A nyál biomarker szintjének értékelése különböző fogágybetegségben szenvedő egyéneknél

Ennek a klinikai vizsgálatnak a célja az IL-6, IL-8 és LIGHT Protein szintjének összehasonlító vizsgálata olyan nyálmintákban, amelyeket fogágygyulladásban és parodontitisben szenvedő betegektől vettek, akik klinikánkon jelentkeztek rutin periodontális kontrollra. A kapott eredményekkel összhangban; a tervek szerint meghatározzák, hogy ezek a biokémiai mediátorok milyen diagnosztikai markerként alkalmazhatók a parodontális betegségek diagnosztizálásában.

A parodontitis a világ felnőtt lakosságának 10-15%-át érintő multifaktoriális betegség, amely a mikrobiális foglepedék miatt alakul ki, és a klinikai kötődés elvesztésével, valamint a kötőszövet és az alveoláris csont pusztulásával jellemezhető. Ha nem kezelik, a gyulladás mélyebb szövetekbe hatol, és megváltoztatja a csontháztartást, ami fogvesztéshez vezet.

Az ínygyulladás az ínygyulladás, amely nem okoz károsodást a fogat körülvevő szövetekben, és az íny ödémája és a szájban lévő területek több mint 10%-án vérzés jellemzi. A fogágybetegségek 2017-es osztályozása szerint a fogínygyulladást két részre osztják: plakk okozta ínygyulladás és nem fogplakk okozta ínygyulladás. Az ínygyulladás gyakran fájdalommentes és ritkán spontán vérzés figyelhető meg, és ezen okok miatt az egyének későn ismerhetik fel a betegséget. Ezért fontos a fogínygyulladás korai diagnosztizálása, hogy megelőzzük a fogínygyulladás progresszív csont- és kötőszövet-destrukcióval jellemezhető parodontitissé való átalakulását.

Tanulmányok kimutatták, hogy több mint 700 baktérium képes megtelepedni az emberi szájüregben, de átlagosan 200-300 baktériumfaj található az egyén szájában. E baktériumok között vannak a fogíny egészségével kapcsolatos baktériumok, mint például a Porphyromonas gingivalis (Pg), a Tannerella forsythensis (Tf) és a Treponema denticola (Td), amelyeket vörös komplex baktériumoknak neveznek; A Fusobacterium nucleatum (Fn) alfaja, a Prevotella intermedia (Pi) és az Aggregatibacter actinomycetemcomitans (Aa), amelyek egyik csoporthoz sem tartoznak, aktív szövetpusztulással és a parodontitis betegség progressziójával járultak hozzá.

A plakk kulcshipotézis szerint, amely a jelenleg elfogadott plakkhipotézisek egyike, a magas patogenitású baktériumok, különösen a P. Gingivalis és az Aggregatibacter Actinomycetemcomitans azon képessége, hogy alacsony plakkkoncentrációjuk ellenére gazdaszervezet immunválaszt generálnak és szövetpusztulást okoznak. hangsúlyozta. Kimutatták, hogy a patogén baktériumok inkább a gazdaszervezet immunválaszát befolyásolják, semmint a gyulladásos csont- és kötőszövet-pusztulást. A fogágybetegség patogenezisének egyik fontos pontja a citokinek, a szerzett immunrendszer egyik tagja. Tanulmányok kimutatták, hogy a proinflammatorikus citokinek, például az interleukin-6 (IL-6), IL-8, interleukin-1 (IL-1) tumornekrózis faktor-α (TNF-α) mennyisége megnő a vérplazmában, a nyálban és a fogínyben. horonyfolyadék.

A LIGHT fehérjét (TNFSF-14), amely a tumor nekrózis faktor szupercsalád (TNFSF) tagja, főként T-sejtek és éretlen dendritikus sejtek választják ki, de kiválasztják az immunológiai szerepet betöltő sejtek is, mint a monociták, granulociták, lépsejtek és lép. sejteket. A LIGHT képes megkötni a HVEM-et és három membránhoz kötött TNFSF jelátviteli receptort, nevezetesen a limfotoxin béta receptort (LTβR) és a DcR3-at. A LIGHT-LTβR kötődésről kimutatták, hogy apoptózist indukál. Míg a HVEM endoteliális, dendritikus, természetes ölő-, T- és B-sejteken expresszálódik, az LTβR fibroblasztokon, monocitákon, endoteliális, epiteliális és stromasejteken expresszálódik. A LIGHT fehérje és a HVEM vagy LTβR kölcsönhatása Nuclear-Factor-kappaB aktivációt és végső soron citokintermelést eredményez. Azt is kimutatták, hogy a LIGHT fehérje képes kostimulálni a T-sejtes választ a HVEM-en keresztül, beleértve a CD4+ és CD8+ T-sejteket is.

