異常な血小板小胞を有する患者からの巨核球の研究

異常な血小板顆粒によって特徴付けられる先天性出血性疾患には、灰色血小板症候群 (GPS; アルファ顆粒の欠陥)、ヘルマンスキー-プドラック症候群 (HPS; デルタ顆粒の欠陥)、および複合型アルファ デルタ貯蔵プール欠損症 (アルファ デルタ SPD) が含まれます。 血小板ガンマ顆粒のさまざまな欠陥に関連する他の疾患には、Chediak-Higashi、Griscelli、Wiskott-Aldrich、および血小板減少症 Absent Radius 症候群が含まれます。 これらの障害は、巨核球および血小板におけるオルガネラ形成の研究のモデルです。 これらの障害における巨核球生成の特徴は、実験目的に十分な量の巨核球を患者から培養することができなかったため、調査されていません。 最近の進歩により、組換えヒトトロンボポエチン（TPO）を添加した無血清培地を使用して巨核球を培養することが可能になりました。 このような培養ヒト巨核球は、骨髄由来の CD34+ 幹細胞から増幅され、オルガネラタンパク質を合成および保存し、機能的な血小板を生成します。 このプロトコルでは、GPS、HPS、および関連障害を持つ 40 人の子供と大人 (2 歳から 80 歳) から骨髄吸引液を取得する予定です。 特定の疾患関連プロトコルで NIH 臨床センターに入院した患者は、通常の 3 ～ 5 日間の通院中にこのプロトコルに登録されます。 骨髄吸引液から分離したCD34+幹細胞から巨核球を培養します。 培養巨核球の研究には、蛍光抗体と免疫電子顕微鏡を使用した顆粒膜と可溶性タンパク質の評価、および正常細胞と患者細胞間の RNA およびタンパク質発現パターンの比較が含まれます。 骨髄吸引の主要なリスク、すなわち吸引部位での長期出血を防ぐための予防措置が講じられます。 骨髄サンプルに関する標準的な診断研究により、患者に直接役立つ情報が明らかになる可能性があります。 ただし、この研究のより広い利点は、機能性血小板障害の特性と細胞内小胞形成のプロセスをよりよく理解できるようになることです。