Théobromine, fonction vasculaire et production intestinale d'apoA-I

Justification : Malgré des efforts réussis pour abaisser les concentrations sériques de cholestérol à lipoprotéines de basse densité (LDL) athérogènes, un risque cardiovasculaire résiduel substantiel demeure. Une stratégie additive pour réduire davantage ce risque résiduel peut consister à augmenter les concentrations de lipoprotéines de haute densité (HDL), et en particulier celles de son principal constituant protéique, l'apolipoprotéine A-I (apoA-I). Sur la base de plusieurs études, la théobromine pourrait être un candidat prometteur à cet égard. Récemment, il a été démontré que la théobromine augmentait les concentrations sériques de cholestérol HDL (HDL-C) de 0,16 mmol/L ou 10 % et les niveaux d'apoA-I de 8 %. La question est de savoir si cette augmentation des concentrations de HDL-C et d'apoA-I observée se traduit par une amélioration de la fonctionnalité des vaisseaux sanguins. Les effets de la théobromine sur la fonction vasculaire n'ont jamais été évalués dans une étude d'intervention humaine contrôlée par placebo.

Objectif : L'objectif principal est d'évaluer les effets à long terme de la théobromine sur la fonction vasculaire chez des sujets sains présentant un taux de HDL-C légèrement abaissé à jeun et à l'état postprandial. Le deuxième objectif principal est d'évaluer les effets à long terme de la théobromine sur les niveaux d'expression intestinale de l'ARNm et des protéines de l'apoA-I chez des sujets sains présentant un HDL-C légèrement abaissé à jeun et en état postprandial.

Les objectifs secondaires sont d'étudier les effets à long terme de la théobromine sur (1) les concentrations sériques de HDL-C à jeun, (2) la capacité d'efflux du cholestérol et (3) le métabolisme postprandial des lipides et du glucose.

Conception de l'étude : conception croisée randomisée, à double insu et contrôlée par placebo. La durée totale de l'étude sera de 12 semaines, comprenant une période expérimentale de 4 semaines, une période de sevrage de 4 semaines et une période de contrôle de 4 semaines. A la fin des périodes expérimentales et de contrôle, un test postprandial aura lieu.

Population étudiée : Quarante-huit hommes en bonne santé âgés de 45 à 70 ans et femmes âgées de 50 à 70 ans, avec des concentrations de HDL-C légèrement abaissées (hommes

Intervention : Pendant la période expérimentale, les sujets consommeront quotidiennement au petit-déjeuner une boisson contenant 500 mg de théobromine. Pendant la période placebo, les sujets consommeront quotidiennement au petit-déjeuner la même boisson sans théobromine. Pendant la période de sevrage, ils ne consommeront aucune des boissons.

Principaux paramètres/critères de l'étude : les mesures seront effectuées à la fin des deux périodes d'intervention de 4 semaines. Les effets de la théobromine seront calculés comme les différences absolues entre les valeurs obtenues à la fin de chaque période. Le critère d'évaluation principal est le changement de la fonction vasculaire défini comme le pourcentage de changement de la dilatation médiée par le flux (FMD) après la prise d'un facteur de stress quotidien, un milk-shake fournissant les trois macronutriments différents. Le deuxième critère d'évaluation principal est la modification de l'expression de l'ARNm et des protéines de l'apoA-I à la fin de chaque période 5 heures après la prise du milk-shake.

Nature et ampleur du fardeau et des risques associés à la participation, aux avantages et à l'appartenance au groupe : avant l'étude, les sujets seront examinés deux fois pour déterminer leur éligibilité au cours de deux visites de 15 minutes. Au cours de ces visites, le poids corporel, la taille et la tension artérielle seront mesurés. De plus, un échantillon de sang veineux (5,5 ml à chaque fois) sera prélevé. Au cours de l'étude, les sujets recevront les boissons de contrôle et de théobromine dans un ordre aléatoire. Aux jours 1 et 14, un échantillon de sang veineux à jeun (respectivement 16,5 ml et 7 ml) sera prélevé et le poids corporel et la pression artérielle seront mesurés. Aux jours 25 et 81, un échantillon de sang à jeun sera à nouveau prélevé (28 ml). De plus, au jour 28 de chaque période expérimentale, à t = 0 heures, un échantillon de sang veineux à jeun (30 ml) sera prélevé et la fonction vasculaire sera mesurée, suivie d'un test postprandial de 2,5 h avec à nouveau les mesures de la fonction vasculaire. Comme repas postprandial, les sujets recevront un milk-shake riche en matières grasses. Avant le test postprandial, une canule sera placée et le sang sera prélevé à t = 0, 15, 30, 45, 60, 90, 120 et 240 (volume total 129,5 mL). Ainsi, pendant toute la période de 13 semaines (dépistage et étude), au total 444 ml de sang seront prélevés. Les mesures de la fonction vasculaire comprennent un panel de mesures non invasives, c'est-à-dire FMD, tonométrie artérielle périphérique endo (endoPAT), vitesse d'onde de pouls (PWV) et imagerie rétinienne. Les sujets seront invités à remplir un questionnaire de fréquence alimentaire deux fois et à tenir un journal d'étude tout au long de 12 semaines. En de rares occasions, un prélèvement sanguin peut provoquer des ecchymoses ou un hématome. Les mesures de la fonction vasculaire sont non invasives et ne causeront aucun fardeau.

Dans un sous-groupe de 10 volontaires, 5 heures après le début du test postprandial, des biopsies de l'intestin grêle seront prélevées dans le duodénum pour déterminer la différence d'expression de l'ARNm et des protéines de l'apoA-I intestinale. L'obtention de biopsies de l'intestin grêle par gastroscopie souple standard induit une gêne locale au niveau du pharynx uniquement pendant la procédure, qui dure environ 15 minutes, et entraîne un risque théorique de perforations (1:1000) et un risque d'infection de 1:1.800.000, avec une diminution risque pour les sujets sains. La complication est grave et les sujets devront rester à l'hôpital. S'il y a des plaintes graves après la gastroscopie (par ex. vomissements avec ou sans sang, ou maux de ventre) les sujets doivent prévenir le chef de projet ou leur médecin.

L'investissement total en temps pour les sujets sera d'environ 14,5 heures et de 17,5 heures dans le sous-groupe à partir duquel les biopsies seront prélevées, hors temps de déplacement.