에피소드 편두통에서 Atogepant의 신경 생리 학적 및 생체 분자 효과 (ATOM)

배경:

편두통은 환자와 사회의 심각한 부담과 관련된 매우 널리 퍼진 신경계 질환입니다. 최근의 발전에도 불구하고, 편두통 공격을 켜고 끄고 공격 빈도가 증가하는 분자 및 생화학 적 경로에 대한 지식은 여전히 ​​제한적이다. 또한, 치료 반응의 예측 변수의 부족은 치료 및 개인화 된 접근법에 대한 장벽이다. 최근 몇 년 동안, 몇몇 편두통-특이 적 약물은 질병의 예방 치료를 위해 이용 가능해졌으며, 이는 공격의 빈도와 강도를 감소시키는 것을 목표로한다. 편두통 치료에 현재 이용 가능한 약물 중에, 칼시토닌 유전자 관련 펩티드 (CGRP) 경로를 직접 방해하는 분자가있다. CGRP 수용체 길항제 인 GEPANTS, 경구 약물은 특정 작용 메커니즘으로 인해 편두통의 급성 및 예방 치료를위한 최근 이용 가능한 약리학 적 클래스를 나타낸다.

CGRP를 차단하는 약물로부터 유래 된 치료 적 이점과 편두통 병리 생리학과 관련된 다양한 생화학 적 및 기능적 파라미터에 미치는 영향의 기초가되는 잠재적 메커니즘은 논쟁의 주제로 남아있다.

원자 프로젝트의 목적은 새로운 약리학 적 등급의 게 팬트에 속하는 약물 인 Atogepant (ATO)의 기본 신경 생리 학적 및 생체 분자 메커니즘을 특성화하는 것입니다. ATO는 만성 편두통 및 에피소드 편두통의 예방 치료에 효과적인 것으로 나타났습니다. 그러나, Gepants 로의 예방 치료는 환자의 30%에서 여전히 비효율적입니다 (월간 편두통의 수를 50% 미만으로 줄임). 이 발견은 CGRP와 무관 한 다른 생물학적 경로가 편두통 병리 생리학에서 역할을 할 수 있음을 시사한다. 이 중에서, 엔도 카나비노이드 시스템은 수년에 걸쳐 중요성이 증가하고있다.

신경 기능적 관점에서, 중심 감작은 편두통 병리 생리학의 중요한 측면이다. 우리 그룹은 중심 감작을 연구 할 때 하부 사지 (RIII)에서 통각 수용 철회 반사의 유용성을 보여 주었다. 후속 연구는 3 개월의 치료 후 Erenumab에 반응 한 만성 편두통 환자의 30%에서 RIII 반사 파라미터의 개선이 개선 된 중앙 감작 및 항 -CGRP 항체 치료로부터의 임상 적 이점 사이의 잠재적 상관 관계를 시사한다.

또한, 편두통 환자는 반복적 인 두개골 자극, 특히 그러한 자극에 대한 습관의 결핍에 따라 변경된 반응을 나타낸다. 습관화 패턴은 편두통주기 전체에 걸쳐 특징적인 과정을 따른다 고 설명되어 있습니다. 습관화 결핍은 통각 수용성 깜박임 반사 (NBR) 및 시각적 유발 전위 (VEP)와 같은 다양한 신경 생리 학적 방법을 통해 입증되었습니다. 이 평가는 트리 데미노-혈관 시스템, 특히 트리 데미노-경찰 복합체 및 후두 피질의 관련 스테이션의 조절에 대한 정보를 제공합니다.

