X-연관 중증 복합 면역결핍(XSCID)이 있는 2세 이상의 소아 치료를 위한 렌티바이러스 유전자 전달

이것은 X-연관 중증 복합 면역결핍증(XSCID, SCID-X1이라고도 함)에 대한 체외 조혈모세포(HSC) 유전자 전달 치료의 I/II상 비무작위 임상 시험입니다. 안전과 성능을 향상시키는 기능. 이 연구는 2세에서 40세 사이이고 임상적으로 상당한 면역 장애가 있는 XSCID 환자 23명을 치료할 것입니다. 환자는 1일에 3mg/kg 체중으로 전달되는 약 6mg/kg/체중(목표 부설판 곡선 아래 면적은 4500min*umol/L/일)의 총 부설판 용량을 투여받고 2일에 용량이 조정됩니다(만약 목표 용량을 달성하고 골수를 조절하기 위해 busulfan AUC 결과를 사용할 수 있으며, 자가 형질도입된 CD34+HSC를 1회 주입합니다. 그런 다음 이식에서 발생하는 유전자 수정 림프구의 생착, 확장 및 기능을 평가하기 위해 환자를 추적합니다. 면역 기능의 실험실 측정치의 개선을 평가하기 위해; 치료에서 발생하는 모든 임상적 이점을 평가하기 위해 이 치료의 안전성을 평가합니다. 이러한 결과와 관련된 연구의 1차 종점은 2년이 될 것이지만, 이러한 측정과 관련된 데이터는 연구 전반에 걸쳐 그리고 FDA 지침에서 권장하는 최소 15년의 더 긴 추적 기간 동안 간격으로 수집될 것입니다. 유전자 치료 임상 시험 - 지연된 부작용에 대한 피험자 관찰" http://www.fda.gov/downloads

• 생물학적제제혈액백신/지침준수규제정보/지침/세포 및 유전자 치료
• ucm078719.pdf 유전자 전달 임상 시험에 참여하는 환자를 대상으로 합니다.

XSCID는 인터루킨 2(IL-2), IL-4, IL-7, IL-9, IL-15 및 IL-21에 대한 수용체가 공유하는 공통 감마 사슬(yc)을 암호화하는 IL2RG 유전자의 결함으로 인해 발생합니다. 출생 시 XSCID 환자는 일반적으로 T-림프구와 NK 세포가 부족하거나 심각한 결핍이 있는 반면, B-림프구는 수는 정상이지만 기능이 심각하게 부족하여 필수 항체를 만들지 못합니다. 심각한 결핍 형태의 XSCID는 일정 수준의 면역 기능을 회복하기 위한 개입 없이 유아기에 치명적입니다. 현재 최고의 치료법은 HLA 조직 유형이 일치하는 형제로부터 T-림프구가 고갈된 골수 이식이며, 이러한 유형의 기증자와 함께 우수한 생착 및 면역 교정을 달성하기 위해 환자의 골수에 화학 요법 또는 방사선 조절을 실시할 필요가 없습니다. XSCID 환자. 그러나 XSCID 환자의 대다수는 일치하는 형제 기증자가 없으며 이러한 환자의 치료 표준은 부모로부터 T-림프구가 제거된 골수 이식을 수행하는 것입니다. 이러한 유형의 이식은 일반적으로 HLA 조직 유형에 따라 영향을 받는 아동과 부모가 절반만 일치하기 때문에 일배체 동일성 이식이라고 합니다. 컨디셔닝이 사용되는지 여부에 관계없이 XSCID에 대한 일배체 이식은 일치하는 형제 기증자 이식보다 훨씬 더 나쁜 예후를 보입니다. 일배체 이식 후, XSCID 환자는 광범위한 부분 면역 재구성을 달성하는 것으로 관찰되며 재구성은 일부 환자에서 시간이 지남에 따라 감소할 수 있습니다. 생착에 실패하거나, 적절한 면역 재구성을 달성하지 못하거나, 시간이 지남에 따라 면역 기능을 상실하는 XSCID 환자의 하위 집합은 재발성 바이러스, 세균 및 진균 감염, 동종 면역 또는 자가 면역 문제, 폐 기능 손상 및/또는 상당한 성장 장애로 고통받습니다. .

