson lopussa saatujen arvojen absoluuttisina eroina. Ensisijainen päätetapahtuma on muutos verisuonten toiminnassa, joka määritellään prosentuaalisena muutoksena virtausvälitteisessä laajentumisessa (FMD) päivittäisen stressitekijän, pirtelön, joka sisältää kaikki kolme eri makroravintoainetta, nauttimisen jälkeen. Toinen ensisijainen päätetapahtuma on muutos apoA-I-mRNA:ssa ja proteiinien ilmentymisessä kunkin jakson lopussa 5 tuntia pirtelön nauttimisen jälkeen.

Osallistumiseen, hyötyyn ja ryhmiin liittyvän taakan ja riskien luonne ja laajuus: Ennen tutkimusta koehenkilöt seulotaan kahdesti kelpoisuuden määrittämiseksi kahden 15 minuutin käynnin aikana. Näillä käynneillä mitataan ruumiinpaino, pituus ja verenpaine. Lisäksi otetaan laskimoverinäyte (5,5 ml joka kerta). Tutkimuksen aikana koehenkilöt saavat kontrolli- ja teobromiinijuomat satunnaisessa järjestyksessä. Päivänä 1 ja 14 otetaan paastolaskimoverinäyte (16,5 ml ja 7 ml vastaavasti) ja mitataan ruumiinpaino ja verenpaine. Päivinä 25 ja 81 otetaan jälleen paastoverinäyte (28 ml). Lisäksi kunkin koejakson 28. päivänä, t = 0 tuntia, otetaan paastolaskimoverinäyte (30 ml) ja verisuonten toiminta mitataan, mitä seuraa 2,5 tuntia aterian jälkeinen testi, jossa on jälleen verisuonitoiminnan mittaukset. Aterian jälkeisenä ateriana koehenkilöt saavat runsaasti rasvaa sisältävän pirtelön. Ennen aterianjälkeistä testiä asetetaan kanyyli ja verinäytteet otetaan t=0, 15, 30, 45, 60, 90, 120 ja 240 (kokonaistilavuus 129,5 ml). Siten koko 13 viikon (seulonta ja tutkimus) aikana otetaan yhteensä 444 ml verta. Verisuonten toimintamittaukset sisältävät paneelin non-invasiivisia mittauksia, ts. Suu- ja sorkkatauti, endoperifeerinen valtimotonometria (endoPAT), pulssiaallon nopeus (PWV) ja verkkokalvon kuvantaminen. Koehenkilöitä pyydetään täyttämään ruokatiheyskysely kaksi kertaa ja pitämään tutkimuspäiväkirjaa 12 viikon ajan. Harvinaisissa tapauksissa verinäytteenotto voi aiheuttaa mustelmia tai hematooman. Verisuonten toiminnan mittaukset ovat ei-invasiivisia eivätkä aiheuta taakkaa.

10 vapaaehtoisen alaryhmässä 5 tuntia aterian jälkeisen testin aloittamisen jälkeen otetaan ohutsuolen biopsiat pohjukaissuolesta suoliston apoA-I-mRNA:n ja proteiinin ilmentymisen eron määrittämiseksi. Ohutsuolen biopsioiden ottaminen tavallisella joustavalla gastroskopialla aiheuttaa paikallista epämukavuutta nielussa vain toimenpiteen aikana, joka kestää noin 15 minuuttia, ja aiheuttaa teoreettisen riskin perforaatioille (1:1000) ja infektioriskin 1:1.800.000, alhaisemmalla riski terveille henkilöille. Komplikaatio on vakava ja koehenkilöiden on jäätävä sairaalaan. Jos gastroskopian jälkeen ilmenee vakavia vaivoja (esim. oksentelu veren kanssa tai ilman tai vatsakipu) koehenkilöiden tulee varoittaa projektin johtajaa tai lääkäriä.

Koehenkilöiden kokonaisaikapanos on noin 14,5 tuntia ja 17,5 tuntia siinä alaryhmässä, josta biopsiat otetaan, matka-aikaa lukuun ottamatta.