Ei-invasiiviset lähestymistavat tulehduksellisten suolistosairauspotilaiden väsymyksen syyn tunnistamiseen. (IBD Fatigue)

Taustatietoa Tulehduksellisen suolistosairauden (IBD) väsymys on ripulin ohella yleisin lääketieteellinen oire aktiivista Crohnin tautia (CD) sairastavilla potilailla ja toiseksi yleisin vaiva nivelkivun jälkeen remissiossa olevilla CD-potilailla. James Lind Alliancen ja British Society of Gastroenterology -järjestön IBD:n painopisteiden asettamista koskeva kumppanuus on korostanut, että IBD-väsymys on 10 suurimman Britannian tutkimuksen painopistealueena.

Väsymyksen esiintyvyys vaihtelee 41-48 %:n välillä remissiossa ja kasvaa 86 %:iin, kun sairaus on aktiivinen. Krooninen väsymys liittyy heikentyneeseen terveyteen liittyvään elämänlaatuun IBD:ssä ja alentuneeseen fyysiseen aktiivisuuteen, jolla on lasten kohortteilla tärkeä rooli normaalissa kasvun kehityksessä. Koska palautuvia kliinisiä syitä, kuten anemiaa, tulehdustaakkaa tai ravinteiden puutetta, ei ole, on vielä epäselvää, mikä aiheuttaa näiden potilaiden väsymystä. Nykyiset lähestymistavat rajoittuvat tarjoamaan vihjeitä mahdollisista terapeuttisista lähestymistavoista tai tarkasta kliinisestä arvioinnista CD-potilaille. Tämä johtuu todennäköisesti monikomponenttisen lähestymistavan puutteesta ja huonosta metodologisesta herkkyydestä ja luotettavuudesta väsymyksen arvioinnissa. IBD-väsymykseen on ehdotettu moniulotteista fyysisten, kognitiivisten ja affektiivisten komponenttien käsitettä. Silti on edelleen epäselvää, kuinka IBD-väsymystä hoidetaan. Liikuntaterapiaa, psykososiaalisia interventioita ja ratkaisukeskeistä terapiaa on ehdotettu hoitovaihtoehdoiksi, mutta mitään ei ole osoitettu vakuuttavasti tehokkaaksi.

Väsymys johtuu perifeerisistä ja keskusprosesseista, jotka molemmat ovat yhtä tärkeitä. Vaikka perifeerinen väsymys johtuu lihasten etiologiasta, keskusväsymys on progressiivinen harjoituksen aiheuttama lihasten vapaaehtoisen aktivaation väheneminen keskushermoston (CNS) toimintahäiriön vuoksi. Nykyiset lähestymistavat ovat rajoittuneet siihen, että ne eivät ole kyenneet mittaamaan riittävästi perifeeristä väsymystä lihastasolla ja keskusuupumusta keskushermoston tasolla.

Perifeerinen väsymys: lihastoiminnan tarve

Fyysinen väsymys liittyy alentuneeseen lihasmassaan ja -laatuun (sarkopenia) ja sen seurauksena heikentyneeseen lihasten toimintaan. Lihasmassan menetyksen tekijöitä ovat fyysinen passiivisuus ja anabolinen vastustuskyky, jotka suurelta osin heikentävät proteiiniravinnon stimuloivaa vaikutusta lihasten proteiinisynteesiin. Tämän mukaisesti potilailla, joilla on aktiivinen CD, esiintyy merkittävää laskua hypertrofian luurankolihasten signalointireittien ilmentymisessä, mutta ei muutoksia atrofiasignaalien ilmentymisessä.

Huono lihasten laatu on tärkeä aineenvaihdunnan toimintahäiriön aiheuttaja, joka usein jätetään huomiotta perifeerisen väsymyksen aiheuttajana. Alustavissa julkaisemattomissa tiedoissa tutkijat ovat osoittaneet ensimmäistä kertaa, että aktiivista CD-potilaita sairastavien potilaiden luustolihaksissa glukoosin otto on heikentynyt vasteena glukoosiruokinnasta, mikä viittaa heikentyneeseen lihasten aineenvaihduntaan CD-potilailla.

