フタル酸アレルゲン免疫応答研究 (PAIR)

1. 目的：

   気道免疫、肺機能、鼻アレルギー反応に対するフタル酸エステル類の影響を研究すること。

2. 仮説:

   フタル酸エステルの吸入は、上気道への免疫細胞の動員を増加させ、免疫細胞および上皮細胞の機能に影響を与えます。

   仮説 2: フタル酸エステルの吸入は、吸入アレルゲン攻撃に対する細胞応答を変化させます。

3. 理由:

   フタル酸エステルは可塑剤または軟化剤であり、PVC やその他のプラスチック、およびさまざまな消費者製品に使用されています。 フタル酸エステルは化学的にプラスチックに結合していないため、これらの製品から漏れ出し、空気、粉塵、食品を通じて人間が日常的に暴露されます。 疫学研究では、フタル酸エステル類への曝露が気道疾患の悪化または発症に関連していることが示されていますが、フタル酸エステル類が私たちの気道や免疫反応に及ぼす影響はほとんど知られていません。 この研究では、特定のフタル酸エステルであるフタル酸ジブチル (DBP) が人間の呼吸器系と免疫系にどのように影響するかを調査したいと考えています。 調査員は、反応が対象者にとって目立つものになるとは期待していません。彼らは、発生する可能性のある反応は、細胞と組織を注意深く検査することによってのみ検出できると期待しています（例： 鼻洗浄液とブラシ (鼻からの液体)、気管支サンプル、血液、尿)。 鼻のサンプルは、細胞動員および炎症メディエーターのレベルに関する鼻の炎症反応の測定に使用されます。 気管支サンプルは、肺の炎症反応の精密な検査を可能にし、アレルゲン攻撃によるフタル酸誘発反応に関するより詳細な情報を提供します。 これらの微妙な変化を理解することは、将来のフタル酸エステルへの暴露に関連する健康問題を防ぐのに役立ちます.

4. 目的:

   フタル酸エステル類が上気道の細胞性免疫応答を変化させることを立証すること。

5. 研究方法：

   これは、2 つの条件 (フタル酸ジブチル、DBP、またはフィルター処理された空気、FA) 間のブラインド クロスオーバー実験であり、ランダム化され、順番に釣り合いがとられています。

   DBP または FA にさらされるたびに、吸入アレルゲン チャレンジを実施します。 各条件のデータ収集は、2 週間のウォッシュアウト期間で区切られます。

   免疫応答および肺機能に対する曝露の影響を評価するために、研究者は、曝露の日または翌日に以下を収集して実行します。

   • 各曝露の前、曝露後 3 時間および 24 時間に、尿と血液のサンプルを収集し、NAL を実行し、スパイロメトリーと FeNO によって強制呼気量 (FEV1) を測定します。
   • メタコリンチャレンジは、暴露の24時間後に実行されます。
   • 鼻ブラッシング (NAB) は、左鼻孔の 3 時間前の露出と右鼻孔の 3 時間の露出後に実行されます。
   • 登録された被験者の一部は、気管支肺胞サンプルと気管支内生検が収集される暴露後24時間に気管支鏡検査を受けます。

   文献は、分析エンドポイントのいくつかに関して、フタル酸エステル類の相反するデータを提供しています。 したがって、主要研究のエンドポイントの選択を容易にし、いくつかの研究手順を検証するために、主要研究の開始前に「方法最適化サブ研究」を実施します。 このサブスタディでは、最大 25 人の健康な被験者が募集され、被験者は限定的な参加を反映する修正された同意書に署名します。 これらの被験者は、DBP または CA にさらされることはありませんが、採血、鼻洗浄、および鼻のブラッシング、またはこれらのサンプルのサブセットのためにのみ募集されます。 彼らは、バンクーバー総合病院への1回の訪問のみに参加し、サブスタディに参加するときに1〜3時間を費やします。 さらに、主要な研究 (上記) を開始する前に、暴露のロジスティクスと主要な研究の実験手順を最適化するために、最大 4 人の健康な被験者を「パイロット研究」に募集することができます。 これらの被験者は、CA暴露のみを受け、気管支鏡検査を除いて、実際の研究について説明されているように、すべての手順とサンプルが収集されます。

   メソッド最適化サブスタディおよびパイロットスタディ中に収集されたサンプルは、細菌成分（Toll Like Receptor（TLR）アゴニスト）に対する白血球または鼻上皮細胞応答などの免疫細胞応答および食作用アッセイを測定するための分析方法を確立するために使用されます。インビトロでのフタル酸エステルへの曝露後（研究手順で説明されているとおり）。

6. 統計分析：

混合効果モデルを使用してすべての効果を推定し、適切な対比を使用して仮説を検証します。 具体的には、モデルには、露出 (CA または DBP)、順序 (DBP の前の CA または CA の前の DBP)、および遺伝子バリアントの状態 (GSTM1 存在または GSTM1 null など) が固定効果として含まれ、被験者識別番号が変量効果として含まれます。 吸入アレルゲンチャレンジは、DBP と CA の両方の曝露中に行われるため、統計分析には含まれません。

FeNO/血液/肺機能に対する 1 日目と 2 日目の尿サンプルで評価された 6 つの一般的に測定されるフタル酸エステル類の一般的なフタル酸エステル類暴露レベルの影響は、暴露 (DBP、CA)、サンプリング期間 (1 日目、 2 日目) とフタル酸レベル (1 日目、2 日目)。 一元配置 ANOVA を使用して、さまざまな時点で暴露前後の尿中 MnBP レベルを比較し、フタル酸エステルへの暴露を確認します。