A rheumatoid arthritis krónikus, destruktív gyulladásos betegség. A proinflammatorikus citokinek, például az IL-1, a TNF-a, a mátrix metalloproteináz (MMP-8, MMP-9) szintje megnövekszik rheumatoid arthritisben és parodontitisben. Ezen okok miatt hasonlóságok vannak a parodontitis és a rheumatoid arthritis immunpatogenezise között. Egy rheumatoid arthritises betegeken végzett vizsgálatban a LIGHT fehérje fontos proinflammatorikus biomarkernek bizonyult, amely pozitívan korrelált a csontpusztulással és a statisztikailag fokozott csontpusztulással. Egy másik, rheumatoid arthritisben szenvedő betegeken végzett vizsgálatban a LIGHT fehérje szérumszintjét értékelték, és kimutatták, hogy a LIGHT megnövekedett szintje növelte a RANKL-függő oszteoklasztogenezist és a RANKL-től függetlenül megnövelte az osteoclast képződést. A tanulmány másik következtetése az, hogy a LIGHT fehérje szerepet játszhat a helyi és szisztémás csontvesztéssel összefüggő immunpatogén állapotokban.

Egy másik, rheumatoid arthritises betegeken végzett vizsgálatban a LIGHT fokozta a gyulladásos választ a szinoviális fibroblaszt sejtekben, és azt javasolták, hogy ez egy új anticitokin terápia célpontja a rheumatoid arthritis kezelésében.

Egy myeloma multiplex csontbetegségben szenvedő betegeken végzett vizsgálatban a LIGHT fokozta az oszteoklasztogenezist; gátolják az oszteoblaszt fehérjék oszteokalcin, csontszialoprotein és osterix képződését; és gátolják a szklerosztin oszteoblasztogenezist a monocitákból.

Fan et al. , azt vizsgálták, hogy a LIGHT fehérje potenciális gyulladásos biomarker-e. 566 betegnél kimutatták, hogy a LIGHT fehérje 16-szorosára emelkedik a vérszérumban tüdőgyulladás, gyulladásos betegség jelenlétében.

A 2-es típusú diabetes mellitusra a szénhidrát-, lipid- és fehérje-anyagcsere szabályozási zavara jellemző, és a hasnyálmirigy-szigetsejtek károsodott inzulinszekréciója, inzulinrezisztencia vagy a kettő kombinációja okozza. Tanulmányok kimutatták, hogy a parodontitis a diabetes mellitus 6. szövődménye, és pozitív kétirányú korrelációt igazoltak. Egy 2-es típusú diabetes mellitusban szenvedő betegeken végzett vizsgálatban kimutatták, hogy a LIGHT fehérje működési zavart mutatott a hasnyálmirigy-szigetsejtekben, fokozott gyulladásos citokin szekréciót és fokozott gyulladásos válaszképződést mutatott az endothel sejtekben.

Egy myeloma multiplex csontbetegségben szenvedő betegeken végzett vizsgálatban a LIGHT fokozta az oszteoklasztogenezist; gátolják az oszteoblaszt fehérjék osteocalcin, csontszialoprotein és osterix képződését; és gátolják a szklerosztin oszteoblasztogenezist a monocitákból, megvizsgálták, hogy a LIGHT fehérje potenciális gyulladásos biomarker-e. 566 betegnél kimutatták, hogy a LIGHT fehérje 16-szorosára emelkedett a vérszérumban tüdőgyulladás, gyulladásos betegség jelenlétében.

A 2-es típusú diabetes mellitusra jellemző a szénhidrát-, lipid- és fehérje-anyagcsere szabályozási zavara, és a hasnyálmirigy-szigetsejtek károsodott inzulinszekréciója, inzulinrezisztencia vagy a kettő kombinációja okozza. Tanulmányok kimutatták, hogy a parodontitis a diabetes mellitus 6. szövődménye, és pozitív kétirányú korrelációt igazoltak. Egy 2-es típusú diabetes mellitusban szenvedő betegeken végzett vizsgálatban a LIGHT fehérje működési zavart mutatott a hasnyálmirigy-szigetsejtekben, megnövekedett gyulladásos citokinek szekréciót és fokozott gyulladásos választ az endothel sejtekben.

Vizsgálatunk kiindulópontja egy 2024-ben publikált tanulmány volt, amely a fogínyüreg-folyadékban lévő proinflammatorikus citokineket vizsgálta a parodontális műtét után, és egy lehetséges új biomarker felkutatását tűzte ki célul. E tanulmány szerint a LIGHT serkenti az IL-6 és IL-8 és MMP-9 proinflammatorikus citokinek képződését humán ínyfibroblasztokban, és összefüggésbe hozható a periodontális zsebszondázás mélységének növekedésével a műtét után 12 hónappal. Feltételezték, hogy a LIGHT fehérje szövetpusztulást okoz az emberi íny fibroblaszt sejtjeiben, szövetvesztést okoz a lágy szövetekben és a csontokban, és hozzájárul a parodontitis kialakulásához. Ebben a tanulmányban hangsúlyozták, hogy további vizsgálatokra van szükség a LIGHT és a parodontitis közötti kapcsolat értékeléséhez.