Väsyneillä IBD-potilailla keskisuurista suuriin vaikutuskokoja heikentyneen aerobisen kunnon (VO2max), lihasvoiman ja fyysisen aktiivisuuden osalta havaitaan väsyneillä potilailla verrattuna henkilöihin, joilla ei ole raportoitu väsymystä, ja normaaliin väestöön. Fyysinen passiivisuus lepotilassa CD-sairaudessa voisi olla selitys näiden havaintojen taustalla, mikä viittaa siihen, että sairauden aiheuttama sekundaarinen passiivisuus on väsymyksen syy CD:ssä, samoin kuin kroonisessa obstruktiivisessa keuhkosairaudessa (COPD). Fyysinen passiivisuus on jo osoitettu CD:ssä sekä lasten että aikuisten kohortteissa, ja se on korreloinut merkittävästi taudin aktiivisuuteen, mutta se on edelleen yleistä remissiossa. Vaikka tämä saattaa viitata kiertokulkuun väsymyksen etiologiassa fyysisen passiivisuuden yhteydessä, on epätodennäköistä, että näillä kahdella tekijällä on yksinkertainen suora syy-seuraussuhde. Itse asiassa, kun tavanomaista fyysistä aktiivisuutta sovitetaan vapaaehtoisten kesken, luustolihasten väsymys on edelleen yleisintä CD-potilailla ja pääasiassa niillä koehenkilöillä, jotka valittavat väsymyksestä. Yhdessä nämä tiedot viittaavat siihen, että sekä alentunut sydän-hengityskunto että perifeeristen lihasten kuntoutuminen (mahdollisesti yhdistettynä lihasten mitokondrioiden tiheyteen) edistävät varhaista väsymystä IBD-potilailla, jotka raportoivat väsymyksen oireista.

Keskusväsymys: sydän- ja hengityselinten säätelyn tarve

Luustolihas, sydän-hengitysjärjestelmä ja keskushermosto ovat yhteydessä toisiinsa. Alustavissa tiedoissa on ensimmäistä kertaa osoitettu, että aivojen perfuusion (tai aivojen verenvirtauksen; CBF) muutosta, joka on epäsuora mittaus aivojen hermosolujen toiminnan hemodynaamisesta mittauksesta, on mahdollista arvioida funktionaalisilla MRI-tekniikoilla. heikentynyt kardiovaskulaarinen kunto iän myötä. Nämä tiedot ovat osoittaneet, että CBF, joka mitattiin suoraan käyttämällä valtimoiden spin-leimausta (ASL) tai epäsuorasti käyttämällä veren happitasosta riippuvaa (BOLD), väheni iäkkäillä ihmisillä, joilla on heikentynyt kardiorespiratorinen kunto ja jotka ovat todennäköisesti väsyneempiä kuin nuoret vapaaehtoiset. Tämä viittaa siihen, että CBF:n ja aivojen toiminnan välistä yhteyttä voidaan moduloida sydämen minuuttimäärällä ja siten manipuloida parantamaan aivojen toimintaa, joka liittyy keskusväsymykseen CD-potilailla.

Tämä korostaa ei-invasiivisten toiminnallisten aivojen MRI-tekniikoiden mahdollisuuksia määrittää aivojen perfuusion vaikutus harjoituksen aikana CD-potilaiden keskusväsymykseen. Lisäksi näitä kvantitatiivisia lähestymistapoja voitaisiin käyttää määrittämään, voivatko parannukset sydän- ja verisuonikunnossa ja asianmukaiset jatkoharjoittelut tai farmakologiset toimenpiteet muuttaa keskusväsymystä.

1.Ehdotellun tutkimuksen tavoitteet ja tarkoitus

Hypoteesi: Tutkijat olettavat, että IBD-väsymys johtuu yhdessä ääreislihasten kuntoutumisesta ja aivojen keskusväsymyksestä, joista jälkimmäinen on toissijaista kardiorespiratorisen kunnon ja/tai sydämen minuuttimäärän heikkenemisen vuoksi, joten sekä keskus- että ääreisuupumus lisäävät väsymystä. IBD:n kehitystä.

