Wirkung von SB CD auf Chylomikron

Hintergrund:

B1 Frühere Literatur und Studien Morbus Crohn (CD) ist durch eine spontane, chronisch-rezidivierende und remittierende Entzündung des Magen-Darm-Trakts gekennzeichnet. Die zugrunde liegende Ätiologie der Krankheit ist unbekannt, aber sie entwickelt sich wahrscheinlich sekundär zu einem Umweltreiz bei einer genetisch prädisponierten Person, der zu einer fehlregulierten Immunantwort auf das Darmmikrobiom führt. Es wurden erhebliche Anstrengungen unternommen, um die Rolle des Darmmikrobioms, die genetischen Anfälligkeiten und die Immunologie hinter der Erkrankung zu verstehen, um maßgeschneiderte Behandlungen zur Reduzierung von Entzündungen zu entwickeln.

Vor dem Aufkommen aktueller medizinischer Therapien war ein charakteristisches Merkmal von Zöliakie, das von frühen Pathologen bei der Beurteilung von Gewebeproben festgestellt wurde, eine signifikante Veränderung des gastrointestinalen Lymphsystems mit lymphozytären Thromben, Lymphozytenaggregaten und durch Granulome verstopften Lymphgefäßen, die mit einer chronischen Lymphangitis einhergingen (2). Darüber hinaus zeigten frühe Forscher, dass die Verstopfung von Segmenten der regionalen Lymphgefäße des Dünndarms zu einer segmentalen Darmerkrankung ähnlich der Zöliakie führte (3). Immunhistochemische Färbungen haben das Vorhandensein von Lymphangiektasien, lymphozytärer Perilymphangitis, blockierten Lymphozyten oder Granulomen und entzündlichen Lymphfollikeln bei Patienten mit Zöliakie bestätigt (4). Oberhalb dieser verstopften Lymphgefäße bleiben die Gefäße mit Lymphozyten überfüllt (5). Neuere Studien haben gezeigt, dass die Lymphdichte auch im Ileum- und Dickdarmgewebe von Patienten mit Zöliakie signifikant erhöht ist (6). Darüber hinaus wurde der Zusammenhang zwischen Darmgesundheit und Lymphgefäßen in Studien hervorgehoben, in denen festgestellt wurde, dass bestimmte Arten von Bakterien und Viren zu einem tiefgreifend umgestalteten mesenterialen Lymphsystem geführt haben. Zu den Befunden gehörte die Entwicklung einer chronischen Lymphadenopathie und einer erhöhten Permeabilität, ähnlich wie bei Zöliakie (7). Angesichts der deutlichen strukturellen Veränderungen im mesenterialen Lymphsystem bei Zöliakie (1) sind Studien erforderlich, um zu beurteilen, ob auch die Lymphfunktion verändert ist.

Chylomikronen sind cholesterin- und triacylglycerinreiche Lipoproteine, die vom Dünndarm synthetisiert und durch die Lymphgefäße transportiert werden. Somit führt die orale Aufnahme von Trioleat und Cholesterin zum Einbau der Tracer in Chylomikronen.

Mittels ELISA und massenspektrometrischer Analyse können diese markierten Chylomikronen im Serum quantifiziert werden und dienen so als Marker für die Absorption und den Transport durch die Lymphgefäße. In Studien an gesunden Probanden wurde dieses validierte Mittel zur Beurteilung der Lymphaufnahme und des Lymphtransports eingesetzt. Nach der Einnahme kommt es zu einer Verzögerung von <60 Minuten beim Auftreten von 13C-markierten Chylomikronen im Serum, wobei der Höhepunkt zwischen 180 und 240 Minuten auftritt. Unser Protokoll soll das Wissen nutzen, das andere orale Tracer-Studien an der Washington University bei der Optimierung solcher Studien gewonnen haben, einschließlich laufender Studien von Dr. Todd Cade, die sich auf die Chylomikronsekretion bei Prädiabetikern konzentrieren. In unserer Studie werden Patienten mit signifikanter Dünndarm-CD untersucht und mit einer ähnlichen Methode mit gesunden Kontrollpersonen verglichen.

Diese Pilotstudie wäre die erste, die die quantitative Funktion der Lymphgefäße bei Zöliakie untersucht. Dies würde die Grundlage für weitere Studien zur Bewertung der mesenterialen Lymphgefäße und ihrer Rolle bei der Pathogenese von CD und als Behandlungsziel bilden.