Az interleukin-6 egy többfunkciós citokin, amelyet B-sejt-differenciációs faktorként határoznak meg, amely részt vesz az antitest-termelő sejtek érésében. Az IL-6 egy egyláncú fehérje, amelyet T-sejtek, B-sejtek, monociták, fibroblasztok és néhány más sejttípus termelnek. Az IL-6 kétféleképpen tud jeleket továbbítani a sejtekhez: hagyományos receptorfüggő jelátvitellel és az oldható IL-6 receptorhoz kapcsolódó transz jelátvitellel. Az IL-6 egyik legfontosabb szisztémás hatása az akut fázis válasz indukálása. Ez az akut fázis válasz a proinflammatorikus citokintermelés indukciója és a neutrofil kemotaxis stimulálása. Ezenkívül növeli a C-reaktív fehérje (CRP) szintjét, amely a leggyakoribb akut fázis fehérje az emberekben. Olyan tulajdonságokkal is rendelkezik, mint a T-sejtek aktiválásának és differenciálódásának fokozása, valamint a makrofágok differenciálódásának fokozása.

Az IL-6 fokozza az endothelsejtek proliferációját is, ami IL-8 és monocita kemoattraktáns fehérje szekréciójához vezet. Ezen folyamatok hatására leukociták érkeznek a gyulladás helyére. Az interleukin-1-gyel együtt fokozza a proinflammatorikus MMP enzimek szekrécióját is.

Egy tanulmányban a nem műtéti kezdeti kezelés hatását vizsgálták az IL-6 szintjére egészséges és parodontitiszes betegekben. A vizsgálat eredményei szerint a fogínybarázdás folyadék IL-6 szintje szignifikánsan magasabb volt a parodontitisben szenvedő betegeknél, mint az egészségeseknél. A nem műtéti periodontális kezelést követően statisztikailag szignifikáns csökkenést figyeltek meg az IL-6 szintjében. Ez a tanulmány arra utal, hogy az IL-6 olyan biomarker lehet, amely felhasználható a parodontitis diagnosztizálásában.

Egy patkányokon végzett vizsgálatban kimutatták, hogy az IL-6 szekréció gátlása kísérleti periodontitis esetén leállította az IL-6 által kiváltott gyulladást okozó aktivitást, és csökkentette az alveoláris csontreszorpciót és csökkentette a RANKL termelést.

Egy keresztmetszeti vizsgálatban elemezték az IL-6 és IL-8 szintjét a nyálban és az ínybarázdák folyadékában, amelyet egészséges egyénektől és parodontitisben szenvedő egyénektől nyertünk. Az eredmények szerint az IL-6 és IL-8 szintje mind a nyálban, mind az ínybarázdás folyadékban magasabb a parodontitisben szenvedő betegeknél, mint az egészséges betegeknél.

Az IL-8 egy proinflammatorikus kemokin, és expresszióját elsősorban az aktivátor fehérje és a nukleáris faktor-kappa β által közvetített transzkripciós aktivitás szabályozza. Kimutatták, hogy az IL-8 expresszióját olyan stimulusok szabályozzák, mint a TNF-α, IL-1β, szteroid hormonok, beleértve a gyulladásos jeleket is. Az IL-8-at kemotaktikus aktivitása és a humán neutrofilek degranulációját okozó képessége alapján jellemezték. In vitro két fő hatása van: a kemotaxis és a granulátum enzimek felszabadulása. A gyulladásos helyeken lévő citokinek kemoattraktánsaként és neutrofil aktivátoraként működik, és az endotélsejtek, az íny fibroblasztjai, a monociták, a neutrofilek és a fagociták kiválaszthatják. Az IL-8 szekréciója elősegíti a neutrofilek migrációját az erősen vaszkularizált ínyszövetből a fogínybarázdába. Az IL-8 a patogén baktériumok, például a P. Gingivalis és a T. Forsythia által stimulált ínyhámsejtekből legkorábban szekretált proinflammatorikus citokin, amely a kiválasztódás után egy hétig is fennmarad.

Egy szakirodalmi áttekintő tanulmányban hangsúlyozták, hogy parodontitis jelenlétében az IL-8 szintek száma jelentősen megnőtt, de a különböző vizsgálatok eltérő eredményei miatt további vizsgálatokra van szükség. Egy másik szakirodalmi áttekintő tanulmányban hangsúlyozták, hogy az IL-8 szérumszint potenciális biomarker lehet a parodontitis értékelésében, de további vizsgálatokra van szükség.

A fenti információk szerint a szakirodalomban nem található olyan vizsgálat, amely a nyálminták IL-6, IL-8 és LIGHT szintjét értékelné a parodontális betegség szempontjából. Vizsgálatunk célja ezen citokinek változásának vizsgálata volt parodontális betegség jelenlétében, összehasonlítva az IL-6, IL-8 és LIGHT szinteket egészséges ínygyulladásban és parodontitisben szenvedő egyének nyálmintáiban, hogy megmutassuk, mennyire alkalmazhatók betegség diagnosztizálására, vagy előzetes információkkal szolgáljon az ezen citokin útvonalakon keresztül végrehajtható jövőbeni kezelésekhez.