エピソード片頭痛におけるアトゲパントの神経生理学的および生体分子効果 (ATOM)

背景：

片頭痛は、患者と社会の重度の負担に関連する非常に一般的な神経疾患です。 最近の進歩にもかかわらず、片頭痛攻撃をオンとオフにして攻撃の頻度を増加させる分子および生化学経路の知識は依然として限られています。 さらに、治療反応の予測因子の欠如は、ケアやパーソナライズされたアプローチへのアクセスの障壁です。 近年、いくつかの片頭痛特異的薬物が疾患の予防治療に利用できるようになりました。これは、攻撃の頻度と強度を減らすことを目的としています。 現在片頭痛治療に利用できる薬物の中には、カルシトニン遺伝子関連ペプチド（CGRP）経路を直接妨害する分子があります。 Gepants、CGRP受容体拮抗薬である経口薬物は、特定の作用メカニズムによる片頭痛の急性および予防治療のために最近利用可能な薬理学的クラスを表しています。

CGRPをブロックする薬物に由来する治療効果の根底にある潜在的なメカニズム、および片頭痛の病態生理に関連するさまざまな生化学的および機能的パラメーターへの影響は、依然として議論のトピックです。

Atomプロジェクトの目的は、GePantsの新しい薬理学的クラスに属する薬物であるAtogepant（ATO）の治療作用の根底にある神経生理学的および生体分子メカニズムを特徴付けることです。 ATOは、慢性片頭痛と一時的な片頭痛の両方の予防治療に効果的であることが示されています。 ただし、GePantsによる予防治療は、患者の30％で依然として効果がありません（毎月の片頭痛日数を50％未満に減らす）。 この発見は、CGRPとは無関係に片頭痛の病態生理において役割を果たす可能性があることを示唆しています。 これらの中で、内因性カンナビノイドシステムは、長年にわたって重要性を高めてきました。

神経機能団の観点から、中心感作は片頭痛の病態生理の重要な側面です。 私たちのグループは、中心感作の研究において、下肢（RIII）での侵害受容性離脱反射の有用性を実証しました。 その後の研究では、3か月の治療後にエレヌマブに反応した慢性片頭痛患者の30％におけるRIII反射パラメーターの改善が示され、抗CGRP抗体治療との臨床的利益の改善との潜在的な相関関係が示唆されました。

さらに、片頭痛患者は、脳の刺激、特にそのような刺激の慣れの欠陥に続いて、反応の変化を示します。 慣習パターンは、片頭痛サイクル全体で特徴的なコースに従うことが説明されています。 慣れの赤字は、侵害受容性瞬間反射（NBR）や視覚誘発電位（VEP）などのさまざまな神経生理学的方法を通じて実証されています。 これらの評価は、トリゲミーノ血管系、特にトリゲミノ頸部複合体と後頭皮質における関連するステーションの変調に関する情報を提供します。

私たちの研究には、高密度の脳波（HD-EEG）を使用した脳機能的接続性の評価が含まれています。 最近、連続HD-EEG評価（未発表データ）を通じてCGRP経路を標的とするモノクローナル抗体で6か月の治療を受けた片頭痛患者の静止状態ネットワーク（RSN）内の機能的接続性の潜在的な変動を分析しました。 我々の発見は、片頭痛患者が健康なコントロールと比較した場合、これらの周波数帯の発電機の機能不全に起因する可能性があるシータおよびデルタ周波数帯域で広範囲にわたる膨大な接続性を示すことを示しています。 逆に、縦方向の比較により、抗CGRPモノクローナル抗体に対する良好な臨床反応がある患者の接続性の正常化への傾向が明らかになりました。

生化学的観点から、我々のグループは、エンドカンナビノイド異化酵素 - 脂肪酸アミドヒドロラーゼ（FAAH）およびモノアシルグリセロールリパーゼ（MAGL）の遺伝子発現が、エピソードおよび慢性移住の患者の末梢細胞で変化し、脂肪の顕著性と相関することを実証しました。 同様に、さまざまな文献の証拠は、片頭痛の根底にあるメカニズムにおけるマイクロRNAの役割を支持しています。 miR-382-5pおよびmiR-34a-5pの発現レベルの上昇は、miR-30a-5p発現の低レベルと組み合わせて、健康なコントロールと比較して片頭痛患者で発見されており、エピジェネティックな変化を確認しています。 以前の研究では、片頭痛患者のmiR-382-5pおよびmiR-34a-5pの末梢レベルが疾患の重症度と相関していることを報告しました。 炎症を調節することが知られているMIR-155のレベルの上昇は、慢性患者のレベルが高い健康なコントロールと比較して、EMとCM-MOH患者の両方の末梢細胞で発見されています。