우리는 이전 일배체 조혈 줄기 세포 이식에도 불구하고 임상적으로 심각한 면역 결함이 있고 HLA 일치 형제 기증자가 없는 2세 XSCID 환자3에게 유전자 전달 치료를 제공할 것을 제안합니다. 우리의 현재 유전자 전달 치료 프로토콜은 구조/구조 프로토콜로 간주될 수 있습니다.

파리와 런던에서 XSCID가 있는 20명의 영아를 대상으로 골수 이식(BMT) 대신 최근에 성공한 레트로바이러스 유전자 전달 치료는 효능에 대한 원칙의 증거를 제공했습니다. 그러나 주요 안전 문제는 장기 반복(LTR)에 존재하는 강력한 인핸서에 의한 LMO2 및 기타 DNA 조절 유전자의 벡터 삽입 돌연변이 유발 활성화에 의해 부분적으로 유발된 치료 후 3-5년에 5건의 백혈병 사례가 발생한다는 것입니다. 몰로니 백혈병 바이러스(MLV) 기반 벡터.

또한, MLV 기반 벡터를 사용하는 나이든 XSCID 환자의 유전자 전달 치료에 대한 이전 연구는 유아에서 볼 수 있는 매우 높은 수준으로 유전자 교정 T-림프구의 적절한 확장 실패의 추가 문제를 입증했습니다. 이러한 백혈병 위험을 줄이거나 제거하고, 노령 XSCID 환자에서 이점을 얻을 수 있도록 충분히 성능을 향상시키기 위해, 우리는 향상된 안전성 및 성능 기능을 갖춘 렌티벡터를 생성했습니다. 우리는 모든 바이러스 전사 요소가 없는 자가 비활성화(SIN) 렌티바이러스 벡터를 생성했습니다. 코돈 최적화된 yc cDNA를 발현하기 위한 짧은 형태의 인간 신장 인자 1a(EF1a) 내부 프로모터를 함유하고; 닭 HS4(오메가)-글로빈 유전자좌의 400개 염기쌍 절연체 조각의 측면 복제본을 가지고 있어 측면 세포 유전자에 대한 유해한 영향으로부터 추가 보호를 제공합니다. 자체 실험실 및 다른 실험실의 전임상 데이터는 SIN 렌티바이러스 벡터가 일반적으로 세포 종양 유전자, 특히 LMO2(대부분의 유전자 전이 관련 백혈병의 원인이 되는 유전자)를 활성화하는 경향이 훨씬 적다는 가설을 뒷받침합니다. 또한, CL20-4i-EF1a-hyc-OPT로 지정된 당사의 벡터는 인간 림프구 세포주에서 yc 발현 및 신호 전달을 재구성하는 활성을 확립했으며 XSCID 마우스 및 개의 치료에서 높은 수준의 생체 내 효능을 달성했습니다. 우리는 또한 임상 렌티바이러스 벡터의 효율적이고 안전한 고역가 생산을 가능하게 하는 새로운 안정적인 생산자 세포주를 확립하여 이 임상 시험의 수행을 크게 촉진합니다.

부분적으로 일배체 기증자 이식되었거나 일배체 기증자 이식에서 여러 번의 시도에도 불구하고 이식에 실패한 XSCID를 가진 고령 환자를 치료한 우리의 이전 경험에 근거하여, 자가 유전자 수정 CD34 줄기 세포 및 관련 적절한 수의 유전자 교정 자가 림프구 생산 실패. 이 연구의 표적 환자는 기증자 림프구 또는 이전 일배체 HSC 이식의 열악한 생착 및 기능에 역할을 할 수 있는 자신의 부분적 기능 또는 자가 림프구로부터 어느 정도의 림프성 면역을 가질 수 있습니다. 또한 일부 환자는 이전 HSC 이식의 결과로 일부 이식편대숙주병을 앓을 수도 있습니다. 이러한 XSCID 환자의 생착에 대한 이러한 장벽을 해결하기 위해 적당한 용량(~6mg/kg)의 부설판으로 전처리하여 들어오는 자가 유전자 수정 HSC를 위한 골수에 공간 또는 틈새를 만들 것입니다.

