Teobromina, Função Vascular e Produção Intestinal de apoA-I

Justificativa: Apesar dos esforços bem-sucedidos para reduzir as concentrações séricas aterogênicas de colesterol de lipoproteína de baixa densidade (LDL), um risco cardiovascular residual substancial permanece. Uma estratégia adicional para diminuir ainda mais esse risco residual pode ser através do aumento das concentrações de lipoproteína de alta densidade (HDL) e, em particular, de seu principal constituinte proteico, a apolipoproteína A-I (apoA-I). Com base em vários estudos, a teobromina pode ser um candidato promissor a esse respeito. Recentemente, a teobromina demonstrou aumentar as concentrações séricas de colesterol HDL (HDL-C) em 0,16 mmol/L ou 10% e os níveis de apoA-I em 8%. A questão é se esse aumento observado nas concentrações de HDL-C e apoA-I se traduz em uma melhora da funcionalidade dos vasos sanguíneos. Os efeitos da teobromina na função vascular nunca foram avaliados em um estudo de intervenção humana controlado por placebo.

Objetivo: O objetivo principal é avaliar os efeitos a longo prazo da teobromina na função vascular em indivíduos saudáveis ​​com um HDL-C ligeiramente reduzido no jejum e no estado pós-prandial. O segundo objetivo principal é avaliar os efeitos a longo prazo da teobromina no mRNA da apoA-I intestinal e nos níveis de expressão de proteínas em indivíduos saudáveis ​​com HDL-C ligeiramente reduzido no jejum e no estado pós-prandial.

Os objetivos secundários são estudar os efeitos a longo prazo da teobromina em (1) concentrações séricas de HDL-C em jejum, (2) capacidade de efluxo de colesterol e (3) metabolismo pós-prandial de lipídios e glicose.

Desenho do estudo: Um desenho cruzado randomizado, duplo-cego, controlado por placebo. A duração total do estudo será de 12 semanas, consistindo em um período experimental de 4 semanas, um wash-out de 4 semanas e um período de controle de 4 semanas. Ao final dos períodos experimental e controle, será realizado um teste pós-prandial.

População do estudo: Quarenta e oito homens saudáveis ​​com idade entre 45-70 anos e mulheres com idade entre 50-70 anos, com concentrações de HDL-C ligeiramente reduzidas (homens

Intervenção: Durante o período experimental, os sujeitos consumirão diariamente no café da manhã uma bebida contendo 500 mg de teobromina. Durante o período placebo, os sujeitos consumirão diariamente no café da manhã a mesma bebida sem teobromina. Durante o período de lavagem, eles não consumirão nenhuma das bebidas.

Principais parâmetros/pontos finais do estudo: As medições serão realizadas no final de ambos os períodos de intervenção de 4 semanas. Os efeitos da teobromina serão calculados como as diferenças absolutas entre os valores obtidos ao final de cada período. O endpoint primário é a mudança na função vascular definida como % de mudança na dilatação mediada pelo fluxo (FMD) após a ingestão de um estressor diário, um milk-shake fornecendo todos os três diferentes macronutrientes. O segundo endpoint primário é a mudança no mRNA da apoA-I e na expressão da proteína no final de cada período 5 horas após a ingestão do milkshake.

Natureza e extensão do ônus e riscos associados à participação, benefício e relacionamento com o grupo: Antes do estudo, os indivíduos serão examinados duas vezes para determinar a elegibilidade durante duas visitas de 15 minutos. Durante essas visitas, o peso corporal, a altura e a pressão arterial serão medidos. Além disso, uma amostra de sangue venoso (5,5 mL em cada ocasião) será coletada. Durante o estudo, os indivíduos receberão o controle e as bebidas de teobromina em ordem aleatória. Nos dias 1 e 14, uma amostra de sangue venoso em jejum (16,5 mL e 7 mL, respectivamente) será coletada e o peso corporal e a pressão arterial serão medidos. Nos dias 25 e 81, novamente, uma amostra de sangue em jejum será coletada (28 mL). Além disso, no dia 28 de cada período experimental, em t = 0 horas, uma amostra de sangue venoso em jejum (30 mL) será coletada e a função vascular será medida, seguida de um teste pós-prandial de 2,5 h com novamente as medidas da função vascular. Como refeição pós-prandial, os indivíduos receberão um milk-shake com alto teor de gordura. Antes do teste pós-prandial, uma cânula será colocada e o sangue será coletado em t=0, 15, 30, 45, 60, 90, 120 e 240 (volume total 129,5 mL). Assim, durante todo o período de 13 semanas (triagem e estudo), um total de 444 mL de sangue será coletado. As medições da função vascular incluem um painel de medições não invasivas, ou seja, FMD, tonometria arterial periférica endo (endoPAT), velocidade de onda de pulso (PWV) e imagem da retina. Os indivíduos serão solicitados a preencher um questionário de frequência alimentar duas vezes e manter um diário de estudo ao longo de 12 semanas. Em raras ocasiões, a coleta de sangue pode causar hematomas ou hematomas. As medições da função vascular não são invasivas e não causam nenhum ônus.

Em um subgrupo de 10 voluntários, 5 horas após o início do teste pós-prandial, biópsias do intestino delgado serão feitas no duodeno para determinar a diferença no mRNA da apoA-I intestinal e na expressão da proteína. A obtenção de biópsias do intestino delgado por gastroscopia flexível padrão induz desconforto local na faringe apenas durante o procedimento, que leva cerca de 15 minutos, e acarreta risco teórico de perfurações (1:1.000) e risco de infecção de 1:1.800.000, com menor risco para indivíduos saudáveis. A complicação é grave e os sujeitos terão que ficar no hospital. Se houver queixas graves após a gastroscopia (p. vômito com ou sem sangue ou dor de estômago) os participantes devem avisar o líder do projeto ou seu médico.

O tempo total de investimento para os participantes será de aproximadamente 14,5 horas, e 17,5 horas no subgrupo do qual serão feitas as biópsias, excluindo o tempo de deslocamento.