Chylomicron에 대한 SB CD의 효과

배경:

B1 선행 문헌 및 연구 크론병(CD)은 위장관의 자발적, 만성 재발 및 완화 염증을 특징으로 합니다. 이 질병의 근본적인 병인은 알려져 있지 않지만 유전적으로 소인이 있는 사람의 환경 자극에 이차적으로 발생하여 장내 미생물에 대한 면역 반응 조절 장애를 일으킬 가능성이 있습니다. 장내 마이크로바이옴의 역할, 유전적 감수성, 염증 감소를 목표로 하는 치료법을 맞춤화하기 위한 상태 이면의 면역학을 이해하기 위해 상당한 노력을 기울였습니다.

현재 의학 요법이 출현하기 전에 조직 표본을 평가하는 초기 병리학자에 의해 지적된 CD의 정의 특성은 만성 림프관염과 일치하는 림프구 혈전, 림프구 응집체 및 육아종으로 막힌 림프관이 있는 위장관 림프계의 상당한 변화였습니다(2). 또한, 초기 연구자들은 소장의 국소 림프관 부분을 막으면 CD와 유사한 분절성 장 질환이 발생한다는 것을 보여주었습니다(3). 면역조직화학적 염색은 CD 환자에서 림프관확장증, 림프구성 외림프관염, 림프구 또는 육아종 폐쇄 림프관 및 염증성 림프성 여포의 존재를 확인했습니다(4). 이러한 막힌 림프관의 상류에서 혈관은 림프구로 확장된 상태로 유지됩니다(5). 보다 최근의 연구에 따르면 CD 환자의 회장 및 결장 조직에서 림프 밀도가 상당히 증가하는 것으로 나타났습니다(6). 또한, 장 건강과 림프계 사이의 관계는 특정 유형의 박테리아와 바이러스가 장간막 림프계를 근본적으로 개조하는 결과를 가져온다는 연구에서 강조되었습니다. 결과에는 CD에서 볼 수 있는 것과 유사한 만성 림프절병증의 발달과 투과성 증가가 포함되었습니다(7). CD에서 장간막 림프계에 발생하는 두드러진 구조적 변화를 감안할 때(1), 림프 기능도 변경되는지 평가하기 위한 연구가 필요합니다.

킬로미크론은 소장에서 합성되고 림프관을 통해 운반되는 콜레스테롤 및 트리아실글리세롤이 풍부한 지단백질입니다. 따라서, 트리올레이트와 콜레스테롤의 경구 섭취는 추적자가 킬로미크론으로 혼입될 것입니다.

ELISA 및 질량 분광 분석을 사용하여 이러한 표지된 킬로미크론을 혈청에서 정량할 수 있으므로 림프관을 통한 흡수 및 이동의 마커 역할을 합니다. 건강한 피험자에 대한 연구는 이 검증된 수단을 활용하여 림프 흡수 및 수송을 평가했습니다. 섭취 후 혈청에서 13C로 표지된 킬로미크론이 나타나는 데 60분 미만의 지연이 있으며 180~240분 사이에 피크가 발생합니다. 우리의 프로토콜은 당뇨병 전증 환자의 킬로미크론 분비에 초점을 맞춘 Todd Cade 박사의 지속적인 연구를 포함하여 워싱턴 대학의 다른 구강 추적자 연구에서 이러한 연구를 최적화하는 데 배운 지식을 활용하도록 설계되었습니다. 우리의 연구는 상당한 소장 CD를 가진 환자를 평가하고 유사한 방법을 사용하여 건강한 대조군과 비교할 것입니다.

이 파일럿 연구는 CD에서 림프관의 양적 기능을 평가하는 최초의 연구가 될 것입니다. 그것은 장간막 림프관과 CD의 병인 및 치료 표적에서의 역할을 평가하는 추가 연구의 기초를 제공할 것입니다.

C 연구 목표

C1 1차 목표 소장 침범이 있는 크론병 환자의 림프관 운반 화물을 건강한 대조군과 비교하여 환자의 림프계 결함 가능성을 평가하는 방법으로 추적합니다.

C2 이차 목표 소장에 영향을 미치는 크론병으로 인한 식전 및 식후 지질 대사의 변화를 특성화합니다.

C3 3차 목표 소장에서 흡수된 킬로미크론이 건강한 대조군(예: LPS, 코멘다마이드(8))과 비교하여 뚜렷한 미생물 지질 시그니처를 가지고 있는지 확인하기 위해 지질 분석을 수행합니다.

C4 Quaternary 목표 13CO2 호흡 분석을 사용하여 장에서 지질 흡수를 측정합니다.

