Atogepantin neurofysiologiset ja biomolekyyliset vaikutukset episodisessa migreenissä (ATOM)

TAUSTA:

Migreeni on erittäin yleinen neurologinen sairaus, joka liittyy potilaille ja yhteiskunnalle vakavaan taakkaan. Viimeaikaisista edistyksistä huolimatta molekyyli- ja biokemiallisten reittien tuntemus, jotka kytkevät ja poison migreenihyökkäyksen ja johtavat lisääntyneeseen hyökkäystiheyteen, on edelleen rajallinen. Lisäksi terapeuttisen vastauksen ennustajien puute on este hoidon saatavuudelle ja henkilökohtaiselle lähestymistavalle. Viime vuosina on tullut useita migreenispesifisiä lääkkeitä taudin ennaltaehkäisevään hoitoon, jonka tarkoituksena on vähentää hyökkäysten taajuutta ja voimakkuutta. Migreenihoitoon käytettävissä olevista lääkkeistä on molekyylejä, jotka häiritsevät suoraan kalsitoniinigeeniin liittyvää peptidireitiä (CGRP). CGRP -reseptoriantagonisteja, jotka ovat CGRP -reseptoriantagisteja, edustavat äskettäin saatavilla olevaa farmakologista luokkaa migreenin akuutin ja ennaltaehkäisevän hoidon vuoksi niiden spesifisen toimintamekanismin vuoksi.

CGRP: tä estävistä lääkkeistä johdetun terapeuttisen hyödyn taustalla oleva mahdollinen mekanismi, samoin kuin niiden vaikutukset erilaisiin biokemiallisiin ja funktionaalisiin parametreihin, jotka liittyvät migreenipatofysiologiaan, on edelleen keskustelun aihe.

Atomiprojektin tavoitteena on karakterisoida AtogePantin (ATO) terapeuttisen vaikutuksen taustalla olevat neurofysiologiset ja biomolekyyliset mekanismit, lääke, joka kuuluu Gepantsin uuteen farmakologiseen luokkaan. ATO: n on osoitettu olevan tehokas sekä kroonisen että episodisen migreenin ehkäisevässä hoidossa. Ennaltaehkäisevä hoito gepantsilla on kuitenkin edelleen tehoton (vähentämällä kuukausittaisten migreenipäivien lukumäärää alle 50%) 30%: lla potilaista. Tämä havainto viittaa siihen, että muilla CGRP: stä riippumattomilla biologisilla polkuilla voi olla merkitystä migreenin patofysiologiassa. Näistä endokannabinoidijärjestelmä on saanut yhä enemmän merkitystä vuosien varrella.

Neurofunktionaalisesta näkökulmasta keskeinen herkistyminen on merkittävä näkökohta migreenin patofysiologiassa. Ryhmämme on osoittanut alaraajojen (RIII) nosiseptiivisen vieroitusrefleksin hyödyllisyyden keskusherkistymisen tutkimisessa. Myöhempi tutkimus osoitti RIII-refleksiparametrien paranemisen 30%: lla kroonisista migreenipotilaista, jotka reagoivat erenumabiin kolmen kuukauden hoidon jälkeen, mikä viittaa potentiaaliseen korrelaatioon parantuneen keskusherkistymisen ja kliinisen hyödyn välillä anti-CGRP-vasta-ainehoidosta.

Lisäksi migreenipotilailla on muuttuneet vasteet toistuvan kallon stimulaation jälkeen, erityisesti tällaisten ärsykkeiden mukautumisen alijäämä. On kuvattu, että tapaamismalli seuraa ominaiskurssia koko migreenisyklin ajan. Havaintovaje on osoitettu erilaisilla neurofysiologisilla menetelmillä, kuten nocceptive Blink -refleksi (NBR) ja visuaalisilla herätetyillä potentiaaleilla (VEPS). Nämä arviot tarjoavat tietoa asiaankuuluvien asemien moduloinnista trigemino-vaskulaarisessa järjestelmässä, erityisesti trigemino-ympäröivässä kompleksissa ja niskakyhmässä aivokuoressa.