Tavoitteet:

Tämän hypoteesin ratkaisemiseksi tutkijat pyrkivät rekrytoimaan kohortin väsyneitä ja ei-väsyneitä CD-potilaita remissiossa ja iän, sukupuolen, lihasmassan ja fyysisen aktiivisuuden suhteen vastaavia terveitä vapaaehtoisia. Väsymysoireet määritellään asianmukaisilla kyselylomakkeilla seulonnassa. Tämän jälkeen tutkijat mittaavat objektiivisesti polven ojentajien lihasvoiman maksimaalisen vapaaehtoisen isometrisen supistuksen aikana ja väsymyksen kehittymisen nelipäisessä lihasryhmässä. Jälkimmäinen määritellään lihasten huippuvääntömomentin kehityksen menetykseksi 20 peräkkäisen isokineettisen polven pidennyksen aikana. Perifeeriset (lihas) ja keskeiset (CNS) roolit väsymyksen etiologiassa tutkitaan. Ääreislihasten kuntoutumista tutkitaan kvantitatiivisesti määrittämällä lihasfosfokreatiinin (PCr) uudelleensynteesi harjoituksesta palautumisen aikana käyttämällä 31-fosforipitoista MRS:ää, kun taas keskushermoston väsymyksen potentiaalia tutkitaan erilaisilla keskushermoston perfuusion ja aivojen hapen erotuksen osilla MRI:n avulla.

Yksityiskohtainen tutkimussuunnitelma ja tieteelliset menettelyt/metodologia

Tutkijat pyrkivät rekrytoimaan 32 potilasta, joilla on remissiossa oleva CD-potilas, joilla on tai ei ole ollut IBD-väsymystä (n=16 IBD-väsymyskohortissa ja n=16 ei IBD-väsymyskohortissa) 36 kuukauden sisällä. Näitä kohortteja verrataan 16 iän, sukupuolen, lihasmassan ja fyysisen aktiivisuuden mukaan vastaavaan terveeseen kontrolliin (nykyisestä Nottingham Digestive Diseases Biomedical Research Unit- ja MRC/ARUK-tietokannoistamme), jotta ne käyvät läpi alla kuvatun kokeellisen protokollan. Tutkijat sopivat erityisesti fyysiseen aktiivisuuteen selvittääkseen sen mahdollisen ensisijaisen vaikutuksen väsymykseen.

Tavoite 1 (Päivä 1): Määrittää lihasvoimaa, väsymystä ja sydän- ja hengityselimistön kuntoa.

Suostumuksensa jälkeen CD- ja terveet vastaavat kontrollit vapaaehtoiset suorittavat 3 maksimaalista isometristä polven venytystä nelipäiselle lihasryhmälle (kukin 30 s:n välein) määrittääkseen lihasvoiman. Tämän jälkeen vapaaehtoiset suorittavat 20 maksimaalista yhden jalan polven pidennystä Cybex-isokineettisellä dynomometrillä (Cybex Norm, USA) vakiokulmanopeudella 90 astetta sekunnissa määrittääkseen lihasten vääntömomentin kehittymisen. Jokainen maksimaalinen tahallinen supistuminen aloitetaan 90 asteen polven koukistusasennosta ja sitä jatketaan polven täyteen venymiseen saakka. Jokaisen supistuksen jälkeen jalka palautetaan passiivisesti alkuasentoon (noin 1,1 s), josta seuraava supistuminen aloitetaan välittömästi. Tämän tavoitteen tulosmitta ja väsymyksen kultastandardin määritelmä määritellään kunkin supistuksen huippuvääntömomentin pienenemiseksi 20 polven pidennyksen aikana. Tällä nopeudella tapahtuvien maksimaalisten vapaaehtoisten supistusten on aiemmin osoitettu johtavan sekä tyypin I että tyypin II nelipäisen lihasryhmän lihassäikeiden kerääntymiseen. Kolmekymmentä minuuttia myöhemmin vapaaehtoisille tehdään jatkuva, asteittainen, selällään oleva rasitustesti MR-yhteensopivalla askelergometrillä (Ergospect-diagnostiikkapedaali). Harjoittelu aloitetaan alhaisella työmäärällä, joka kasvaa 3 minuutin välein VO2-huippujen määrittämiseksi makuuasennossa suoritetun vanhentuneen kaasun analyysin avulla (Cosmed, Rooma, Italia). Hiilidioksidin (CO2) tuotantoa ja hapen (O2) kulutusta mitataan koko testin ajan ja niitä käytetään huippuhapenoton ja hengitysteiden vaihtosuhteen (RER) mittaamiseen. Nämä tiedot normalisoidaan kehon koostumukseen, joka mitataan kaksoisenergiaröntgenabsorptiometrialla (DEXA; Lunar Prodigy, GE Medical Systems, Bucks, UK), ja ne tarjoavat kultaisen standardin kardiorespiratorisen (tai aerobisen) kunnon mittauksen.

Tavoite 2 (Päivä 2): Määrittää aivojen perfuusio ja keskusväsymys.

