Нейрофизиологические и биомолекулярные эффекты атогепанта в эпизодической мигрени (ATOM)

ФОН:

Мигрень является очень распространенным неврологическим заболеванием, связанным с тяжелым бременем для пациентов и общества. Несмотря на недавние достижения, знание молекулярных и биохимических путей, которые включают и выключают атаку мигрени и приводят к увеличению частоты атак, все еще ограничено. Кроме того, отсутствие предикторов терапевтического ответа является барьером для доступа к медицинской помощи и персонализированному подходу. В последние годы несколько лекарств, специфичных для мигрени, стали доступны для профилактического лечения заболевания, которое направлено на снижение частоты и интенсивности атак. Среди препаратов, в настоящее время доступных для лечения мигрени, существуют молекулы, которые непосредственно мешают пути пептида (CGRP), связанного с геном кальцитонина. Gepants, пероральные препараты, которые являются антагонистами рецепторов CGRP, представляют собой недавно доступный фармакологический класс для острого и профилактического лечения мигрени из -за их специфического механизма действия.

Потенциальный механизм, лежащий в основе терапевтической выгоды, полученной из лекарств, которые блокируют CGRP, а также их влияние на различные биохимические и функциональные параметры, связанные с патофизиологией мигрени, остается темой дебатов.

Целью проекта атома является характеристика нейрофизиологических и биомолекулярных механизмов, лежащих в основе терапевтического действия Atogepant (ATO), препарата, принадлежащего к новому фармакологическому классу Gepants. Было показано, что ATO является эффективным в профилактическом лечении как хронической, так и эпизодической мигрени. Тем не менее, профилактическое лечение Gepants по -прежнему неэффективно (сокращение количества ежемесячных дней мигрени менее чем на 50%) у 30% пациентов. Этот вывод предполагает, что другие биологические пути, независимые от CGRP, могут играть роль в патофизиологии мигрени. Среди них эндоканнабиноидная система приобрела все большее значение за эти годы.

С нейрофункциональной точки зрения центральная сенсибилизация является важным аспектом патофизиологии мигрени. Наша группа продемонстрировала полезность ноцицептивного рефлекса отмены в нижней конечности (RIII) в изучении центральной сенсибилизации. Последующее исследование показало улучшение параметров рефлекса RIII у 30% пациентов с хронической мигрени, которые реагировали на эренумаб после трех месяцев лечения, что предполагает потенциальную корреляцию между улучшением центральной сенсибилизации и клинической пользой от лечения антителами против CGRP.

Кроме того, у пациентов с мигренью проявляются измененные ответы после повторной черепной стимуляции, в частности, дефицит привыкания к таким стимулам. Было описано, что модель привыкания следует характерному курсу на протяжении всего цикла мигрени. Дефицит привыкания был продемонстрирован различными нейрофизиологическими методами, такими как ноцицептивный рефлекс Blink (NBR) и визуальные потенциалы (VEP). Эти оценки предоставляют информацию о модуляции соответствующих станций в тригемино-сосудистой системе, в частности, тригемино-клевеного комплекса и затылочной коры.

Наше исследование включает в себя оценку функциональной связности мозга с использованием электроэнцефалографии высокой плотности (HD-EEG). Недавно мы проанализировали потенциальные различия в функциональной связности в сети состояния покоя (RSN) у пациентов с мигрени, проходящих шесть месяцев лечения моноклональными антителами, нацеленными на путь CGRP через последовательные оценки HD-EEG (неопубликованные данные). Наши результаты демонстрируют, что пациенты с мигренью по сравнению со здоровыми контролями демонстрируют широко распространенную гиперконнективность в диапазонах тета и дельта-частот, что потенциально связана с дисфункцией генераторов этих частотных полос, подчеркивая важность концепции дисритмии таламо-кортикальной дисритмии в патофизиологии мигрени. И наоборот, продольные сравнения выявили тенденцию к нормализации связности у пациентов с хорошим клиническим ответом на моноклональные антитела против CGRP.

С биохимической точки зрения наша группа продемонстрировала, что экспрессия генов эндоканнабиноидных катаболизирующих ферментов - амид -гидролазы жирной кислоты (FAAH) и моноацилглицерол липазы (MAGL) - изменяется в периферических клетках пациентов с эпизодической и хронической мигрной и коррелируется с границией мигрины. Точно так же различные литературные данные подтверждают роль микроРНК в механизмах, лежащих в основе мигрени. Повышенные уровни экспрессии miR-382-5p и miR-34a-5p, в сочетании с более низкими уровнями экспрессии miR-30A-5p, были обнаружены у пациентов с мигренью по сравнению со здоровыми контролями, что подтверждает эпигенетическое изменение. В предыдущем исследовании мы сообщили, что периферические уровни miR-382-5p и miR-34a-5p у пациентов с мигренью коррелировали с тяжестью заболевания, поскольку они были увеличены у пациентов с хронической мигрени и головной болью лекарств (CM-MOH) по сравнению с эпизодическим мигр (EM), предполагая, что не использует более индивидуальность, в то время как не используется внятие на фармиологическое обучение. Повышенные уровни miR-155, микроРНК, известной для модуляции воспаления, были обнаружены в периферических клетках пациентов с EM и CMOH по сравнению со здоровыми контролями, с более высокими уровнями у хронических пациентов.

