Neurophysiologische und biomolekulare Wirkungen von Atogepant in episodischer Migräne (ATOM)

HINTERGRUND:

Migräne ist eine weit verbreitete neurologische Erkrankung, die mit einer schweren Belastung für Patienten und Gesellschaft verbunden ist. Trotz der jüngsten Fortschritte ist das Wissen über die molekularen und biochemischen Wege, die einen Migräneangriff ein- und ausschalten und zu einer erhöhten Häufigkeit von Angriffen führen, immer noch begrenzt. Darüber hinaus ist das Fehlen von Prädiktoren für die therapeutische Reaktion ein Hindernis für den Zugang zur Pflege und für einen personalisierten Ansatz. In den letzten Jahren sind mehrere migränespezifische Medikamente für die vorbeugende Behandlung der Krankheit verfügbar geworden, die darauf abzielt, die Häufigkeit und die Intensität der Angriffe zu verringern. Unter den derzeit für die Migräne behandelten Medikamenten gibt es Moleküle, die den Calcitonin-Gen-Peptid (CGRP) -Pweg (CCGRP) direkt stören. GEPANTS, orale Medikamente, die CGRP -Rezeptorantagonisten sind, stellen aufgrund ihres spezifischen Wirkungsmechanismus eine kürzlich verfügbare pharmakologische Klasse für die akute und vorbeugende Behandlung von Migräne dar.

Der potenzielle Mechanismus, der dem therapeutischen Nutzen aus Arzneimitteln zugrunde liegt, die CGRP blockieren, sowie deren Auswirkungen auf verschiedene biochemische und funktionelle Parameter, die mit der Migräne -Pathophysiologie verbunden sind, bleibt ein Thema der Debatte.

Das Ziel des Atomprojekts ist es, die neurophysiologischen und biomolekularen Mechanismen zu charakterisieren, die der therapeutischen Wirkung von Atogepant (ATO) zugrunde liegen, einem Medikament, das der neuen pharmakologischen Klasse von Gpanten gehört. Es wurde gezeigt, dass ATO bei der vorbeugenden Behandlung von chronischer und episodischer Migräne wirksam ist. Die vorbeugende Behandlung mit Gepants ist jedoch bei 30% der Patienten immer noch ineffektiv (die Anzahl der monatlichen Migräne Tage um weniger als 50%). Dieser Befund legt nahe, dass andere von CGRP unabhängige biologische Wege eine Rolle in der Migräne -Pathophysiologie spielen können. Unter diesen hat das Endocannabinoidsystem im Laufe der Jahre zunehmend an Bedeutung gewonnen.

Aus neurofunktioneller Perspektive ist die zentrale Sensibilisierung ein signifikanter Aspekt der Migräne -Pathophysiologie. Unsere Gruppe hat den Nutzen des nozizeptiven Entzugsreflexes am unteren Extremität (RIII) bei der Untersuchung der zentralen Sensibilisierung demonstriert. Eine nachfolgende Studie zeigte eine Verbesserung der RIII-Reflexparameter bei 30% der chronischen Migränepatienten, die nach drei Monaten Behandlung auf Erenumab reagierten, was auf eine mögliche Korrelation zwischen einer verbesserten zentralen Sensibilisierung und dem klinischen Nutzen aus der Behandlung von Anti-CGRP-Antikörpern hinweist.

Darüber hinaus weisen Migränepatienten nach wiederholten Schädelstimulation veränderte Reaktionen auf, insbesondere nach einem Defizit der Gewöhnung auf solche Stimuli. Es wurde beschrieben, dass das Gewöhnungsmuster im gesamten Migränezyklus einem charakteristischen Kurs folgt. Das Gewöhnungsdefizit wurde durch verschiedene neurophysiologische Methoden wie den nozizeptiven Blinkreflex (NBR) und visuelle evozierte Potentiale (VEP) nachgewiesen. Diese Bewertungen liefern Informationen über die Modulation relevanter Stationen im Trigemino-Vaskular-System, insbesondere im Trigemino-Evical-Komplex und im Occipitalcortex.