Äskettäin yhteistyössä Nottinghamin yliopiston Sir Peter Mansfield Imaging Centerin tutkijoiden kanssa tutkijat ovat kehittäneet protokollan, jolla mitataan aivokuoren verisuonten vastetta harjoitteluun vapaaehtoisilla ja sen modulaatiota ikääntymisessä ja kardiorespiratorisessa kunnossa. Tässä samaa lähestymistapaa käytetään arvioitaessa aivokuoren vaskulaarista vastetta harjoitteluun CD-potilaiden keskusväsymykseen liittyvillä aivoalueilla.

Tämän mekanismin tutkimiseksi CD-potilailla tutkijat ehdottavat sydämen minuuttitilavuuden sekä aivojen ja alueellisen perfuusion mittaamista käyttämällä veren happitasosta riippuvaisia ​​(BOLD) mittauksia ja valtimoiden spin-leimausta (ASL) -MRI:tä sekä fraktiohappipoistoa käyttäen. TRUST-MRI vastaavasti nelipäisen reisilihaksen makuuasennossa MR-yhteensopivalla ergometrillä (Ergospect diagnostinen poljin) annetuilla suhteellisilla VO2max-arvoilla (mitattuna tavoitteessa 1).

Tämä multimodaalinen lähestymistapa määrittää mahdollisen eron aivojen perfuusion ja hermosolujen toiminnan välillä ja sentraalisen hypoksemian roolin IBD-potilaiden keskusväsymyksessä terveisiin kontrolleihin verrattuna. Lisäksi nämä tiedot korreloivat sydän- ja hengityselinten kuntoon, lihasvoimaan ja väsymykseen, ja ne määrittävät keskeisten prosessien hallitsevan roolin IBD-potilaiden väsymyksessä. Jos nämä aivojen verisuonimittaukset liittyvät väsymyksen kehittymiseen, tämä neurovaskulaarisen kytkennän indeksi voisi hyötyä harjoittelusta samalla tavalla kuin lihaskudosta.

Tavoite 3 (Päivä 2): Määrittää lihasten kuntoutuksen.

Energian (ATP) ylläpitämiseksi harjoituksen aikana luurankolihas säätelee oksidatiivista (mitokondriaalista) ja ei-mitokondriaalista ATP:n tuotantoa. Terveillä yksilöillä ei-mitokondrioiden ATP-tuotannon suhteellinen osuus energian kokonaistuotannosta määräytyy yleensä harjoituksen intensiteetin mukaan, mikä määrittää aineenvaihdunnan sivutuotteiden kertymisen, jotka liittyvät suoraan lihasten epämukavuuteen ja väsymykseen. Sairaustiloissa pahentuneen väsymyksen ja lihaskivun on katsottu johtuvan heikentyneestä lihasten verenkierrosta ja/tai vähentyneestä mitokondriomassasta.

Näiden kahden prosessin erottamiseksi CD-potilailla raajan verenvirtaus suljetaan mansetilla, kun taas osallistujat suorittavat toistuvia jalkapohjan taivutusharjoituksia magneettikuvauslaitteella. Tämä ajaa PCr:n (käytettävissä olevan ATP-varannon) nollaan. Erityisesti osallistujat, joilla on alaraajan mansetti, suorittavat 30 supistusta 5 minuutin aikana käyttämällä MR-yhteensopivaa ergometriä. Kun mansetti on poistettu, niille tehdään ei-invasiiviset ja vakiintuneet in vivo 31P magneettiresonanssi (31P MRS) -mittaukset gastrocnemiusilla PCr:n uudelleensynteesinopeuden määrittämiseksi lepovaiheen aikana. 31P MRS-tiedoista lasketaan keskiarvo, käsitellään ja kvantifioidaan yrityksen sisäisiä menetelmiä käyttäen.

Koska PCr:n uudelleensynteesin nopeus on suoraan verrannollinen mitokondrioiden massaan ja hapen toimitus ei ole rajoittava harjoituksen palautumisen aikana, tämä antaa meille mahdollisuuden mitata lihasten aineenvaihdunnan ehtymistä in vivo.