우리의 연구는 고밀도 전기 폴라 그래프 (HD-EEG)를 사용한 뇌 기능적 연결성의 평가를 포함합니다. 최근에, 본 발명자들은 연속 HD-EEG 평가 (미공개 데이터)를 통해 CGRP 경로를 표적으로하는 단일 클론 항체로 6 ​​개월 동안 치료를받는 편두통 환자에서 휴식 상태 네트워크 (RSN) 내에서 기능적 연결의 잠재적 변화를 분석했습니다. 우리의 연구 결과 편두통 환자는 건강한 대조군과 비교할 때 THETA 및 DELTA 주파수 대역에서 광범위한 과잉 연결성을 나타내며,이 주파수 대역의 생성기의 기능 장애에 기인하며, 이는 시상 병리 성과학에서 시체-피질성 기능 장애가 개념의 중요성을 강조한다는 것을 보여줍니다. 반대로, 종 방향 비교는 항 -CGRP 단일 클론 항체에 대한 우수한 임상 반응을 가진 환자의 연결 정상화 경향을 나타냈다.

생화학 적 관점에서, 우리 그룹은 엔도 카나비노이드 이화 작용 효소 - 지방산 아미드 가수 분해 효소 (FAAH) 및 모노 실 글리세롤 리파제 (MAGL)의 유전자 발현이 에피소드 및 만성 운동을 가진 환자의 말초 세포에서 변경되며 편두통과 상관 관계가 있음을 보여 주었다. 마찬가지로, 다양한 문헌 증거는 편두통의 기본 메커니즘에서 마이크로 RNA의 역할을지지한다. 더 낮은 수준의 miR-30A-5P 발현과 결합 된 miR-382-5p 및 miR-34A-5P의 상승 된 발현 수준은 건강한 대조군과 비교하여 편두통 환자에서, 후성 유전 학적 변경을 확인 하였다. 이전의 연구에서, 우리는 편두통 환자에서 miR-382-5P 및 miR-34A-5P의 말초 수준이 만성 편두통 및 약물 상호 두통 (CM-MOH)이있는 환자에서 증가했기 때문에 질병 중증도와 상관 관계가 있다고보고했다. 염증을 조절하는 것으로 알려진 마이크로 RNA 인 MIR-155의 높은 수준은 만성 환자에서 더 높은 수준의 건강한 대조군과 비교하여 EM 및 CM-MOH 환자의 말초 세포에서 발견되었다.

이 프로젝트의 가장 중요한 목표는 대상을 Atogepant 치료의 혜택을 받거나 혜택을받지 않는 편두통과 대상을 구별하는 특정 신경 생리 학적 및 생체 분자 시그니처의 식별입니다. 이 목표는 3 개월 동안 Atogepant 60 mg으로 처리 된 고주파수의 편두통이있는 대상체의 철저한 신경 생리 학적 및 생화학 적 프로파일을 통해 달성 될 것이다.

학습 설계 :

환자는 IRCCS Mondino Institute (Pavia)의 외래 환자 클리닉에 참석 한 환자로부터 등록됩니다. 연구자들은 이탈리아 규정에 따라 AtogePant (ATO-60 mg)를 시작하기위한 임상 적응증과 함께 고주파 에피소드 편두통 (8-14 개월 편두통 일)을 가진 30 명의 환자를 등록 할 것입니다.

연구자들은 임상 데이터를 수집하고 기준선 (T0) 및 3 개월의 Atogepant 치료 (T1)에서 편두통 환자의 생화학 적 및 신경 기능 프로파일 링을 수행합니다.

방법 : 모든 환자는 T0 및 T1에서 겪게됩니다.

1. 분석을 포함 할 생화학 적 프로파일 링

   • Ecbome 시스템 : PBMC의 FAAH, MAGL mRNA;
   • CGRP, PACAP 및 VIP의 혈장 수준;
   • PBMC에서 miR-382-5p, miR-34a 및 miR-155. 연구자들은 일주기 리듬 영향을 피하기 위해 오전 9시에서 11시 사이에 생화학 적 샘플링을 수집합니다. 모든 평가는 중간 단계에서 수행됩니다.