Unsere Studie umfasst eine Bewertung der funktionellen Konnektivität des Gehirns unter Verwendung von Elektroenzephalographie mit hoher Dichte (HD-EEG). Kürzlich haben wir potenzielle Variationen der funktionellen Konnektivität innerhalb des Ruhezustandsnetzwerks (RSN) bei Migränepatienten analysiert, die sich sechs Monaten mit monoklonalen Antikörpern unterzogen, die sich auf den CGRP-Weg durch serielle HD-EEG-Bewertungen abzielen (unveröffentlichte Daten). Unsere Ergebnisse zeigen, dass Migränepatienten im Vergleich zu gesunden Kontrollen eine weit verbreitete Hyperkonnektivität in den THETA- und Delta-Frequenzbändern aufweisen, die möglicherweise auf eine Dysfunktion der Generatoren dieser Frequenzbänder zurückzuführen sind, wodurch die Bedeutung des Thalamo-kortikalen Dysrhythmie-Konzepts bei Migrain-Pathophysiktion hervorgehoben wird. Umgekehrt zeigten Längsschnittvergleiche einen Trend zur Normalisierung der Konnektivität bei Patienten mit einer guten klinischen Reaktion auf monoklonale Anti-CGRP-Antikörper.

Aus biochemischer Sicht hat unsere Gruppe gezeigt, dass die Genexpression von Endocannabinoid -katabolisierenden Enzymen - Fettsäureamidhydrolase (FAAH) und Monoacylglycerin -Lipase (MAGL) - in peripheren Zellen von Patienten mit episodischem und chronischem Migräne verändert und mit Migräne die Strecke korreliert ist. In ähnlicher Weise stützen verschiedene Literaturnachweise die Rolle von microRNAs in den Mechanismen, die den Migräne zugrunde liegen. Bei Migränepatienten wurden im Vergleich zu gesunden Kontrollpersonen erhöhte Expressionsniveaus von miR-382-5p und miR-34A-5p in Kombination mit niedrigeren miR-30A-5p-Expression gefunden, was eine epigenetische Veränderung bestätigt. In einer früheren Studie berichteten wir, dass die peripheren Spiegel von miR-382-5p und miR-34A-5p bei Migränepatienten mit dem Schweregrad der Erkrankung korrelierten, da sie bei Patienten mit chronischer Migräne und Medikamentenkopfschmerz (CM-MOH) erhöht waren (CM-MOH) im Vergleich zu episodischer Migräne (EM), was auf migrainische Migräne hinweist, und nicht in der Pharmazine, bei der ein Engagement der Pharmazine und nicht ausgeschlossen ist. In peripheren Zellen von EM- und CM-MOH-Patienten wurden erhöhte Spiegel von miR-155, einer microRNA, von denen bekannt ist, dass sie Entzündungen moduliert, im Vergleich zu gesunden Kontrollen mit höheren Spiegeln bei chronischen Patienten.

Das übergeordnete Ziel dieses Projekts ist die Identifizierung spezifischer neurophysiologischer und biomolekularer Signaturen, die Probanden mit Migräne unterscheiden, die von AtogePant -Behandlung profitieren oder nicht profitieren. Dieses Ziel wird durch eine gründliche neurophysiologische und biochemische Profilierung von Probanden mit hoher Frequenz -episodischer Migräne erreicht, die für einen Zeitraum von 3 Monaten mit Atogepant 60 mg behandelt wurden.

Studiendesign:

Die Patienten werden von denen an der ambulanten Klinik des IRCCS Mondino Institute (Pavia) teilnehmen. Die Forscher werden 30 Patienten mit hoher Frequenz-episodischer Migräne (8-14 monatliche Migräne-Tage) mit klinischen Indikationen für die tägliche Atogepant (ATO-60 mg) gemäß den italienischen Vorschriften einschreiben.

Die Forscher sammeln klinische Daten und führen biochemische und neurofunktionelle Profile von Migränepatienten zu Studienbeginn (T0) und nach drei Monaten Atogepant -Behandlung (T1) durch.

Methoden: Alle Patienten unterziehen sich bei T0 und T1:

1. Biochemische Profilerstellung, die die Analyse von: Folgendes umfasst:

   • ECBOME -System: FAAH, MAGL -mRNA in PBMCs;
   • Plasmaspiegel von CGRP, PACAP und VIP;
   • miR-382-5p, miR-34a und miR-155 in PBMCs. Die Ermittler sammeln zwischen 9 und 11 Uhr eine biochemische Probenahme, um den Einfluss des zirkadianen Rhythmus zu vermeiden. Alle Bewertungen werden in der interiktalen Phase durchgeführt.

