Efecto de SB CD en Chylomicron

Fondo:

B1 Literatura y estudios previos La enfermedad de Crohn (EC) se caracteriza por una inflamación espontánea, crónica, recurrente y remitente del tracto gastrointestinal. Se desconoce la etiología subyacente de la enfermedad, pero es probable que se desarrolle como consecuencia de un estímulo ambiental en una persona genéticamente predispuesta que da como resultado una respuesta inmunitaria desregulada al microbioma intestinal. Se ha realizado un esfuerzo considerable para comprender el papel del microbioma intestinal, las susceptibilidades genéticas en juego y la inmunología detrás de la afección para adaptar los tratamientos destinados a reducir la inflamación.

Antes del advenimiento de las terapias médicas actuales, una característica definitoria de la EC observada por los primeros patólogos que evaluaban muestras de tejido era una alteración significativa del sistema linfático gastrointestinal con trombos linfocíticos, agregados de linfocitos y vasos linfáticos obstruidos por granulomas compatibles con linfangitis crónica (2). Además, los primeros investigadores demostraron que la obstrucción de segmentos de los vasos linfáticos regionales del intestino delgado provocaba una enfermedad intestinal segmentaria similar a la EC (3). La tinción inmunohistoquímica ha confirmado la presencia de linfangiectasias, perilinfangitis linfocítica, linfocitos o granulomas obstruidos y folículos linfoides inflamatorios en pacientes con EC (4). Aguas arriba de estos vasos linfáticos obstruidos, los vasos permanecen distendidos con linfocitos (5). Estudios más recientes han demostrado que la densidad linfática también aumenta significativamente en el tejido ileal y colónico de pacientes con EC (6). Además, la relación entre la salud intestinal y los vasos linfáticos se ha destacado en estudios que encontraron que ciertos tipos de bacterias y virus habían dado como resultado un sistema linfático mesentérico profundamente remodelado. Los hallazgos incluyeron el desarrollo de linfadenopatía crónica y aumento de la permeabilidad, similar a lo que se observa en la EC (7). Dados los cambios estructurales prominentes que ocurren en el sistema linfático mesentérico en la EC (1), se necesitan estudios para evaluar si la función linfática también se altera.

Los quilomicrones son lipoproteínas ricas en colesterol y triacilglicerol sintetizadas por el intestino delgado y transportadas a través de los vasos linfáticos. Por tanto, la absorción oral de trioleato y colesterol conducirá a la incorporación de los trazadores en los quilomicrones.

Utilizando ELISA y análisis espectrométrico de masas, estos quilomicrones marcados pueden cuantificarse en el suero, sirviendo así como marcador de absorción y tránsito a través de los vasos linfáticos. Los estudios de sujetos sanos han utilizado este medio validado para evaluar la captación y el transporte linfático. Después de la ingestión, hay un retraso de <60 minutos en la aparición de quilomicrones marcados con 13C en el suero, con un pico entre 180 y 240 minutos. Nuestro protocolo está diseñado para aprovechar el conocimiento que otros estudios de trazadores orales en la Universidad de Washington han adquirido para optimizar dichos estudios, incluidos los estudios en curso del Dr. Todd Cade que se enfoca en la secreción de quilomicrones en pacientes prediabéticos. Nuestro estudio evaluará a los pacientes con EC significativa del intestino delgado y los comparará con controles sanos usando un método similar.

Este estudio piloto sería el primero en evaluar la función cuantitativa de los linfáticos en la EC. Proporcionaría la base para futuros estudios que evalúen los linfáticos mesentéricos y su papel en la patogenia de la EC y como objetivo del tratamiento.

C Objetivos del estudio

C1 Objetivo principal Seguir la carga transportada por los vasos linfáticos en pacientes con enfermedad de Crohn con compromiso del intestino delgado como una forma de evaluar posibles defectos en el sistema linfático en pacientes en comparación con sujetos de control sanos.

C2 Objetivo secundario Caracterizar los cambios en el metabolismo lipídico preprandial y posprandial resultantes de la enfermedad de Crohn que afecta al intestino delgado.

C3 Objetivo terciario Llevar a cabo análisis lipidómicos para determinar si los quilomicrones absorbidos del intestino delgado portan firmas de lípidos microbianos distintas en comparación con sujetos de control sanos (p. ej., LPS, comendamida (8)).

C4 Cuaternario Objetivo Medir la absorción de lípidos del intestino mediante análisis de aliento con 13CO2.

