Kutan autonom pilomotorisk test for at afsløre rollen af ​​neuropatiprogression i tidlig Parkinsons sygdom (CAPTURE-PD)

PROTOKOLENS FORMÅL Med det mål at udvikle nye endepunkter for tidlige forsøg med sygdomsmodificerende terapier ved Parkinsons sygdom (PD) er formålet med denne undersøgelse at a) vurdere reproducerbarhed b) ekstern validitet og reliabilitet c) at udføre en longitudinel vurdering af sudomotoriske (QDIRT) og pilomotoriske (QPART) responser hos tidlige PD patienter.

Desuden sigter denne undersøgelse på at vurdere hypotesen om, at funktionsnedsættelse i pilomotoriske og sudomotoriske nervefibre i tidlig PD korrelerer med a-synuclein-aflejring-medieret strukturel fiberskade og kan derfor udgøre en potentiel ikke-invasiv biomarkør for autonom involvering i PD.

BAGGRUND I hudbiopsiundersøgelser af PD er alfa-synukleinakkumulering i kutane autonome nervefibre blevet forbundet med forstyrrelser i det autonome nervesystem selv i de tidlige stadier af sygdommen. (1) Forskerne introducerede for nylig en ikke-invasiv teknik til at vurdere autonom adrenerg fiberfunktion ved hjælp af den kvantitative pilomotoriske axonreflekstest (QPART). (2)

MÅL Ved at demonstrere generaliserbarheden og pålideligheden af ​​QPART-teknikken, kan de forventede positive resultater af denne protokol støtte brugen af ​​QPART som et diagnostisk værktøj. Dette kan være af særlig interesse i klinisk praksis, da QPART-teknikken har vist sig at vurdere småfibres funktion med lav variabilitet og forholdsvis lav teknisk indsats, hvorimod vasomotorisk vurdering er begrænset af høj variabilitet, og sudomotorisk vurdering kræver tekniske krævende indstillinger. (3) Desuden kan den forventede positive korrelation mellem funktionel og strukturel svækkelse af pilomotoriske nervefibre understøtte QPART-teknikkens kapacitet til at vurdere specifik fiberskade og dermed give et ikke-invasivt værktøj til 1.) at studere pilomotoriske nerveskader i forskningsstudier og 2.) give mulighed for longitudinel klinisk vurdering hos PD-patienter for at overvåge sygdomsprogression.

ETISK STANDARD Undersøgelsesprotokollen er blevet godkendt af det institutionelle bedømmelsesudvalg ved Technische Universität Dresden (IRB-undersøgelsesreference: EK349082015) samt af det institutionelle bedømmelsesudvalg på hvert deltagende sted (Berlin accepterede protokollen baseret på Technische Universität Dresden IRB-godkendelse; Budapest IRB-nummer: 004513-004/2016/OTIG; Boston IRB-nummer: 2016P000141)

Denne undersøgelse vil blive udført i overensstemmelse med principperne i Helsinki-erklæringen. Der vil blive indhentet skriftligt informeret samtykke fra hver undersøgelsesdeltager. Samtykket vil blive gennemgået med forsøgspersonen af ​​en af ​​undersøgelsens læger. Forsøgspersonen vil underskrive det informerede samtykke, før eventuelle procedurer vedrørende undersøgelsen påbegyndes. En kopi af det underskrevne informerede samtykke vil blive givet til deltageren, og en anden kopi opbevares. Gennemførelsen af ​​denne undersøgelse vil være i overensstemmelse med GCP-retningslinjerne (Good Clinical Practice).

