A szájnyálkahártya hámjának szaruhártya epitéliummá történő transzdifferenciálására vonatkozó jegyzőkönyv végrehajtása (TransBuCor)

1. Emlékezzünk a szaruhártya anatómiájára és szövettanára

   A szaruhártya a látás elengedhetetlen alkotóeleme: gyakran a szem elülső részén található első „átlátszó lőrésnek” nevezik. Ez az első olyan szerkezet, amellyel a fény a szembe jutva találkozik. Elsődleges szerepe a beeső fénysugarak konvergálása, amelyek azután a lencse felé haladnak, mielőtt elérnék a retinát és elindítanák a vizuális kaszkádot.

   A szaruhártya egy vaszkuláris és átlátszó szövet, amely öt rétegből áll: szaruhártya epitélium, Bowman réteg, szaruhártya stroma, Descemet membrán és szaruhártya endotélium.

   • A szaruhártya epitélium a szaruhártya legkülső rétege, amely szaruhártya hámsejtekből áll, és a teljes szaruhártya körülbelül 10%-át teszi ki. Ez a réteg folyamatosan regenerálódik, hétnaponként teljes megújulással. Ezen a rétegen a karcolások általában jól gyógyulnak.
   • A Bowman-réteg segít a szaruhártya epitéliumának és a stromának egymáshoz kötődésében. Ez a réteg nem tud regenerálódni, ha egyszer megsérült, ami tartós hegekhez vezethet, amelyek befolyásolhatják a látást.
   • A szaruhártya stroma a szaruhártya körülbelül 90%-át teszi ki, és kollagénből és keratocitákból áll.
   • A Descemet membránja kollagénből áll, és elválasztja a szaruhártya stromáját az endotéliumtól. Ez a réteg az életkorral fokozatosan vastagodik.
   • A szaruhártya endotélium a legbelső réteg, és segíti a folyadék szállítását a szaruhártya más rétegeiből. Ennek a rétegnek a sérülése veszélyeztetheti ezt a folyamatot, és negatívan befolyásolhatja a személy látását.

2. A szaruhártya hám megújulási és gyógyulási folyamata

   A szaruhártya hámsejtek 3-10 napon belül regenerálódnak a limbusnál (a szaruhártya és a sclera közötti átmeneti zónában) elhelyezkedő limbális őssejtek állandó megújulása révén a bazális sejtrétegben, a Vogt-palisádoknak nevezett pigmentált kriptákban.

   A limbális őssejtek hiányát (LSCD) a szaruhártya epiteliális újrapopulációjához és a limbális gát funkciójához elengedhetetlen limbális őssejtek elvesztése vagy károsodása jellemzi.

   Az LSCD etiológiája lehet genetikai (PAX6), krónikus gyulladás (például súlyos allergiás keratoconjunctivitis vagy okuláris rosacea), fertőzés, például herpetikus keratitis, vagy másodlagos hólyagos betegség, például Steven-Johnson szindróma vagy Lyell-szindróma következtében. Az LSCD-t vegyi vagy termikus égési sérülések során is megszerezhetik. Az etiológiák idiopátiásak is lehetnek.

   Amikor ezek az őssejtek elvesznek, a szaruhártya epitélium nem képes helyreállítani és megújulni. Ez hámdegradációhoz, tartós hámhibákhoz, kötőhártya-képződéshez, szaruhártya neovaszkularizációjához, szaruhártya hegekhez és krónikus gyulladáshoz vezet. Ezek a tényezők hozzájárulnak a fotofóbiához, a szaruhártya tisztaságának elvesztéséhez, a látásvesztéshez és a krónikus fájdalomhoz. Ez lehetetlenné teszi a szaruhártya-átültetést, mivel az kilökődik és/vagy gyengén gyógyulna.

   A szaruhártya-vakság ezen okának kezelésére jelenleg rendelkezésre álló megoldások korlátozottak. A technikák közé tartozik az autológ limbális graft a páciens ellenoldali szeméből, de ez kockázatot jelenthet, és nem lehetséges, ha a patológia kétoldali. Az allogén graftok nagy kilökődési kockázatot jelentenek, és szisztémás immunszuppresszív kezelést igényelnek.

3. Nyálkahártya graftok a periorbitális rekonstrukcióban

A szájnyálkahártya-átültetés jól bevált sebészeti technika a kötőhártya-hiányok és hegek kezelésére. A szájnyálkahártya a kötőhártyához hasonló biológiai tulajdonságokkal rendelkezik, mindkettő egy vagy több hámsejtrétegből áll, amelyek egy laza kötőszöveti réteget takarnak. Többször is betakarítható, a donor hely könnyen elérhető és széles körben elérhető. A donor helyén a morbiditás alacsony, és a betegek általában jól tolerálják a műtétet. Ezenkívül a műtéti technika viszonylag egyszerű, így a szájnyálkahártya ideális jelölt a kötőhártya-rendellenességek pótlására.

A szájnyálkahártya graftokat nemcsak anoftalmiás betegek összehúzódó üregeinek kezelésére, daganatreszekció után a szemfelszín és a fornix rekonstrukciójára használták, hanem refraktív pterygium és pemphigoid vagy okuláris symblepharon betegek kezelésére is. Ez a leggyakrabban használt szövet a műtét utáni szövődmények kezelésében is, beleértve a glaukóma utáni kötőhártya-elégtelenségeket, a retinaműtétet, a keratoprotézissel összefüggő szaruhártya-olvadást és a dacryocystorhinostomiás traktus lefedését. Ezenkívül a szájnyálkahártyát a súlyos kémiai égési sérülések által okozott nehezen kezelhető szklero-szaruhártya-olvadások helyreállítására használták.

Egyes csapatok a szájnyálkahártya-sejtek használatát javasolták, és limbális őssejtekké transzdifferenciálják őket. A szájüreg könnyen hozzáférhető, a nyálkahártyából őssejtek izolálhatók minimálisan invazív módon, a beteg számára alacsony kockázattal. Ezek a sejtek nagy differenciálódási potenciállal rendelkeznek, és embrionális őssejtek markereit expresszálják; Tra2-49, Tra2-54, SSEA4, Oct4, Sox2 és Nanog, valamint az idegi címerjelző, a Nestin. Az emberkísérletek azonban még csak az előzetes stádiumban vannak, és a mai napig nem validálták a terápiát.

Ebben a koncepcionális vizsgálatban a cél egy protokoll kidolgozása a szájnyálkahártya-sejtek limbális őssejtekké történő differenciálására, amelyet a betegekkel végzett jövőbeni klinikai vizsgálatok során használhatnak fel.