L'exercice comme adjuvant immunitaire pour les thérapies cellulaires allogéniques (Allo-X)

Arrière-plan:

Les thérapies cellulaires allogéniques englobent diverses approches, notamment les perfusions de lymphocytes de donneur (DLI) et les produits de cellules immunitaires modifiées tels que les lymphocytes T du récepteur d'antigène chimérique (CAR), les lymphocytes T gamma delta (γδ), les cellules tueuses induites par les cytokines (CIK) et les cytokines. -cellules tueuses naturelles (NK) de type mémoire induites. Ces thérapies sont couramment utilisées après une greffe allogénique de cellules hématopoïétiques (alloHCT) pour prévenir ou traiter la rechute leucémique chez les patients à haut risque. Cependant, même si ces thérapies ont montré leur potentiel, les taux de réussite des produits DLI et à cellules expansées restent limités. L'IDD, en particulier, comporte le risque d'induire une maladie du greffon contre l'hôte (GvHD), dans laquelle les lymphocytes T du donneur attaquent les tissus sains, entraînant une morbidité importante. En outre, les produits à cellules expansées sont confrontés à des défis liés aux délais de fabrication, à l’efficacité et au coût, ce qui peut limiter leur accessibilité et leur efficacité. Par conséquent, il existe un besoin crucial d’améliorer les effets du greffon contre la leucémie/lymphome (GvL) de l’IDD et d’améliorer l’efficacité des produits à cellules expansées afin d’obtenir de meilleurs résultats pour un plus grand nombre de patients sans augmenter le risque de GvHD, élargissant ainsi leur utilisation en pratique clinique.

Il a été démontré que l’exercice contribue à réduire le risque de cancer, à améliorer les résultats chez les survivants du cancer et à agir comme adjuvant pour plusieurs thérapies anticancéreuses. Le modèle d'exercice actuel implique une seule séance aiguë d'exercice d'intensité modérée à vigoureuse d'une durée de 20 minutes, qui évoque une mobilisation et une redistribution dépendantes des catécholamines des lymphocytes effecteurs (par exemple, cellules tueuses naturelles, lymphocytes T γδ et lymphocytes T CD8+). Cette réponse pourrait améliorer l'immunosurveillance à long terme en améliorant la reconnaissance et la destruction des cellules précancéreuses et en contribuant à la suppression de la croissance tumorale. La question de recherche primordiale est la suivante : peut-on prélever des lymphocytes à partir du sang pendant la phase de mobilisation induite par l'exercice afin de générer des produits cellulaires supérieurs pour l'immunothérapie du cancer ? La vision globale est de développer des lymphocytes mobilisés par l'exercice dans une thérapie qui augmente l'efficacité à la fois de l'IDD et des produits cellulaires expansés (par exemple, les lymphocytes CAR T, les lymphocytes T γδ, les cellules CIK et les cellules NK de type mémoire induites par les cytokines). pour traiter les rechutes de leucémie/lymphome. Cette nouvelle approche, appelée « DLI-X », a le potentiel d'améliorer une thérapie préexistante pour le traitement des cancers du sang à un coût minime.

Les objectifs de cette proposition sont de mener des comparaisons directes entre le DLI standard et le DLI-X, à la fois in vitro et dans des modèles de souris xénogéniques greffées avec divers cancers hématologiques humains, et d'identifier les mécanismes sous-jacents à l'origine de l'amélioration de l'anti-leucémie/ réponse lymphome du DLI-X.

L'hypothèse globale est que le DLI-X et les produits cellulaires expansés fabriqués à partir de ces lymphocytes mobilisés par l'exercice présenteront des effets GvL améliorés contre de multiples hémopathies malignes par rapport au DLI standard. Ces effets seront induits par les changements transcriptomiques et protéomiques médiés par les récepteurs β2-adrénergiques (β2-AR) qui favorisent la reconnaissance et la cytotoxicité des cellules cibles. De plus, il est proposé que le DLI-X améliore l'efficacité des thérapies combinées telles que le blinatumomab, un activateur de lymphocytes T bi-spécifique, et les anticorps monoclonaux conçus pour augmenter la cytotoxicité cellulaire dépendante des anticorps (ADCC), améliorant ainsi la suppression de la croissance tumorale et les effets GvL de l’IDD.

