同種細胞療法の免疫アジュバントとしての運動 (Allo-X)

背景：

同種細胞療法には、ドナーリンパ球注入（DLI）や、キメラ抗原受容体（CAR）T細胞、ガンマデルタ（γδ）T細胞、サイトカイン誘導性キラー（CIK）細胞、サイトカインなどの操作された免疫細胞産物など、さまざまなアプローチが含まれます。 -誘導された記憶様ナチュラルキラー（NK）細胞。 これらの治療法は、高リスク患者の白血病再発を予防または治療するために、同種造血細胞移植（alloHCT）後に一般的に採用されています。 しかし、これらの治療法は可能性を示していますが、DLI および拡大細胞製剤の成功率は依然として限られています。 特に DLI は、ドナー T 細胞が健康な組織を攻撃し、重大な罹患率につながる移植片対宿主病 (GvHD) を誘発するリスクを伴います。 さらに、拡張セル製品は製造時間、有効性、コストに関する課題に直面しており、入手しやすさや有効性が制限される可能性があります。 したがって、DLI の移植片対白血病/リンパ腫 (GvL) 効果を強化し、GvHD のリスクを増加させることなく、より多くの患者に対してより良い転帰を達成するために拡大細胞産物の有効性を向上させることが重要な必要性があり、それによって感染拡大のリスクが拡大します。臨床現場でのそれらの使用。

運動は、がんリスクの低下に貢献し、がん生存者の転帰を改善し、いくつかのがん治療のアジュバントとして機能することが示されています。 本運動モデルは、20 分間続く中程度から激しい運動の急性の 1 回の運動を含み、これにより、カテコールアミン依存性のエフェクターリンパ球 (例: ナチュラル キラー細胞、γδ T 細胞、CD8+ T 細胞) の動員と再分布が引き起こされます。 この反応は、前癌細胞の認識と破壊を改善し、腫瘍増殖の抑制に寄与することにより、長期的な免疫監視を強化する可能性があります。 最も重要な研究課題は、運動誘発性動員段階で血液からリンパ球を収集して、がん免疫療法用の優れた細胞産物を生成できるかどうかということです。 全体的なビジョンは、運動動員リンパ球を、DLI と拡張細胞産物 (CAR T 細胞、γδ T 細胞、CIK 細胞、サイトカイン誘導性記憶様 NK 細胞など) の両方の有効性を高める治療法に開発することです。白血病/リンパ腫の再発の治療に。 「DLI-X」と呼ばれるこの新しいアプローチは、血液がんの既存の治療法を最小限の費用で改善できる可能性があります。

この提案の目的は、インビトロおよびさまざまなヒト血液がんを移植した異種マウスモデルの両方で、標準的な DLI と DLI-X の直接比較を実施し、抗白血病の増強を促進する根本的なメカニズムを特定することです。 DLI-X のリンパ腫反応。

包括的な仮説は、DLI-X およびこれらの運動動員リンパ球から製造された増殖細胞産物は、標準的な DLI と比較して、複数の血液悪性腫瘍に対して強化された GvL 効果を示すということです。 これらの効果は、標的細胞の認識と細胞毒性を促進する、β2 アドレナリン受容体 (β2-AR) を介したトランスクリプトームおよびプロテオームの変化によって引き起こされます。 さらに、DLI-X は、二重特異性 T 細胞エンゲージャーであるブリナツモマブ、および抗体依存性細胞傷害 (ADCC) を増加させるように設計されたモノクローナル抗体などの併用療法の有効性を改善し、それによって腫瘍の増殖抑制を強化し、 DLI の GvL 効果。

具体的な目的:

1. 20 分間続く中程度から激しい強度の急性の 1 回の運動が、血液中の免疫細胞の数、表現型、分子特性にどのような影響を与えるかを評価します。
2. 運動後に採取された免疫細胞が、同じドナーから安静条件下で採取された免疫細胞と比較して優れた治療産物を生み出すかどうかを判定します。
3. これらの効果を媒介するアドレナリン受容体シグナル伝達の役割を調査する

手順:

健康な参加者は、この研究の 3 つの異なる部門 (コホート) に集められます。(1) 運動コホート。 (2) 運動 + ベータ遮断薬コホート;および/または (3) イソプロテレノール注入コホート。 参加者は、1 つ、2 つ、または 3 つすべての研究部門に登録できます。 各コホートの手順の概要を以下に示します。

運動コホート 運動コホートの参加者は、08:00 から 10:00 までの 3 つの別々のセッションのために研究室を訪問するようにスケジュールされます。 毎回の訪問中に、スタッフは検査前ガイドラインの順守を確認します（例：8～12時間の絶食と激しい身体活動の禁止）。 これらのガイドラインを満たさない参加者は、スケジュールが変更されます。