STUDIEPROCEDURER Kvantitativ pilomotorisk axonreflekstest (QPART): Iontoforese af phenylephrin bruges til at inducere axonrefleksmedieret piloerektion. En lægemiddeltilførselskapselelektrode (LI-611; Perimed®, Järfälla, Sverige) er fastgjort på testområdet på den dorsale underarm. Det indre kammer i denne kapsel, åbent til hudoverfladen, er fyldt med 0,4 ml 1 % phenylephrinopløsning. Lægemiddelafgivelseselektroden forbindes derefter til iontoforesestimuleringsboksen (Phoresor II-Auto-PM850; IOMED Inc., Salt Lake City, USA). Iontoforese udføres over et hudområde med en diameter på 1 cm med 0,5 mA over 5 minutter. Silikoneaftryk af piloerektion opnås for at skabe et lokalt topografisk kort over piloerektion. Et silikonebaseret tofaset materiale med høj likviditet (Honigum Light, DMG, Hamburg, Tyskland) placeres over huden i 10 sekunder. Silikonen hærder i 5 minutter, har påført toner for at markere pilomotoraftryk, overskydende toner tørres fri og silikonen scannes for at fange billedet digitalt. Silikoneaftryk af oprejste hårsække kvantificeres efter antal og areal og rumlig spredning. En højopløsningsscanner (Fuel 3D® Technologies Limited, Chinnor, Storbritannien) forbundet til en personlig computer udstyret med billedanalysesoftware (Fuel3D® Studio Starter; Fuel 3D® Technologies Limited, Chinnor, Storbritannien) bruges til yderligere at kvantificere gåsehuden reaktion.

Sympatisk hudrespons (SSR): Hudkonduktansniveauet (SCL) måles i µSievert (µS) fra to mediale phalanges (pege og tredje finger) med en Powerlab® polygraf (AD Instruments, Bella Vista, Australien). Den maksimale stigning i amplitude efter pludselig dyb respiration (Sympathetic Skin Response; SSR) beregnes for at kvantificere svedkirtlernes funktionelle reaktivitet som tidligere beskrevet. (4)

Kvantitativ direkte og indirekte test af sudomotorisk funktion (QDIRT): Axon-refleks-medieret svedtendens måles efter iontoforese af 10% acetylcholin ved at tørre det stimulerede område på det volære aspekt af underarmen og støve med indikatorfarve (povidon-jod og majsstivelse) efterfulgt ved gentagne digitale fotografier taget hvert 15. sekund i 7 minutter med et 18 Megapixel kamera (EOS 60D; Canon Inc., Tokyo, Japan) med 100 mm makroobjektiv. Billeder analyseres digitalt for dråbeantal, størrelse og axon-refleksspredning som tidligere beskrevet. (5)

Evaluering af oplevede motoriske og autonome symptomer: Progression af motoriske og autonome symptomer vurderes gennem validerede symptomscores MDS-UPDRS motordel og SCOPA AUT.

Hudbiopsier: a-synuclein/PGP-forhold; Immunhistokemisk farvning for a-synuclein og intraepidermale nervefibre vil blive udført i 3 hudpunch-biopsier opnået fra QPART-teststeder og to kontrolsteder (underben). Tre-millimeter biopsier vil blive opnået efter lokalbedøvelse med 2% lidokain. Biopsiprøver fikseres i Zamboni-opløsning i 18 timer og kryobeskyttes natten over (20 % glycerol og 20 % 0,4 M Sorensen-buffer). Hudblokke skæres ved hjælp af frysemikrotom, og 20 vævssnit analyseres. 20 vævssnit vil analyseres. Alfa synuklein/intraepidermal nervefiber tæthedsforhold vil blive beregnet.

TIDSLINJE Emner vil blive vurderet for berettigelse af en anført undersøgelseslæge. Ved baseline vil alle forsøgspersoner gennemgå sygehistorie, fysisk undersøgelse, QPART, SSR, QDIRT, MDS-UPDRS og SCOPA AUT vurdering som beskrevet ovenfor. Disse testprocedurer vil blive gentaget efter 1-2 uger, 1 år, 2 år og 3 år efter baseline. Al test udføres i et temperatur- og fugtkontrolleret miljø. Kun på Dresden-Site vil forsøgspersoner desuden gennemgå hudpunch-biopsiproceduren som beskrevet ovenfor ved baseline, efter 1 år og efter 3 år.