Objectifs spécifiques :

1. Évaluez comment des séances aiguës et uniques d'exercices d'intensité modérée à vigoureuse d'une durée de 20 minutes influencent le nombre, le phénotype et les caractéristiques moléculaires des cellules immunitaires dans le sang.
2. Déterminez si les cellules immunitaires collectées après l'exercice donnent des produits thérapeutiques supérieurs par rapport à celles collectées dans des conditions de repos auprès du même donneur.
3. Étudier le rôle de la signalisation des récepteurs adrénergiques dans la médiation de ces effets

Procédures :

Les participants en bonne santé seront recrutés dans trois bras (cohortes) distincts de cette étude : (1) Cohorte d'exercice ; (2) Cohorte exercice + bêtabloquant ; et/ou (3) cohorte de perfusion d'isoprotérénol. Les participants peuvent s'inscrire dans un, deux ou les trois bras d'étude. Les procédures pour chaque cohorte sont décrites ci-dessous.

Cohorte d'exercices Les participants à la cohorte d'exercices devront visiter le laboratoire pour trois séances distinctes entre 8h00 et 10h00. Lors de chaque visite, le personnel confirmera le respect des directives préalables au test (par exemple, 8 à 12 heures de jeûne et aucune activité physique vigoureuse). Tout participant ne respectant pas ces directives sera reprogrammé.

Visite de cohorte d'exercice 1 : dépistage et test d'effort progressif Engagement de durée : 60 minutes

1. Consentement éclairé : un membre de l'équipe de recherche obtiendra le consentement éclairé écrit du participant.
2. Questionnaire de présélection : les participants rempliront le questionnaire de présélection AHA/ACSM pour vérifier que les critères d'inclusion et d'exclusion sont remplis.
3. Mesures anthropométriques : La taille et le poids seront mesurés.
4. Échantillons de sang : un échantillon de sang capillaire prélevé au doigt sera prélevé (à l'aide d'une lancette stérile à ressort) pour la quantification du cholestérol total et de la glycémie à jeun, à l'aide d'un analyseur portatif automatisé (Cardiocheck).
5. Mesure de la pression artérielle : la pression artérielle au repos sera mesurée à l'aide d'un brassard de tension artérielle manuel ou automatisé.
6. Stratification des risques : les participants jugés inéligibles après la sélection seront exclus de toute participation ultérieure.
7. Test d'exercice progressif : les participants effectueront un protocole d'exercice maximal sur un vélo stationnaire d'intérieur. Ils porteront un moniteur de fréquence cardiaque et un masque facial connecté à un chariot métabolique pour une mesure continue de la fréquence cardiaque et des gaz respiratoires. Le test débutera à 50 watts pour les femmes et 75 watts pour les hommes, avec une puissance augmentée de 15 watts chaque minute jusqu'à épuisement. La consommation maximale d'oxygène (VO2max), le seuil ventilatoire et la puissance de cyclage maximale seront déterminés.

Visites de cohorte d'exercices 2 et 3 Engagement de temps : 2 heures par visite Les participants retourneront au laboratoire 3 à 10 jours après la visite 1 et 7 à 14 jours après la visite 2.

1. Procédures préalables à l'exercice : Un cathéter IV sera inséré dans une veine périphérique du bras par un phlébotomiste qualifié. Un échantillon de sang avant l'exercice (environ 120 ml) sera prélevé.
2. Protocole d'exercice : les participants participeront à une séance de 20 minutes d'exercices cyclistes modérés à vigoureux à des puissances correspondant à 50 %, 60 %, 70 % et 80 % de leur consommation maximale prédéterminée d'oxygène (VO2max) pendant 5 minutes. incréments. Les participants ne seront pas épuisés pendant ces essais. Les mesures de la tension artérielle et les évaluations de l'effort perçu seront collectées toutes les 5 minutes pendant la séance d'exercice et immédiatement après.
3. Prélèvement de sang pendant l'exercice : des échantillons de sang veineux supplémentaires (volume total pendant l'exercice : 80 mL) seront collectés via le cathéter IV à différentes étapes du protocole d'exercice.
4. Prise de sang post-exercice : Une dernière prise de sang de 15 mL sera prélevée 1 heure après l'exercice.