運動コホート訪問 1: スクリーニングと段階別運動テスト 所要時間: 60 分

1. インフォームド・コンセント: 研究チームのメンバーは、参加者から書面によるインフォームド・コンセントを取得します。
2. 事前スクリーニングアンケート: 参加者は、AHA/ACSM 事前スクリーニングアンケートに回答し、包含基準と除外基準が満たされていることを確認します。
3. 身体測定：身長と体重を測定します。
4. 血液サンプル: 自動ハンドヘルド分析装置 (Cardiocheck) を使用して、総コレステロールと空腹時血糖の定量化のために、指刺し毛細管血液サンプルを (滅菌バネ式ランセットを使用して) 収集します。
5. 血圧測定: 安静時血圧は、手動または自動の血圧計を使用して測定されます。
6. リスクの階層化: スクリーニング後に不適格とみなされた参加者は、それ以降の参加から除外されます。
7. 段階的運動テスト: 参加者は屋内エアロバイクで最大限の運動プロトコルを実行します。 彼らは、心拍数と呼吸ガスを継続的に測定するために、代謝カートに接続された心拍数モニターとフェイスマスクを着用します。 テストは女性の場合は 50 ワット、男性の場合は 75 ワットで開始され、力が尽きるまで毎分 15 ワットずつ出力が増加します。 最大酸素摂取量 (VO2max)、換気閾値、およびピークサイクリング出力が決定されます。

運動コホート訪問 2 および 3 時間約束: 訪問あたり 2 時間参加者は訪問 1 から 3 ～ 10 日後、訪問 2 から 7 ～ 14 日後に研究室に戻ります。

1. 運動前の手順: 訓練を受けた瀉血専門医によって、末梢腕の静脈に IV カテーテルが挿入されます。 運動前に血液サンプル (約 120 mL) を採取します。
2. 運動プロトコル: 参加者は、所定の最大酸素摂取量 (VO2max) の 50%、60%、70%、および 80% に相当する出力で、中程度から激しいサイクリング運動の 20 分間のセッションを 5 分間行います。増加します。 参加者は、これらの試験中に疲労困憊するまで運動することはありません。 血圧測定値と知覚された運動の評価は、運動セッション中およびその直後に 5 分ごとに収集されます。
3. 運動中の血液サンプリング: 運動プロトコルのさまざまな段階で、追加の静脈血サンプル (運動中の総量: 80 mL) が IV カテーテルを介して収集されます。
4. 運動後の採血: 運動の 1 時間後に最終採血 15 mL を採取します。

総血液量: 参加者は、1 回の訪問につき合計 215 mL (運動前 120 mL、運動中 80 mL、運動後 15 mL) を献血し、両方の訪問で合計 430 mL を献血します。 さらに、スクリーニング目的で、訪問 1 中に毛細管血の数滴 (約 10 ～ 20 μL) が収集されます。

訪問 2 と訪問 3 の手順は同じです。 2 回の訪問の理論的根拠は、同じドナーから複数の治療用細胞産物を生成するのに十分な血液を採取することです。 このコホートの合計所要時間は約 5 時間です。

運動 + ベータ遮断薬コホート

拘束時間: 21 時間 エクササイズ + ベータ遮断薬コホートの参加者は、08:00 から 10:00 までの 6 回のセッションに分かれて研究室を訪問する予定であり、6 ～ 10 週間にわたって行われます。 各訪問中、研究スタッフは試験前ガイドライン（例：8～12時間の絶食と激しい身体活動の禁止）の順守を確認します。 これらのガイドラインを満たさない参加者は、スケジュールが変更されます。

運動 + ベータ ブロッカー コホート訪問 1 - 段階的な運動テストの約束時間: 60 分。 参加者は屋内エアロバイクで段階的な運動テストを完了し、最大酸素摂取量 (VO₂max) とピークサイクリングパワーを決定します。 このテストにより、その後の運動トライアルに適切な強度レベルが確保されるようになります。

運動 + ベータ遮断薬コホート訪問 2 ～ 6 - 運動トライアルの所要時間: 20 時間

残りの 5 回の訪問はメインの演習トライアルで構成され、参加者は以下の手順を受けます。 回復を可能にし、投与された薬物による潜在的なキャリーオーバー効果を最小限に抑えるために、各運動試験訪問の間には 7 ～ 10 日の期間が設けられます。

1. 薬剤投与: 薬剤試験は、実験者も参加者もどの試験が行われているかを確実に知ることができないように、ブロック化されたランダム化二重盲検設定で実施されます。 ランダム化は、運動試験の実施に関与していない研究チームのメンバーによって計算されます。 薬物投与のタイミングは、各薬物のピーク血漿濃度に基づいています。 各運動トライアルの 3 時間、2 時間、1 時間前に、参加者には次の概要に従って薬物またはプラセボ錠剤が投与されます。