Tutkimuksemme sisältää arvioinnin aivojen toiminnallisesta yhteydestä korkean tiheyden elektroenkefalografian (HD-EEG) avulla. Äskettäin analysoimme funktionaalisen yhteyden potentiaalisia vaihtelua lepotilaverkossa (RSN) migreenipotilailla, joille tehtiin kuusi kuukautta hoitoa monoklonaalisilla vasta-aineilla, jotka kohdistuivat CGRP-reittiä sarjan HD-EEG-arviointien kautta (julkaisematon tieto). Tuloksemme osoittavat, että migreenipotilailla verrattuna terveisiin kontrolleihin on laajalle levinnyt hyperkonnectiivisuus theta- ja delta-taajuuskaistoissa, mikä johtuu näiden taajuuskaistojen generaattoreiden toimintahäiriöistä, mikä korostaa Thalamo-kuvion dysrytmihythumiakonseptin merkitystä migreenipatofysiologiassa. Päinvastoin, pitkittäisvertailut paljastivat suuntauksen yhteyksien normalisointiin potilailla, joilla on hyvä kliininen vaste anti-CGRP-monoklonaalisiin vasta-ainiin.

Biokemiallisesta näkökulmasta ryhmämme on osoittanut, että endokannabinoidien katabolisoivien entsyymien - rasvahappoamidihydrolaasin (FAAH) ja monoasyyliglyseroli -lipaasin (MAGL) - geeniekspressio muuttuu potilaiden kanssa, joilla on episodinen ja kroninen migriini, ja korreloivat migreenin vakavuuden kanssa. Samoin erilaiset kirjallisuustodistukset tukevat mikroRNA: ien roolia migreenin taustalla olevissa mekanismeissa. MiR-382-5P: n ja miR-34A-5P: n kohonneet ekspressiotasot yhdistettynä migreenipotilailla on havaittu miR-30A-5P Aikaisemmassa tutkimuksessa ilmoitimme, että miR-382-5p: n ja miR-34A-5P: n perifeeriset tasot migreenipotilailla korreloivat sairauden vakavuuden kanssa, koska niitä lisääntyi potilailla, joilla oli krooninen migreeni- ja lääkityspäätäpäänsärky (CM-MOH) verrattuna episodisiin migreenipotilaisiin (EM), mikä viittaa siihen, että osallistuminen kroonisointiin, kun taas ei poistunut farmakologisten siirtymien hoidosta. Kohonneet miR-155-tasot, mikroRNA: ta, jonka tiedetään moduloivan tulehdusta, on havaittu sekä EM- että CM-MO-potilaiden perifeerisoluista verrattuna terveisiin kontrolleihin, joilla on korkeammat tasot kroonisilla potilailla.

Tämän hankkeen kattava tavoite on spesifisten neurofysiologisten ja biomolekyylisten allekirjoitusten tunnistaminen, jotka erottavat migreenin aiheuttamat henkilöt, jotka hyötyvät tai eivät hyöty AtogePant -hoidosta. Tämä tavoite saavutetaan perusteellisella neurofysiologisella ja biokemiallisella profiloinnilla, joilla on korkeataajuinen episodinen migreeni, jota hoidetaan 60 mg: lla 3 kuukauden ajan.

Opintojen suunnittelu:

Potilaat otetaan mukaan IRCCS Mondinon instituutin (Pavia) avohoitoklinikalle osallistuvista niistä. Tutkijat ilmoittautuvat 30 potilaalle, joilla on korkeataajuinen episodinen migreeni (8-14 kuukausittainen migreenipäivät), joilla on kliiniset indikaatiot atogepantin aloittamiseksi (ATO-60 mg päivittäin) Italian määräysten mukaan.

Tutkijat keräävät kliinistä tietoa ja suorittavat migreenipotilaiden biokemiallisen ja neurofunktionaalisen profiloinnin lähtötilanteessa (T0) ja kolmen kuukauden Atogepant -hoidon jälkeen (T1).

Menetelmät: Kaikille potilaille tehdään T0 ja T1:

1. Biokemiallinen profilointi, joka sisältää analyysin:

   • Ecbome -järjestelmä: Faah, magl mRNA PBMCS: ssä;
   • CGRP: n, PACAP: n ja VIP: n plasmatasot;
   • miR-382-5p, miR-34a ja miR-155 PBMCS: ssä. Tutkijat keräävät biokemiallista näytteenottoa klo 9–11 vuorokausipäivän rytmivaikutuksen välttämiseksi. Kaikki arviointi suoritetaan interictal -vaiheessa.