   Die folgenden Sammelmethoden werden angewendet: • mRNA- und microRNA -Analyse in PBMCs. Blutproben werden in Ethylendiamin-Tetra-Essigsäure-Röhrchen gesammelt, die Forscher isolieren zunächst PBMCs und Gesamt-RNA. Ubiquitin C und U6 werden als Haushaltsgene für Gene fungieren, die für die Ecbome -Enzyme und miRNAs kodieren. • Die CGRP-Alpha-, PACAP-38- und VIP-Werte werden mit einem kommerziellen Enzym gemessen, der den immunosorbenten Assay verknüpft hat.

2. Neurofunktionelle Profilerstellung, die Folgendes umfasst:

   • Aufzeichnung des nozizeptiven Entzugsreflexes (RIII);
   • Aufzeichnung des nozizeptiven Blinkreflexes (NBR);
   • Aufzeichnung von EEG mit hoher Dichte (HD-EEG);
   • Aufzeichnung von visuellen evozierten Potentialen (VEP). Die folgenden Methoden werden angewendet: - Nociceptive Entzugsreflex (RIII -Reflex): Der Sural -Nerv wird über Oberflächenelektroden hinter dem rechten lateralen Malleolus stimuliert. Reflexschwelle (≥ 20 μV,> 10 ms) wird unter Verwendung der Leitermethode bestimmt. Die zeitliche Summierungsschwelle (TST) wird durch Erhöhung der Stimulusintensität (5 Stimuli bei 2 Hz) bewertet, bis die Reflexreaktion erleichtert wird. (De Icco et al., 2020) .- Nociceptive Blink Reflex (NBR): Die NBR R2 -Reaktion wird unter Verwendung einer konzentrischen Elektrode über dem supraorbitalen Nerv- und Oberflächenelektroden am orbicularis oculi -Muskel aufgezeichnet. Die Gewöhnung wird mit 25 Stimuli bei unterschiedlichen Frequenzen bewertet, wobei der Bereich unter der Kurve (AUC) für 5 gemittelte Blöcke berechnet wird. Der Gewöhnungsindex (HI) spiegelt die prozentuale Veränderung der AUC vom letzten zum ersten Block wider. (Perrotta et al., 2017). -VEP-Aufzeichnung (Visual Evozed Potentials (VEP): VEP wird während der monokularen Stimulation unter Verwendung von schwarz-weißen karierten Mustern aufgezeichnet. Komponenten (N70, P100, N145) werden analysiert und die Gewöhnung als prozentuale Änderung der P100 -Amplitude zwischen dem letzten und dem ersten Block definiert. (Ambrosini et al., 2017). Elektroenzephalographie mit hoher Dichte (HD-EEG): Aufzeichnungen (128 Kanäle, Hochpass: 0,5 Hz, Tiefpass: 100 Hz) umfassen vier 6-minütige Ruhestatussitzungen (2 mit offenen Augen, 2 mit geschlossenen Augen). Frequenzbanden (Delta bis Gamma) werden mit einer validierten benutzerdefinierten Pipeline analysiert, um kortikale/subkortikale neuronale Quellen zu rekonstruieren.

Statistische Analyse: Für das primäre Ergebnis des Atomprojekts wurde die Berechnung der Stichprobengröße durchgeführt (vergleichen Sie die TST -Schwelle des RIII -Reflexes zwischen T0 und T1. Aus früheren Arbeiten wird vorläufige Daten und Erfahrungen unserer Forschungsgruppe ein erwarteter Unterschied zwischen den Mitteln bei T0 und T1 von 2 Ma mit einer Standardabweichung von 4 mA für beide Messungen abgeleitet. Der Vergleich erfolgt durch T -Test für gepaarte Daten oder entsprechende nichtparametrische Test (Wilcoxon Signed Rang Test) nach Durchführung eines vorläufigen Tests zur Normalität der Daten (Shapiro -Test). Die Ermittler berücksichtigen eine Testleistung von β = 0,8 und 95% Vertrauen. Die vorgeschlagene Stichprobengröße beträgt n = 30. In Bezug auf das ko -primäre Ergebnis (AIM 2 - Genexpression von MAGLs in PBMCs) wurde eine Leistungsanalyse durchgeführt, unter Berücksichtigung eines signifikanten Unterschieds zwischen T0 und T1 von 5 RQ (Standardabweichung 4 bzw. 10). Unter der Annahme einer Stichprobengröße von 30 beträgt die erwartete Leistung mehr als 80%.