Neurofyziologické a biomolekulární účinky atogepantu v epizodické migréně (ATOM)

POZADÍ:

Migréna je vysoce převládající neurologické onemocnění spojené s těžkou zátěží u pacientů a společnosti. Navzdory nedávným pokrokům je znalost molekulárních a biochemických drah, které zapínají a vypínají migrénu a vedou ke zvýšené frekvenci útoků, stále omezená. Kromě toho je nedostatek prediktorů terapeutické reakce překážkou pro přístup k péči a k ​​osobnímu přístupu. V posledních letech se pro preventivní léčbu onemocnění stalo k dispozici několik léků specifických pro migrénu, jejichž cílem je snížit frekvenci a intenzitu útoků. Mezi léky, které jsou v současné době k dispozici pro léčbu migrény, existují molekuly, které přímo interferují s cestou peptidu (CGRP) souvisejícím s genem kalcitoninu. Gepanty, orální léky, které jsou antagonisty receptoru CGRP, představují nedávno dostupnou farmakologickou třídu pro akutní a preventivní léčbu migrén v důsledku jejich specifického mechanismu účinku.

Tématem debaty zůstává potenciální mechanismus, který je základem terapeutického přínosu odvozeného z léků, které blokují CGRP, jakož i jejich dopad na různé biochemické a funkční parametry spojené s patofyziologií migrény.

Cílem projektu atomu je charakterizovat neurofyziologické a biomolekulární mechanismy, které jsou základem terapeutického působení atogepantu (ATO), léčiva patřící do nové farmakologické třídy gepantů. Ukázalo se, že ATO je účinné při preventivní léčbě chronické i epizodické migrény. Preventivní léčba gepanty je však stále neúčinná (snižuje počet měsíčních migrénových dnů o méně než 50%) u 30% pacientů. Toto zjištění naznačuje, že jiné biologické dráhy nezávislé na CGRP mohou hrát roli v patofyziologii migrény. Mezi nimi endocannabinoidní systém v průběhu let získal rostoucí význam.

Z neurofunkčního hlediska je centrální senzibilizace významným aspektem migrénové patofyziologie. Naše skupina prokázala užitečnost nociceptivního stahování reflexu na dolní končetině (RIII) při studiu centrální senzibilizace. Následující studie ukázala zlepšení parametrů RIII reflexního reflexního u 30% pacientů s chronickou migrénou, kteří reagovali na ERENUmab po třech měsících léčby, což naznačuje potenciální korelaci mezi zlepšenou centrální senzibilizací a klinickým přínosem z léčby anti-CGRP.

Kromě toho pacienti s migrénou vykazují změněné odpovědi po opakované stimulaci krania, konkrétně deficit v návyku na takové podněty. Bylo popsáno, že vzorec návyku sleduje charakteristický průběh během cyklu migrény. Deficit návyku byl prokázán různými neurofyziologickými metodami, jako je nociceptivní reflex blikání (NBR) a vizuální evokované potenciály (VEP). Tato hodnocení poskytují informace o modulaci relevantních stanic v trigemino-vaskulárním systému, konkrétně trigemino-cervikálním komplexu a týlní kůře.

Naše studie zahrnuje vyhodnocení mozkové funkční konektivity pomocí elektroencefalografie s vysokou hustotou (HD-EEG). Nedávno jsme analyzovali potenciální změny funkční konektivity v klidové stavové síti (RSN) u pacientů s migrénou podstupujících šest měsíců léčby monoklonálními protilátkami zaměřenými na cestu CGRP prostřednictvím sériových hodnocení HD-EEG (nepublikovaná data). Naše zjištění ukazují, že pacienti s migrénou ve srovnání se zdravými kontrolami vykazují rozsáhlou hyperconnektivitu ve frekvenčních pásech Theta a delta, což je potenciálně přičítáno dysfunkci generátorů těchto frekvenčních pásů, což zdůrazňuje důležitost thalamo-koortikální dysrhythmia konceptu. Naopak podélné srovnání odhalilo trend k normalizaci konektivity u pacientů s dobrou klinickou odpovědí na anti-CGRP monoklonální protilátky.

Z biochemického hlediska naše skupina prokázala, že genová exprese endokanabinoidních katabolizujících enzymů - mastné kyseliny amid hydroláza (FAAH) a monoacylglycerol lipáza (MAGL) - se mění u periferních buněk pacientů s epizodickými a chronickými migrázy a je korelována s vázaním migránů. Podobně různé důkazy literatury podporují roli mikroRNA v mechanismech, které jsou základem migrén. U pacientů s migrénou ve srovnání se zdravými kontrolami byly zjištěny zvýšené hladiny exprese miR-382-5p a miR-34A-5p, kombinované s nižšími hladinami exprese miR-30A-5p, což potvrzuje epigenetickou změnu. V předchozí studii jsme uvedli, že periferní hladiny miR-382-5p a miR-34A-5p u pacientů s migrénou byly korelovány se závažností onemocnění, protože byly zvýšeny u pacientů s chronickou migrénou a léčbou hlava a léčba (CM-MOH) ve srovnání s pacienty s epizodickou migrénou (eM) (EM), což vliv na chronizaci, přičemž vliv na chronizaci vliv na léky (CM-MOH). Zvýšené hladiny miR-155, mikroRNA, o nichž je známo, že moduluje zánět, byly nalezeny v periferních buňkách pacientů s EM i CM-MOH ve srovnání se zdravými kontrolami, s vyššími hladinami u chronických pacientů.