Volume sanguin total : les participants donneront un total de 215 ml de sang (120 ml avant l'exercice, 80 ml pendant l'exercice et 15 ml après l'exercice) par visite, pour un total de 430 ml pour les deux visites. De plus, plusieurs gouttelettes de sang capillaire (environ 10 à 20 µL) seront collectées lors de la visite 1 à des fins de dépistage.

Les procédures pour les visites 2 et 3 seront identiques. La justification de deux visites est d'obtenir suffisamment de sang pour générer plusieurs produits cellulaires thérapeutiques à partir du même donneur. Le temps total consacré à cette cohorte est d'environ 5 heures.

Cohorte Exercice + Bêta-Bloqueur

Engagement de temps : 21 heures Les participants à la cohorte Exercice + Bêta-bloquant devront visiter le laboratoire pour six séances distinctes entre 8h00 et 10h00, qui s'étaleront sur 6 à 10 semaines. Lors de chaque visite, le personnel de l'étude confirmera le respect des directives préalables aux tests (par exemple, 8 à 12 heures de jeûne et aucune activité physique vigoureuse). Tout participant ne respectant pas ces directives sera reprogrammé.

Visite de cohorte exercice + bêta-bloquant 1 - Engagement de durée du test d'exercice progressif : 60 minutes. Les participants effectueront un test d'effort progressif sur un vélo stationnaire d'intérieur pour déterminer leur consommation maximale d'oxygène (VO₂max) et leur puissance de cyclisme maximale. Ce test garantira les niveaux d'intensité appropriés pour les essais d'exercices ultérieurs.

Visites de cohorte exercice + bêtabloquant 2 à 6 - Engagement de temps pour les essais d'exercice : 20 heures

Les cinq visites restantes consisteront en les principaux essais d'exercices, où les participants subiront les procédures suivantes. Il y aura une période de 7 à 10 jours entre chaque visite d'essai d'exercice pour permettre la récupération et minimiser les effets potentiels des médicaments administrés :

1. Administration des médicaments : les essais de médicaments seront menés dans un cadre randomisé en double aveugle pour garantir que ni l'expérimentateur ni le participant ne savent quel essai a lieu. La randomisation sera calculée par un membre de l'équipe de recherche non impliqué dans la réalisation des essais d'exercice. Le moment de l'administration du médicament est basé sur les concentrations plasmatiques maximales de chaque médicament. 3 heures, 2 heures et 1 heure avant chaque essai d'exercice, les participants recevront soit un médicament, soit une pilule placebo selon le schéma suivant :

   Essai 1 : Placebo à tous les instants Essai 2 : Nadolol à 3 heures Placebo à 2 heures et 1 heure Essai 3 : Bisoprolol à 3 heures Placebo à 2 heures et 1 heure Essai 4 : Placebo à 3 heures et 1 heure, Carvédilol à 2 heures heures Essai 5 : Bisoprolol à 3 heures, Placebo à 2 heures, Roflumilast à 1 heure

2. Procédures pré-médicament : Avant l'ingestion du médicament ou du placebo, un cathéter IV sera inséré dans une veine périphérique du bras par un phlébotomiste qualifié. Un échantillon de sang pré-médicament sera prélevé.
3. Échantillon de sang post-médicament et pré-exercice : après l'ingestion du médicament ou du placebo et 30 minutes avant le début de l'exercice, un échantillon de sang post-médicament et pré-exercice sera prélevé.
4. Protocole d'exercice : les participants participeront à une séance de 20 minutes d'exercices cyclistes modérés à vigoureux à des puissances correspondant à 50 %, 60 %, 70 % et 80 % de leur VO₂max prédéterminé par incréments de 5 minutes. Les participants ne seront pas épuisés pendant ces essais. Les mesures de la tension artérielle et les évaluations de l'effort perçu seront collectées toutes les 5 minutes pendant la séance d'exercice et immédiatement après.
5. Prélèvement de sang pendant l'exercice : des échantillons de sang veineux supplémentaires seront prélevés via le cathéter IV à différents moments tout au long du protocole d'exercice.
6. Échantillons de sang de récupération après l'exercice : des échantillons de sang supplémentaires seront prélevés pendant la phase de récupération, à différents moments allant de 5 à 60 minutes après l'exercice.