   Seuraavat keräysmenetelmät otetaan käyttöön: • mRNA- ja mikroRNA -analyysi PBMC: ssä. Verinäytteet kerätään etyleenidiamiini-tetra-etikkahappoputkissa, tutkijat eristävät ensin PBMC: t ja kokonais-RNA: n. Ubikitiini C ja U6 toimivat taloudenhoitogeeneinä geeneille, jotka koodaavat Ecbome -entsyymejä ja miRNA: ta. • CGRP-alfa-, PACAP-38- ja VIP-tasot mitataan kaupallisella entsyymi-kytkettynä immunosorbenttimäärityksellä.

2. Neurofunktionaalinen profilointi, joka sisältää:

   • Nocceptive -vetäytymisrefleksin (RIII) tallentaminen;
   • Nocceptive Blink -refleksin (NBR) tallennus;
   • tiheän EEG: n (HD-EEG) tallentaminen;
   • Visuaalisten aiheuttamien potentiaalien (VEP) tallentaminen. Seuraavat menetelmät otetaan käyttöön: - nocceptive -vieroitusrefleksi (RIII -refleksi): Sural hermo stimuloidaan oikean lateraalisen malleoluksen takana olevien pintaelektrodien kautta. Refleksikynnys (≥20 μV,> 10 ms) määritetään tikkaat -menetelmällä. Ajallinen summauskynnys (TST) arvioidaan lisäämällä ärsykkeen voimakkuutta (5 ärsykettä 2 Hz: llä), kunnes refleksivasteen helpottaminen ilmestyy. (De Icco et ai., 2020) .- Nocceptive Blink Reflex (NBR): NBR R2 -vaste tallennetaan käyttämällä samankeskistä elektrodia supraorbitaalisen hermo- ja pintaelektrodien yläpuolella Orbicularis oculi -lihasissa. Tasoutumista arvioidaan 25 ärsykkeellä vaihtelevilla taajuuksilla, käyrän alla (AUC) alapuolella laskettuna viidelle keskimääräiselle lohkolle. Toimitusindeksi (HI) heijastaa AUC: n prosentuaalista muutosta viimeisestä ensimmäiseen lohkoon. (Perrotta ym., 2017). -Visuaalinen herätetyt potentiaalit (VEP) -tallennus: VEP tallennetaan monokulaarisen stimulaation aikana käyttämällä mustavalkoisia ruudullinen kuviot. Komponentit (N70, P100, N145) analysoidaan, ja tapaaminen määritellään P100 -amplitudin prosentuaaliseksi muutokseksi viimeisen ja ensimmäisen lohkon välillä. (Ambrosini et ai., 2017). Suurten tiheyden elektroenkefalografiatallennus (HD-EEG): Tallenteet (128 kanavaa, huippuluokan: 0,5 Hz, alhainen passi: 100 Hz) sisältää neljä 6 minuutin lepotilaa (2 silmät auki, 2 silmät kiinni). Taajuuskaistat (delta gammaan) analysoidaan validoidulla mukautetulla putkilinjalla aivokuoren/subkortikaalisten hermosolujen rekonstruoimiseksi.

Tilastollinen analyysi: Näytteen koon laskenta suoritettiin ATOM -projektin ensisijaiselle tulokselle (nimittäin vertaa RIII -refleksin TST -kynnysarvoa T0: n ja T1: n välillä. Aikaisemmista artikkeleista, alustavat tiedot ja tutkimusryhmämme alustavat tiedot ja kokemukset 2 mA: n T0: n ja T1: n välisten keskiarvojen välillä on päätetty, ja 4 mA: n keskihajonta on molemmille mittauksille. Vertailu tehdään T -testillä parilliselle datalle tai vastaavalle epäparametriselle testille (Wilcoxon -allekirjoitettu sijoitustesti) suorittamisen jälkeen alustavan testin tietojen normaalisuudesta (Shapiro -testi). Tutkijat harkitsevat testitehoa β = 0,8 ja 95%: n luottamusta. Ehdotettu näytteen koko on n = 30. Yhteispintaisen lopputuloksen (AIM 2 - MAGLS: n geeniekspressio PBMCS: ssä) tehtiin tehoanalyysi, kun otetaan huomioon merkitsevä ero 5 RQ: n T0: n ja T1: n välillä (standardipoikkeama 4 ja 10). Olettaen, että näytteen koko on 30, odotettu teho on yli 80%.