Cílem tohoto projektu je identifikace specifických neurofyziologických a biomolekulárních podpisů, které rozlišují subjekty s migrénou, které mají prospěch nebo nemají prospěch z léčby atogepantem. Toto cíl bude dosaženo důkladným neurofyziologickým a biochemickým profilováním subjektů s vysokofrekvenční epizodickou migrénou léčenou atogepantem 60 mg po dobu 3 měsíců.

Návrh studie:

Pacienti budou zapsáni z pacientů, kteří se účastní ambulantní kliniky IRCCS Mondino Institute (PAVIA). Vyšetřovatelé zaregistrují 30 pacientů s vysokofrekvenční epizodickou migrénou (8-14 měsíčních migrénních dnů) s klinickými indikacemi, aby zahájili atogepant (ATO-60 mg denně) podle italských předpisů.

Vyšetřovatelé budou shromažďovat klinická data a provádět biochemické a neurofunkční profilování migrénních pacientů na začátku (T0) a po třech měsících léčby atogepantem (T1).

Metody: Všichni pacienti budou podstoupit na T0 a T1:

1. Biochemické profilování, které bude zahrnovat analýzu:

   • ECBOME SYSTEM: FAAH, MAGL mRNA v PBMC;
   • Plazmatické hladiny CGRP, PACAP a VIP;
   • miR-382-5p, miR-34a a miR-155 v PBMC. Vyšetřovatelé budou shromažďovat biochemický odběr vzorků mezi 9 a 11:00, aby se zabránilo vlivu cirkadiánního rytmu. Veškeré hodnocení bude provedeno v interiktální fázi.

   Budou přijaty následující metody sběru: • Analýza mRNA a mikroRNA v PBMC. Vzorky krve se odebírají v trubicích kyseliny ethylendiamin tetra-octové, vyšetřovatelé nejprve izolují PBMC a celkovou RNA. Ubikvitin C a U6 budou působit jako geny pro hospodaření pro geny kódující ecbome enzymy a miRNA. • Hladiny CGRP Alpha, PACAP-38 a VIP budou měřeny pomocí komerčního enzymu spojeného imunosorbentového testu.

2. Neurofunkční profilování, které bude zahrnovat:

   • zaznamenávání nociceptivního odběru reflexu (RIII);
   • záznam nociceptivního reflexu Blink (NBR);
   • záznam EEG s vysokou hustotou (HD-EEG);
   • Záznam vizuálních evokovaných potenciálů (VEP). Budou přijaty následující metody: - Nociceptivní reflex (RIII Reflex): Surální nerv bude stimulován povrchovými elektrodami za pravým bočním malleolu. Reflexní prahová hodnota (≥ 20 μV,> 10 ms) bude stanovena pomocí metody žebříku. Prahová hodnota dočasného souhrnu (TST) bude hodnocena zvýšením intenzity stimulu (5 podnětů při 2 Hz), dokud se neobjeví usnadnění reflexní reakce. (De Icco et al., 2020) .- Nociceptivní reflex Blink Reflex (NBR): NBR R2 odezva bude zaznamenána pomocí soustředné elektrody nad supraorbitálním nervem a povrchovými elektrodami na svalu orbicularis oculi. Habituace bude hodnocena s 25 podněty při různých frekvencích, přičemž plocha pod křivkou (AUC) vypočítanou pro 5 průměrovaných bloků. Index zvykovacích prostředků (HI) bude odrážet procentuální změnu AUC od posledního do prvního bloku. (Perrotta et al., 2017). -Vizuální evokované záznam potenciálů (VEP): VEP bude zaznamenán během monokulární stimulace pomocí černobílých kostkovaných vzorů. Budou analyzovány složky (N70, P100, N145) a návyku bude definováno jako procentuální změna amplitudy P100 mezi posledním a prvním blokem. (Ambrosini et al., 2017). Elektroencefalografická záznam s vysokou hustotou (HD-EEG): nahrávky (128 kanálů, vysoký průchod: 0,5 Hz, nízký průchod: 100 Hz) budou zahrnovat čtyři 6minutové relace klidového stavu (2 s otevřenými očima, 2 se zavřenými očima). Frekvenční pásma (delta na gama) budou analyzovány pomocí validovaného vlastního potrubí k rekonstrukci kortikálních/subkortikálních nervových zdrojů.

Statistická analýza: Výpočet velikosti vzorku byl proveden pro primární výsledek projektu atomu (jmenovitě porovnejte prahovou hodnotu TST RIII reflexu mezi T0 a T1. Z předchozích článků, předběžných údajů a zkušeností naší výzkumné skupiny je vyvozen očekávaný rozdíl mezi průměry v T0 a T1 2 Ma, se standardní odchylkou 4 Ma pro obě měření. Porovnání bude provedeno T testem pro párová data nebo odpovídající neparametrický test (Wilcoxon podepsaný test), po provedení předběžného testu na normalitu dat (Shapiro test). Vyšetřovatelé budou zvážit testovací sílu β = 0,8 a 95% důvěry. Navrhovaná velikost vzorku je n = 30. Pokud jde o ko -primární výsledek (AIM 2 - genová exprese MAGL v PBMC), byla provedena analýza výkonu, s ohledem na významný rozdíl mezi T0 a T1 5 RQ (standardní odchylka 4 a 10). Za předpokladu, že velikost vzorku 30 je očekávaná síla více než 80%.