Volume sanguin total : les participants de cette cohorte donneront un total d'environ 220 ml de sang par visite. Le volume sanguin total cumulé pour cette cohorte au cours des six visites est d'environ 1 320 ml.

Cohorte Isoprotérénol Les participants à la cohorte Isoprotérénol devront visiter le laboratoire pour trois séances distinctes entre 8h00 et 10h00. Lors de chaque visite, le personnel de l'étude confirmera le respect des directives préalables aux tests (par exemple, 8 à 12 heures de jeûne et aucune activité physique vigoureuse). Tout participant ne respectant pas ces directives sera reprogrammé.

Visite de cohorte d'isoprotérénol 1 : dépistage et engagement en matière de durée de perfusion d'isoprotérénol : 2 heures

1. Consentement éclairé : un membre de l'équipe de recherche obtiendra le consentement éclairé écrit du participant.
2. Questionnaire de présélection : les participants rempliront le questionnaire de présélection AHA/ACSM pour vérifier que les critères d'inclusion et d'exclusion sont remplis.
3. Mesures anthropométriques : La taille et le poids seront mesurés.
4. Échantillons de sang : un échantillon de sang capillaire prélevé au doigt sera prélevé (à l'aide d'une lancette stérile à ressort) pour la quantification du cholestérol total et de la glycémie à jeun, à l'aide d'un analyseur portatif automatisé (Cardiocheck).
5. Mesure de la pression artérielle : la pression artérielle au repos sera mesurée à l'aide d'un brassard de tension artérielle manuel ou automatisé.
6. Stratification des risques : les participants jugés inéligibles après la sélection seront exclus de toute participation ultérieure.
7. Procédures pré-perfusion : le participant sera équipé d'électrodes attachées à un électrocardiogramme (ECG ; 12 dérivations) et recevra une lecture ECG au repos, qui sera surveillée par un médecin cardiologue. Le cardiologue prendra la décision de procéder à la perfusion ou d'exclure le participant de l'étude. Deux cathéters IV seront insérés dans les veines périphériques bilatérales du bras par un phlébotomiste qualifié. Un cathéter sera utilisé pour administrer l'isoprotérénol et un autre sera utilisé pour prélever des échantillons de sang. Un échantillon de sang pré-perfusion (environ 120 ml) sera prélevé.
8. Protocole de perfusion d'isoprotérénol : les participants recevront une perfusion continue d'isoprotérénol pendant 20 minutes à une concentration de 50 ng/min/kg. Les mesures de la pression artérielle seront collectées toutes les 5 minutes pendant la perfusion et l'activité ECG sera surveillée en continu. Un médecin cardiologue surveillera toute la procédure de perfusion.
9. Prélèvement de sang pendant la perfusion : des échantillons de sang veineux supplémentaires (volume total pendant l'exercice : 80 mL) seront prélevés via le cathéter IV au cours des 5 dernières minutes du protocole de perfusion.
10. Prise de sang post-perfusion : une dernière prise de sang de 15 mL sera prélevée 1 heure après l'exercice.

Volume sanguin total : les participants donneront un total de 215 mL de sang (120 mL avant la perfusion, 80 mL pendant la perfusion et 15 mL après la perfusion) au cours de cette visite. De plus, plusieurs gouttelettes de sang capillaire (environ 10 à 20 µL) seront collectées lors de la visite 1 à des fins de dépistage.

Mesures des résultats :

Les mesures des résultats pour les trois cohortes seront identiques, comme décrit dans la section « Mesures des résultats » de ce protocole.