D 연구 설계

D1 개요 또는 설계 요약 이 연구는 40명의 참가자(CD 환자 20명 및 대조군 20명)가 하룻밤 금식 후 이 급식(경구 추적자) 및 주입 연구를 위해 한 번 방문하는 2그룹 시험 설계를 활용할 것입니다.

참가자는 워싱턴 대학교 의과대학 IBD 센터, 워싱턴 대학교 보건 자원봉사자, 지역사회 기반 연구 센터, 주변 세인트루이스 커뮤니티에 있는 워싱턴 대학교와 제휴한 IBD 클리닉에서 모집됩니다.

주 조사자, 협력 의사 및 연구 조정자는 포스터, 이메일 및 기존 참가자 데이터베이스를 사용하여 참가자를 식별할 책임이 있습니다.

E 연구 절차

E1 적격성 스크리닝 IBD 센터 직원은 환자 팔에서 적격 피험자를 식별합니다. 전화로 각 참가자는 제외 및 포함 기준에 따라 연구에서 즉각적인 퇴학을 결정하기 위해 일련의 예비 선별 질문을 받게 됩니다. 연구의 목적, 절차, 시간 약속 및 보상에 대한 간략한 개요는 개인이 참여에 동의하기 전에 전화로 논의됩니다.

E2 연구 방문

1. 오전 7:00: 피험자는 워싱턴 대학교 의과대학 임상 연구 부서에 보고함.

   1. 피험자는 아침 식사를 건너뛰고 물 외에는 입으로 아무것도 섭취하지 않고 밤새 단식(> 8시간)한 후 임상 연구 부서에 보고하도록 요청받을 것입니다. 피험자는 연구 방문을 위해 입장하기 전 최소 24시간 동안 카페인과 알코올을 피하도록 요청받을 것입니다. 연구 방문 전날 피험자는 총 2,165칼로리(총 에너지의 46%는 탄수화물, 40%는 지방, 14%는 단백질)를 포함하는 아침, 점심, 저녁 식사로 표준화된 식사에 대한 지침을 제공받습니다. . 250kcal(탄수화물 40g, 지방 6.1g, 단백질 8.8g)를 함유한 액상 포뮬러(Ensure; Ross Laboratories, Columbus, OH)는 취침 전 간식으로 간 글리코겐 저장소를 완전히 채웁니다. 이 간식은 위에 명시된 총 칼로리에 포함되어 있습니다.
   2. 참가자는 Clinical Research Unit 내에서 전자 체중계와 stadiometer를 사용하여 신장과 체중을 측정합니다. BMI는 [질량(kg)/[신장(미터)2]] 공식을 사용하여 신장과 체중으로부터 계산됩니다. 혈압을 측정하고 기록합니다.
   3. 참가자는 현재 약물 목록을 얻는 것을 포함하는 병력 설문지를 작성합니다. 설문지 작성은 기본 채혈 및 식사 관리 후에 발생할 수 있습니다.
2. 카테터는 혈액 샘플을 얻기 위해 다른 전주 정맥에 삽입됩니다.
3. 오전 8시: 신진대사 연구: 기본 기간: 동위원소의 배경 농축을 결정하기 위한 기본 혈액 및 호흡 샘플. 그런 다음 피험자는 Sol Carb 27g, Boost Plus 1032g, 카놀라유 3.2g, 레시틴 0.2g, [1,2, 3, 7, 8-13C8] 글리세릴 트리올레이트, 및 물 40g. 참가자는 일관성을 위해 20분 이내에 유동식을 섭취해야 하며, 최대한 섭취할 수 있도록 용기 측면을 긁어내야 합니다. 또한, 식사를 한 지 30분 후 VLDL 이화 작용을 추적하기 위해 (1,1,2,3,3-2H5)글리세롤의 75 micromol/kg 일시 주입이 시작됩니다. 혈액 및 호흡 샘플은 식후 0, 15, 30, 45, 60, 90, 120, 150, 180, 240, 300 및 360분에 수집됩니다. 추적자 계산 및 총 지방산 산화 측정을 위한 휴식 대사율을 결정하기 위해 각 호흡 샘플 수집 전 10분 동안 통풍 후드 기술을 사용하여 간접 열량 측정을 실시할 것입니다. 혈액 샘플은 추적자 강화 및 유리 지방산, 트리글리세리드 및 콜레스테롤의 총 농도에 대해 분석됩니다.
4. 오후 2시: 점심은 CRU 키친에서 준비한 CRU가 제공합니다. 연구 방문 종료.