D Diseño del estudio

Descripción general o resumen del diseño D1 Este estudio utilizará un diseño de ensayo de 2 grupos en el que 40 participantes (20 pacientes con EC y 20 controles) visitarán una vez para este estudio de alimentación (trazador oral) e infusión, después de una noche en ayunas.

Los participantes serán reclutados del Centro de EII de la Escuela de Medicina de la Universidad de Washington, los Voluntarios para la Salud de la Universidad de Washington, el Centro de Investigación Basada en la Comunidad y las clínicas de EII afiliadas a la Universidad de Washington en la comunidad circundante de St. Louis.

El investigador principal, los médicos colaboradores y los coordinadores del estudio serán responsables de identificar a los participantes mediante el uso de carteles, correo electrónico y bases de datos de participantes existentes.

Procedimientos de estudio E

E1 Detección de elegibilidad El personal del Centro de EII identificará a los sujetos elegibles del grupo de pacientes. Por teléfono, a cada participante se le hará una serie de preguntas preliminares de evaluación para determinar la expulsión inmediata del estudio según los criterios de exclusión e inclusión. El propósito del estudio y una breve descripción de los procedimientos, el compromiso de tiempo y la compensación se discutirán por teléfono antes de que la persona acepte participar.

Visita de estudio E2

1. 7:00 a. m.: Informes de los sujetos a la Unidad de Investigación Clínica de la Facultad de Medicina de la Universidad de Washington.

   1. Se le pedirá al sujeto que se salte el desayuno y se presente en la Unidad de Investigación Clínica después de un ayuno nocturno (> 8 horas) sin tomar nada por la boca excepto agua. Se pedirá a los sujetos que eviten la cafeína y el alcohol durante al menos 24 h antes de la admisión para la visita del estudio. El día anterior a la visita de estudio, los sujetos recibirán instrucciones para una comida estandarizada para el desayuno, el almuerzo y la cena que contenga un total de 2165 calorías (46 % de la energía total de los carbohidratos, 40 % de las grasas y 14 % de las proteínas). . Una fórmula líquida (Ensure; Ross Laboratories, Columbus, OH) que contiene 250 kcal (40 g de carbohidratos, 6,1 g de grasa y 8,8 g de proteína) para garantizar el llenado completo de las reservas de glucógeno hepático como refrigerio antes de acostarse. Este snack está incluido en el total de calorías indicado anteriormente.
   2. Al participante se le medirá la estatura y el peso utilizando la báscula electrónica y el estadiómetro dentro de la Unidad de Investigación Clínica. El IMC se calculará a partir de la altura y el peso utilizando la fórmula: [masa (kg)/[altura (metros)2]. Se medirá y registrará la presión arterial.
   3. El participante completará un cuestionario de historial médico, que incluye la obtención de una lista de los medicamentos actuales. La finalización del cuestionario puede ocurrir después de la extracción de sangre inicial y la administración de comidas.
2. Se insertará un catéter en la otra vena antecubital para obtener muestras de sangre.
3. 8 AM: Estudio de metabolismo: Período de referencia: Muestras de sangre y aliento de referencia para determinar el enriquecimiento de fondo de isótopos. Luego, el sujeto consumirá una comida de prueba líquida preparada por el personal de nutrición de CRU que consta de 27 g de Sol Carb, 1032 g de Boost Plus, 3,2 g de aceite de canola, 0,2 g de lecitina, 5 mg/kg de [1,2, 3, 7, 8-13C8] trioleato de glicerilo y 40 g de agua. Se les pedirá a los participantes que consuman la comida líquida dentro de los 20 minutos para mantener la consistencia, con los lados del recipiente raspados para asegurar la máxima ingestión. Además, 30 minutos después de consumir la comida, se iniciará una infusión en bolo de 75 micromol/kg de (1,1,2,3,3-2H5)glicerol para rastrear el catabolismo de VLDL. Se recolectarán muestras de sangre y aliento a los 0, 15, 30, 45, 60, 90, 120, 150, 180, 240, 300 y 360 minutos después de la ingestión de las comidas. También se administrará calorimetría indirecta utilizando la técnica de campana ventilada durante 10 minutos antes de cada recolección de muestras de aliento para determinar la tasa metabólica en reposo para los cálculos de trazadores y la medición de la oxidación total de ácidos grasos. Las muestras de sangre se analizarán para determinar el enriquecimiento del marcador y la concentración total de ácidos grasos libres, triglicéridos y colesterol.
4. 2 pm: El almuerzo será servido por CRU, preparado por la cocina de CRU. Visita de Fin de Estudios.