このプロジェクトの包括的な目的は、アトゲピント治療の利益または恩恵を受けていない片頭痛と被験者を区別する特定の神経生理学的および生体分子署名の特定です。 この目的は、3か月間、60 mgを60 mgで処理した高頻度の片頭痛を患っている被験者の徹底的な神経生理学的および生化学的プロファイリングによって達成されます。

学習デザイン：

患者は、IRCCS Mondino Institute（Pavia）の外来クリニックに参加している患者から登録されます。 調査官は、イタリアの規制に従ってアトゲパント（毎日ATO-60 mg）を開始するために、臨床的適応を伴う高周波エピソード片頭痛（毎月8〜14件の片頭痛日）を持つ30人の患者を登録します。

研究者は、臨床データを収集し、ベースライン（T0）および3か月間のアトゲパント治療（T1）で片頭痛患者の生化学的および神経機能プロファイリングを実施します。

方法：すべての患者はT0およびT1で受ける：

1. 以下の分析を含む生化学プロファイリング

   • Ecbomeシステム：PBMCSのFAAH、MAGL mRNA;
   • CGRP、PACAP、およびVIPの血漿レベル。
   • PBMCSのmiR-382-5p、miR-34aおよびmiR-155。 調査員は、概日リズムの影響を避けるために、午前9時から11時の間に生化学的サンプリングを収集します。 すべての評価は、中間段階で実行されます。

   次の収集方法が採用されます。•PBMCのmRNAおよびmicroRNA分析。 血液サンプルは、エチレンジアミンテトラ酢酸チューブ内で収集され、研究者は最初にPBMCと総RNAを分離します。 ユビキチンCおよびU6は、生態酵素とmiRNAをコードする遺伝子のハウスキーピング遺伝子として作用します。 •CGRPアルファ、PACAP-38、およびVIPレベルは、市販の酵素リンクされた免疫吸着アッセイを使用して測定されます。

2. 以下を含む神経機能プロファイリング

   • 侵害受容性離脱反射の記録（RIII）;
   • 侵害受容性瞬間反射（NBR）の記録;
   • 高密度EEG（HD-EEG）の記録;
   • 視覚誘発電位の記録（VEP）。 次の方法が採用されます。-侵害受容性離脱反射（RIII反射）：右側の側方性マルレオラスの後ろの表面電極を介して、sural神経は刺激されます。 反射しきい値（≥20μV、> 10ミリ秒）は、はしご法を使用して決定されます。 一時的な合計しきい値（TST）は、反射応答の促進が現れるまで刺激強度（2 Hzで5刺激）を増加させることにより評価されます。 （de Icco et al。、2020）。 侵害受容性瞬間反射（NBR）：NBR R2応答は、眼窩上神経と表面電極の上の同心電極を使用して記録されます。 慣れは、さまざまな周波数で25の刺激で評価され、5つの平均ブロックについて計算された曲線下面積（AUC）が評価されます。 慣習指数（HI）は、最後のブロックから最初のブロックへのAUCの変化率を反映します。 （Perrotta et al。、2017）。 - 視覚誘発電位（VEP）記録：黒と白のチェッカーパターンを使用した単眼刺激中にVEPは記録されます。 コンポーネント（N70、P100、N145）が分析され、慣れは、最後のブロックと最初のブロックの間のP100振幅の変化率として定義されます。 （Ambrosini et al。、2017）。 高密度脳波脳波記録（HD-EEG）：記録（128チャネル、ハイパス：0.5 Hz、ローパス：100 Hz）には、4つの6分間の休憩状態セッション（目が開いている2つ、目が閉じて2つ）が含まれます。 周波数帯域（デルタからガンマ）は、検証済みのカスタムパイプラインを使用して分析され、皮質/皮質下の神経源を再構築します。

統計分析：原子プロジェクトの主要な結果に対してサンプルサイズの計算が実行されました（つまり、T0とT1の間のRIII反射のTSTしきい値を比較します。 以前の論文、私たちの研究グループの予備データ、および経験から、2 MaのT0とT1での平均の予想される違いが推測され、両方の測定で標準偏差は4 Maです。 この比較は、データの正常性（Shapiroテスト）に関する予備テストを実行した後、ペアのデータまたは対応するノンパラメトリックテスト（Wilcoxon署名ランクテスト）のTテストによって行われます。 調査官は、β= 0.8のテスト能力と95％の信頼性を考慮します。 推奨されるサンプルサイズはn = 30です。 5 RQのT0とT1の間に有意差（それぞれ標準偏差4と10）の有意差を考慮して、共同プライマリーの結果（AIM 2- MAGLSのMAGLSの遺伝子発現）が実行されました。 サンプルサイズが30であると仮定すると、予想される電力は80％以上です。