우리는 최대 23명의 XSCID 환자를 치료할 계획이며 모든 환자는 동일한 컨디셔닝, 유전자 전달 치료 및 후속 평가를 받게 됩니다. 성분채집법으로 채취한 동원 말초 혈액 줄기 세포는 이 연구에서 HSC의 첫 번째 선택 공급원이 될 것이지만, 어떤 이유로든 이 방법으로 충분한 HSC를 제공할 수 없는 환자(예: 가동률 저하, HSC의 비효율적인 성분채집 분리 또는 성분채집에 필요한 부적절한 중앙 액세스)는 골수 채취로 HSC를 수집하게 됩니다. NIH에서 환자는 현재 IRB에서 승인한 별도의 줄기 세포 수집 프로토콜(NIH 프로토콜 94-I-0073; H. Malech, PI)에 따라 이전에 수집한 자가 CD34+ HSC를 사용하거나 이 프로토콜에 따라 성분채집술을 통해 수집한 자가 CD34+ HSC를 사용할 수 있습니다. . 이 프로토콜에 등록된 환자는 최소 3 x 106/kg 체중 자가 CD34+HSC(가동화된 말초 선택 방법 및/또는 골수 수확에 의한 혈액 줄기 세포 성분채집술 수집) 유전자 전달 형질도입에 이용 가능.

환자는 면역 기능의 실험실 및 임상 측정 모두에 대한 치료 전 평가를 받게 됩니다. 자가 CD34+HSC는 VSV-G 유사형 CL20-4i-EF1a-hyc-OPT 렌티벡터로 체외에서 형질도입됩니다. 모든 환자는 프로토콜 0일에 세척된 형질도입 세포를 1회 정맥내 주입합니다. -3일 및 -2일에 환자는 부술판 ~3 mg/kg 체중/일을 주입받습니다(총 투여량 ~ 6 mg/kg 체중) 유전자 교정 자가 CD34+HSC의 생착을 향상시키기 위한 컨디셔닝. - 6일, -5일, -4일 및 1일, 2일 및 3일에 환자는 케라티노사이트 성장 인자(팔리페르민)를 60mg/kg/일로 주입받습니다. 이 용량 및 일정의 팔리페르민은 부설판을 사용하는 요법을 포함하여 컨디셔닝 요법 후 점막염을 줄이거나 예방하기 위해 FDA 승인을 받았습니다. 컨디셔닝 및 유전자 전달 치료 후, 피험자는 혈구 감소증 기간 동안 지원을 받고 유전자 전달 치료의 안전성과 효능을 모니터링합니다. 효능에 대한 초기 증거는 치료 후 1년에 이들 매개변수의 중간 평가에서 기능적 yc 및 개선된 실험실 측정의 면역 기능을 갖는 자가 형질도입된 T-림프구의 순환에서의 외관 및 확장에 의해 정의될 것입니다. 치료 2년 후 효능에 대한 종점 증거에는 2년 시점에서 측정된 동일한 실험실 매개변수와 임상적 이점에 대한 증거가 포함됩니다. 안전성에 대한 증거는 벡터 표시의 다클론성 유지, 모든 조혈 계통에서 우성 유전자 표시 클론의 출현 부족, 혈액 이형성증 또는 유전자 전달로 인한 백혈병 또는 기타 암의 발생 없음에 초점을 맞출 것입니다. 유효성 및 안전성의 모든 실험실 및 임상 측정에 대한 1차 연구 종점은 유전자 전달 치료 후 2년에 발생합니다. 단, 유효성에 관한 데이터 수집은 평가변수 분석까지 2년 동안 빈번한 간격으로 이루어지며, 장기 안전성 및 유효성 평가는 유전자 전달 치료에 대한 FDA 지침에서 권장하는 장기 추적 기간 동안 간격으로 계속됩니다. 연구.