   試験 1: すべての時点でのプラセボ 試験 2: 3 時間でのナドロール 2 時間と 1 時間でのプラセボ 試験 3: 3 時間でのビソプロロール 2 時間と 1 時間でのプラセボ 試験 4: 3 時間と 1 時間でプラセボ、2 時間でカルベジロール試験 5: ビソプロロール 3 時間、プラセボ 2 時間、ロフルミラスト 1 時間

2. 投薬前の手順: 薬物またはプラセボを摂取する前に、訓練を受けた瀉血専門医によって IV カテーテルが末梢腕の静脈に挿入されます。 投薬前の血液サンプルが収集されます。
3. 薬物投与後、運動前の血液サンプル: 薬物またはプラセボを摂取した後、運動を開始する 30 分前に、薬物投与後、運動前の血液サンプルが採取されます。
4. 運動プロトコル: 参加者は、所定の VO₂max の 50%、60%、70%、80% に相当するパワー出力で、5 分刻みで中程度から激しいサイクリング運動の 20 分間のセッションに取り組みます。 参加者は、これらの試験中に疲労困憊するまで運動することはありません。 血圧測定値と知覚された運動の評価は、運動セッション中およびその直後に 5 分ごとに収集されます。
5. 運動中の血液サンプリング: 運動プロトコル全体のさまざまな時点で、追加の静脈血サンプルが IV カテーテルを介して収集されます。
6. 運動後の回復血液サンプル: 回復段階中に、運動後 5 ～ 60 分の範囲のさまざまな時点で追加の血液サンプルが収集されます。

総血液量: このコホートの参加者は、1 回の訪問につき合計約 220 mL の血液を献血します。 このコホートの 6 回の訪問すべての累積総血液量は約 1,320 mL です。

イソプロテレノール コホート イソプロテレノール コホートの参加者は、08:00 から 10:00 までの 3 つの別々のセッションのために研究室を訪れる予定です。 各訪問中、研究スタッフは試験前ガイドライン（例：8～12時間の絶食と激しい身体活動の禁止）の順守を確認します。 これらのガイドラインを満たさない参加者は、スケジュールが変更されます。

イソプロテレノール コホート 訪問 1: スクリーニングとイソプロテレノール注入 約束時間: 2 時間

1. インフォームド・コンセント: 研究チームのメンバーは、参加者から書面によるインフォームド・コンセントを取得します。
2. 事前スクリーニングアンケート: 参加者は、AHA/ACSM 事前スクリーニングアンケートに回答し、包含基準と除外基準が満たされていることを確認します。
3. 身体測定：身長と体重を測定します。
4. 血液サンプル: 自動ハンドヘルド分析装置 (Cardiocheck) を使用して、総コレステロールと空腹時血糖の定量化のために、指刺し毛細管血液サンプルを (滅菌バネ式ランセットを使用して) 収集します。
5. 血圧測定: 安静時血圧は、手動または自動の血圧計を使用して測定されます。
6. リスクの階層化: スクリーニング後に不適格とみなされた参加者は、それ以降の参加から除外されます。
7. 注入前の手順: 参加者には心電図 (ECG; 12 リード) に取り付けられた電極が取り付けられ、安静時の ECG 読み取り値が取得され、心臓専門医によって監視されます。 心臓専門医は、注入を続行するか、参加者を研究から除外するかを決定します。 訓練を受けた瀉血専門医によって、2 本の IV カテーテルが両側末梢腕静脈に挿入されます。 1 つのカテーテルはイソプロテレノールの送達に使用され、もう 1 つは血液サンプルの収集に使用されます。 注入前の血液サンプル (約 120 mL) が収集されます。
8. イソプロテレノール注入プロトコル: 参加者は、50 ng/分/kg の濃度でイソプロテレノールを 20 分間持続注入します。 血圧測定値は点滴中 5 分ごとに収集され、ECG 活動は継続的に監視されます。 心臓専門医が注入手順全体を監視します。
9. 注入中の血液サンプリング: 追加の静脈血サンプル (運動中の総量: 80 mL) が、注入プロトコルの最後の 5 分間に IV カテーテルを介して収集されます。
10. 注入後の採血: 運動の 1 時間後に 15 mL の最終採血が収集されます。

総血液量: 参加者は、今回の訪問中に合計 215 mL の血液 (注入前 120 mL、注入中 80 mL、注入後 15 mL) を献血します。 さらに、スクリーニング目的で、訪問 1 中に毛細管血の数滴 (約 10 ～ 20 μL) が収集されます。

結果の尺度:

3 つのコホートすべての結果の尺度は、このプロトコルの「結果の尺度」セクションで説明されているように同一になります。