Otoskoko

1. Sydän-hengityskunto: Tutkijat ovat aiemmin osoittaneet, että terveen vapaaehtoisen VO2max on 3,65 (0,5) l/min, kun taas väsyneen IBD-potilaan VO2max on 1,99 (0,44) l/min ja ei-väsymättömän potilaan VO2max on 2,43 (0,75). ) L/min. Olettaen, että teho on 80 % ja α=0,05, 6 koehenkilöä kussakin ryhmässä tarvitaan osoittamaan merkittävä ero terveiden vapaaehtoisten ja ei-väsymättömän kohortin välillä, ja 13 potilasta kussakin ryhmässä tarvitaan osoittamaan ero 2 CD:n välillä. kohortteja.
2. Lihasväsymys: Huippulihaksen vääntömomentin venymä 180⁰/s (Nm) on pienempi väsyneillä IBD-potilailla kuin ei-väsyneillä IBD-potilailla (60,73 vs. 73,5, SD 12,3). Olettaen, että teho on 90 % ja α = 0,05, 16 CD-potilasta kussakin ryhmässä tarvitaan osoittamaan ero väsyneiden ja ei-väsyneiden CD-kohortien välillä. Tärkeää on, että lihasväsymisnopeus (määritelty voiman laskun gradienttiksi harjoitusprotokollan toistosta 2:een 30:een) on merkittävästi suurempi CD-potilailla kuin terveillä vapaaehtoisilla (5,2 Nm/min vs 1,3 Nm/min, SD 3). Olettaen, että teho on 90 % ja α = 0,05, 11 koehenkilöä kussakin ryhmässä tarvitaan osoittamaan ero CD:n ja terveiden vapaaehtoisten välillä.
3. Lihasten kuntoutus: viimeaikaiset tutkimukset ovat osoittaneet, että Pcr:n uudelleensynteesinopeus on 27,9 ± 0,6 sekuntia laihoilla, istuvat potilaat, kun taas 36,5 ± 2,4 s tyypin 2 diabetes mellitus (T2DM) -potilailla. Siten olettaen, että teho on 100 % ja α = 0,05, 3 koehenkilöä kussakin ryhmässä tarvitaan osoittamaan ero terveiden vapaaehtoisten ja mahdollisesti väsyneen kohortin, kuten T2DM-potilaiden, välillä.
4. Anabolinen vastustuskyky: Lisäksi viimeaikainen anabolista vastustuskykyä koskeva työmme on jo osoittanut merkittäviä eroja lihasten laadussa CD:n ja terveiden vapaaehtoisten välillä (merkittävä ero havaittu n = 5 potilaalla). Kyynärvarren väsymisprosentti hallitsevassa käsivarressa on 26,75 %±11,1 ja 18,3±7,8 kontrollissa. Olettaen, että teho on 80 % ja α = 0,05, kumpaankin käsivarteen tarvitaan 11 koehenkilöä.
5. MRI: Tätä tarkkaa MRI-tutkimusta ei ole mahdollista tehostaa, koska pilottitietoja näistä IBD-kohortteista ei ole kerätty. Tutkijat ovat kuitenkin aiemmin osoittaneet, että nuorten aivojen perfuusio lisääntyy 18±6 % VO2max-arvolla 30 % kardiorespiratorisen kuntotestin aikana. Vanhuksilla se kasvaa vain 3±4 %. Olettaen, että teho on 100 % ja α = 0,05, 10 koehenkilöä kussakin ryhmässä tarvitaan osoittamaan merkittävä ero terveiden vapaaehtoisten (nuorten) ja mahdollisesti väsyneen kohortin (vanhukset) välillä. Lisäksi fMRI BOLD -analyysiä varten katsotaan yleisesti, että kuhunkin kohorttiin tarvitaan vähintään 12 koehenkilöä, ja MR-skannerien herkkyys (ja siten korkeampi temporaalinen signaali-kohinasuhde (SNR)) mahdollistaa nyt parempien yksittäisten koehenkilöiden analyysien tekemisen.

Edellä mainituista syistä tutkijat katsovat, että 16 koehenkilöä kussakin ryhmässä (väsynyt CD, ei-väsynyt CD ja terveet vapaaehtoiset) riittää osoittamaan eron valitsemissamme objektiivisissa päätepisteissä.

Tietojen analyysi Väsymys mitataan vääntömomentin huippukehityksen laskuna 20 isokineettisen polven pidennyksen aikana, kuten edellä on kuvattu. PCr:n uudelleensynteesinopeus ja aivojen hapen erillinen erotus ovat ensisijaisia ​​päätepisteitä tavoitteissa 2 ja 3.