   다음 수집 방법이 채택 될 것입니다. • PBMC의 mRNA 및 microRNA 분석. 혈액 샘플은 에틸렌 디아민 테트라-아세트산 튜브 내에서 수집 될 것이며, 연구자들은 먼저 PBMC 및 총 RNA를 분리 할 것이다. 유비퀴틴 C 및 U6는 Ecbome 효소 및 miRNA를 코딩하는 유전자에 대한 하우스 키핑 유전자로서 작용할 것이다. • CGRP 알파, PACAP-38 및 VIP 수준은 상업용 효소 연결 면역 흡착 분석을 사용하여 측정됩니다.

2. 다음을 포함 할 신경 기능 프로파일 링

   • 통각 수용성 철수 반사 (RIII)의 기록;
   • 통각 수용성 깜박임 반사 (NBR)의 기록;
   • 고밀도 EEG의 기록 (HD-EEG);
   • VEP (Visual Evoked Potentials)의 기록 (VEP). 다음 방법이 채택 될 것이다 : - 통각 수용성 철수 반사 (RIII 반사) : 서울 신경은 오른쪽 측면 말레 올 루스 뒤의 표면 전극을 통해 자극 될 것이다. 반사 임계 값 (≥20 μV,> 10 msec)은 사다리 방법을 사용하여 결정됩니다. 시간적 합산 임계 값 (TST)은 반사 반응의 촉진이 나타날 때까지 자극 강도 (2Hz에서 5 자극)를 증가시킴으로써 평가 될 것이다. (De Icco et al., 2020) .- 통각 수용성 깜박임 반사 (NBR) : NBR R2 반응은 orbicularis oculi 근육에서 상쇄 신경 및 표면 전극 위의 동심 전극을 사용하여 기록 될 것이다. 습관화는 다양한 주파수에서 25 자극으로 평가 될 것이며, 5 개의 평균 블록에 대해 곡선 (AUC)의 영역이 계산됩니다. 습관화 지수 (HI)는 AUC의 마지막 블록으로의 백분율 변화를 반영합니다. (Perrotta et al., 2017). -VEP (Visual Evoked Potentials) 기록 : VEP는 흑백 체커 패턴을 사용하여 단안 자극 중에 기록됩니다. 성분 (N70, P100, N145)이 분석되고 습관화는 마지막 및 첫 번째 블록 사이의 P100 진폭의 백분율 변화로 정의됩니다. (Ambrosini et al., 2017). 고밀도 전기 뇌하석 기록 (HD-EEG) : 기록 (128 채널, 고역 통과 : 0.5Hz, 저역 통과 : 100Hz)에는 4 분의 6 분 휴식 상태 세션 (2 개는 개방 된 2 개, 눈이 닫히는 2 개)이 포함됩니다. 주파수 대역 (델타에서 감마)은 검증 된 커스텀 파이프 라인을 사용하여 피질/피질 신경 신경 공급원을 재구성합니다.

통계 분석 : Atom Project의 주요 결과에 대해 샘플 크기 계산이 수행되었습니다 (즉, T0과 T1 사이의 RIII 반사의 TST 임계 값을 비교했습니다. 이전 논문, 예비 데이터 및 우리의 연구 그룹의 경험에서, T0의 평균과 2 MA의 평균 사이의 예상 차이는 추론되며, 두 측정에 대한 표준 편차는 4 mA입니다. 비교는 데이터의 정상성 (Shapiro 테스트)에 대한 예비 테스트를 수행 한 후 쌍을 이루는 데이터 또는 해당 비모수 적 테스트 (Wilcoxon Signed Rank Test)에 대한 t 테스트에 의해 이루어질 것입니다. 연구자들은 β = 0.8의 시험 전력과 95% 신뢰도를 고려할 것입니다. 제안 된 샘플 크기는 n = 30입니다. 공동 - 프라이밍 결과 (PBMC에서 MAGL의 AIM 2- 유전자 발현)와 관련하여 5 RQ의 T0과 T1 사이의 유의 한 차이를 고려하여 전력 분석이 수행되었다 (각각 표준 편차 4 및 10). 샘플 크기가 30이라고 가정하면 예상 전력은 80%이상입니다.