Главной целью этого проекта является идентификация специфических нейрофизиологических и биомолекулярных сигнатур, которые дифференцируют субъектов с мигренью, которые получают пользу или не получают пользу от лечения атогетических точек. Эта цель будет достигнута с помощью тщательного нейрофизиологического и биохимического профилирования субъектов с высокочастотным эпизодическим мигренью, получавшей атогепант 60 мг в течение 3 месяцев.

Учебный дизайн:

Пациенты будут зачислены из тех, кто посещает амбулаторную клинику IRCCS Mondino Institute (Pavia). Исследователи будут зачислять 30 пациентов с высокочастотной эпизодической мигренью (8-14 ежемесячных дней мигрени) с клиническими показателями, чтобы начать атогепант (ATO-60 мг в день) в соответствии с итальянскими правилами.

Исследователи будут собирать клинические данные и выполнять биохимическое и нейрофункциональное профилирование пациентов с мигренью на исходном уровне (T0) и после трех месяцев лечения атогпанта (T1).

Методы: все пациенты будут подвергаться в T0 и T1:

1. Биохимическое профилирование, которое будет включать анализ:

   • Система ECBOME: FAAH, MAGL МРНК в PBMCS;
   • уровни CGRP, PACAP и VIP в плазме;
   • miR-382-5p, miR-34a и miR-155 в PBMC. Следователи будут собирать биохимическую выборку в период с 9 до 11 часов утра, чтобы избежать влияния циркадного ритма. Вся оценка будет выполнена в межковой фазе.

   Будут приняты следующие методы сбора: • Анализ мРНК и микроРНК в PBMC. Образцы крови будут собираться в трубках этилендиамин тетра-уксусной кислоты, исследователи будут сначала изолировать PBMC и общую РНК. Убиквитин C и U6 будут действовать в качестве генов домашнего хозяйства для генов, кодирующих ферменты Ecbome и miRNAs. • Уровни CGRP Alpha, PACAP-38 и VIP будут измерены с использованием коммерческого иммуносорбентного анализа, связанного с коммерческим ферментом.

2. Нейрофункциональное профилирование, которое будет включать в себя:

   • Запись ноцицептивного рефлекса снятия (RIII);
   • Запись ноцицептивного рефлекса мигания (NBR);
   • Запись ЭЭГ высокой плотности (HD-EEG);
   • Запись визуальных вызванных потенциалов (VEP). Будут приняты следующие методы: - Ноцицептивный рефлекс снятия средств (рефлекс RIII): суральный нерв будет стимулироваться через поверхностные электроды за правым боковым Malleolus. Рефлексный порог (≥20 мкВ,> 10 мс) будет определяться с использованием метода лестницы. Порог временного суммирования (TST) будет оцениваться путем увеличения интенсивности стимулов (5 стимулов при 2 Гц) до тех пор, пока не появится облегчение рефлекторного ответа. (De Icco et al., 2020) .- Ноцицептивный рефлекс Blink (NBR): отклик NBR R2 будет записан с использованием концентрического электрода над супраорбитальным нервом и поверхностными электродами в мышце Orbicularis Oculi. Привычка будет оцениваться с помощью 25 стимулов на различных частотах, причем площадь под кривой (AUC) рассчитана для 5 усредненных блоков. Индекс привычки (HI) будет отражать процентное изменение AUC с последнего до первого блока. (Perrotta et al., 2017). -Запись визуальных потенциалов (VEP): VEP будет записан во время монокулярной стимуляции с использованием черно-белых клетчатых паттернов. Компоненты (N70, P100, N145) будут проанализированы, и привыкание будет определена как процентное изменение амплитуды P100 между последним и первым блоком. (Ambrosini et al., 2017). Электроэнцефалография высокой плотности (HD-EEG): записи (128 каналов, высокий проход: 0,5 Гц, низкий проход: 100 Гц) будут включать в себя четыре 6-минутные сеансы покоя (2 с открытыми глазами, 2 с закрытыми глазами). Полосы частот (Delta to Gamma) будут проанализированы с использованием подтвержденного пользовательского конвейера для реконструкции коры/подкорковых нейронных источников.

Статистический анализ: Расчет размера выборки был выполнен для первичного результата проекта Atom (а именно сравнение порога TST рефлекса RIII между T0 и T1. Из предыдущих работ, предварительных данных и опыта нашей исследовательской группы, выводится ожидаемая разница между средними значениями в T0 и T1 2 мА, со стандартным отклонением 4 мА для обоих измерений. Сравнение будет проведено с помощью t -теста для парных данных или соответствующего непараметрического теста (тест Wilcoxon подписал ранг), после проведения предварительного теста на нормальность данных (тест Shapiro). Исследователи рассмотрит тестовую силу β = 0,8 и достоверность 95%. Предлагаемый размер выборки n = 30. Что касается совместного исхода (AIM 2 - Экспрессия генов MAGLS в PBMC) был проведен анализ мощности, учитывая значительную разницу между T0 и T1 5 RQ (стандартное отклонение 4 и 10 соответственно). Предполагая размер выборки 30, ожидаемая мощность составляет более 80%.