31P MRS-tiedot analysoidaan käyttämällä standardia NMR-ohjelmistoa (jMRUI-ohjelmisto kliiniselle ja biolääketieteelliselle MRS:lle). Tarkkaan ottaen kaikki aikasarjan spektrit apodisoidaan (15-20 Hz Lorentzian muoto). Näistä spektreistä määritetään 5 piikin signaalin intensiteetit viivanmuodostuksen jälkeen. pH määritetään ennen harjoitusprotokollaa ja sen lopussa mittaamalla taajuussiirtymä PCr:n ja Pi:n välillä, kun taas talon sisäistä kirjallista koodia MATLABissa (MathWorks Inc., Matrix House, Cambridge, UK) käytetään PCr:n talteenottonopeuden lisälaskelmat. Tässä tapauksessa jMRUI:n PCr-huipun huippualueen intensiteettejä käytetään syötteenä komentosarjassa datan aikakurssien sovittamiseksi käyttämällä monoeksponentiaalista funktiota: PCr (t) = PCr (t0) + C (1 - e-t/ τ); jossa PCr on PCr-huipun intensiteettitaso, C a vakio, τ [s] PCr:n palautumisen nopeusvakio ja t [s] aika, alkaen harjoitusprotokollan lopusta (t0). Lihasenergian 31P MRS-mittausten toistettavuus on äskettäin arvioitu koulutetuilla ihmisillä, ja ne osoittavat, että variaatiokerroin harjoituksen aikana (27 %) ja levossa (8 %) oli suhteellisen alhainen, ja ero oli havaittavissa 15 vapaaehtoisella. Tämä vahvistaa, että 31P MRS -lähestymistapa tarjoaa toistettavia ja kokeellisesti hyödyllisiä mittauksia PCr:n uudelleensynteesinopeudesta ihmisen luustolihaksessa.

BOLD MRI-tiedot analysoidaan käyttämällä normaaleja neuroimaging-paketteja (Statistical Parametric Mapping (SPM); Wellcome Department of Imaging Neuroscience ja FMRIB Software Library -ohjelmisto). Kuvat liikekorjataan ja normalisoidaan tavalliseen Montreal Neurological Institute -malliin osallistujien keskiarvon laskemisen helpottamiseksi. Kaikista tiedonkeruuista tutkijat tallentavat vektorikardiogrammin (VCG) ja hengitysliikkeen, jotta tiedot voidaan korjata fysiologisen melun suhteen. Kontrastivektorit muodostetaan tunnistamaan keskushermoston vaste harjoitusärsykkeelle. Tutkijat muodostavat tilastollisia karttoja niistä aivoalueista, jotka osoittavat BOLD-signaalin laskun/lisäyksen harjoituksen jälkeen. Näitä tilastokarttoja käytetään interventioiden ja osallistujaryhmien välisissä kontrasteissa. Tulokset yhdistetään toisella tasolla, satunnaisvaikutusten ryhmäanalyysi (RFX) ja aktiiviset aivoalueet näytetään väärillä löydöstiheydellä korjatulla todennäköisyydellä P < 0,05, k > 5. Ryhmämme on aiemmin tehnyt ja julkaissut nämä analyysit. ASL-tiedot liikekorjataan ja mallinnetaan perfuusion kvantifioimiseksi yksikössä ml/100 g/min, ja maailmanlaajuisia ja alueellisia perfuusiomittauksia verrataan ennen harjoittelua ja sen aikana. TRUST-tietoja käytetään murto-osien hapenpoiston laskemiseen ennen harjoittelua ja sen aikana. Tiedot esitetään keskiarvona +/- keskiarvon standardivirhe (SEM). Binäärivertailu suoritetaan t-testeillä, kun taas useat vertailut suoritetaan varianssianalyysillä post-hoc Bonferroni-korjauksella kolmen ryhmän välillä. Sytokiinien, D-vitamiinin ja taudin keston vaikutuksia tutkitaan korrelaatiokerroin- ja post-hoc-monimuuttuja-analyysin avulla.

Tutkijat osittavat koehenkilöt kvantitatiivisten tulosmittausten perusteella: PCr:n uudelleensynteesinopeus, kardiorespiratorinen kunto mitattuna VO2max-arvolla, lihastuotannon väheneminen ja muutos alueellisessa perfuusion ja aivojen hapen erittelyssä heidän väsymistilastaan ​​riippumatta. Tämä auttaa ymmärtämään, mitkä fysiologian ja aineenvaihdunnan muutokset liittyvät parhaiten tiettyihin väsymysoireisiin. Tämä mahdollistaa IBD-väsymisasteikon subjektiivisen rajan objektiivisen kvantifioinnin, mikä määrittää väsymyksen paremmin.