C-Studienziele

C1 Hauptziel: Verfolgung der durch Lymphgefäße transportierten Fracht bei Patienten mit Morbus Crohn und Dünndarmbeteiligung, um mögliche Defekte im Lymphsystem bei Patienten im Vergleich zu gesunden Kontrollpersonen zu beurteilen.

C2 Sekundäres Ziel Charakterisierung von Veränderungen im prä- und postprandialen Lipidstoffwechsel infolge von Morbus Crohn, die den Dünndarm betreffen.

C3 Tertiäres Ziel Führen Sie Lipidomanalysen durch, um festzustellen, ob aus dem Dünndarm absorbierte Chylomikronen im Vergleich zu gesunden Kontrollpersonen (z. B. LPS, Commendamid (8)) unterschiedliche mikrobielle Lipidsignaturen aufweisen.

C4 Quartäres Ziel Messen Sie die Lipidabsorption aus dem Darm mithilfe einer 13CO2-Atemanalyse.

D Studiendesign

D1-Übersicht oder Design-Zusammenfassung In dieser Studie wird ein 2-Gruppen-Studiendesign verwendet, bei dem 40 Teilnehmer (20 CD-Patienten und 20 Kontrollpersonen) nach einem Fasten über Nacht einmal zu dieser Fütterungs- (oraler Tracer) und Infusionsstudie kommen.

Die Teilnehmer werden aus dem IBD Center der Washington University School of Medicine, den Volunteers for Health der Washington University, dem Center for Community Based Research und IBD-Kliniken der Washington University in der umliegenden Gemeinde St. Louis rekrutiert.

Der Hauptprüfer, die kooperierenden Ärzte und der/die Studienkoordinator(en) sind dafür verantwortlich, die Teilnehmer mithilfe von Postern, E-Mails und vorhandenen Teilnehmerdatenbanken zu identifizieren.

E-Studienverfahren

E1-Screening auf Eignung Das Personal des IBD-Zentrums identifiziert geeignete Probanden aus dem Patientenarm. Jedem Teilnehmer wird telefonisch eine Reihe vorläufiger Screening-Fragen gestellt, um anhand von Ausschluss- und Einschlusskriterien den sofortigen Ausschluss aus der Studie zu bestimmen. Der Zweck der Studie und ein kurzer Überblick über die Verfahren, den Zeitaufwand und die Vergütung werden telefonisch besprochen, bevor die Person einer Teilnahme zustimmt.

E2-Studienbesuch

1. 7:00 Uhr: Der Proband meldet sich bei der Clinical Research Unit der Washington University School of Medicine.

   1. Der Proband wird gebeten, das Frühstück auszulassen und sich nach einer Fastennacht über Nacht (> 8 Stunden) bei der klinischen Forschungseinheit zu melden und nichts außer Wasser einzunehmen. Die Probanden werden gebeten, vor der Zulassung zum Studienbesuch mindestens 24 Stunden lang Koffein und Alkohol zu meiden. Am Tag vor dem Studienbesuch erhalten die Probanden Anweisungen für eine standardisierte Mahlzeit zum Frühstück, Mittag- und Abendessen mit insgesamt 2.165 Kalorien (46 % der Gesamtenergie aus Kohlenhydraten, 40 % aus Fett und 14 % aus Protein). . Eine flüssige Formel (Ensure; Ross Laboratories, Columbus, OH) mit 250 kcal (40 g Kohlenhydrate, 6,1 g Fett und 8,8 g Protein), um als Snack vor dem Schlafengehen eine vollständige Auffüllung der Glykogenspeicher in der Leber sicherzustellen. Dieser Snack ist in den oben angegebenen Gesamtkalorien enthalten.
   2. Die Größe und das Gewicht des Teilnehmers werden mithilfe der elektronischen Waage und des Stadiometers innerhalb der Clinical Research Unit gemessen. Der BMI wird aus Größe und Gewicht anhand der Formel berechnet: [Masse(kg)/[Größe(Meter)2]. Der Blutdruck wird gemessen und aufgezeichnet.
   3. Der Teilnehmer füllt einen Fragebogen zur Krankengeschichte aus, der auch die Einholung einer Liste aktueller Medikamente umfasst. Das Ausfüllen des Fragebogens kann nach der Grundblutentnahme und der Mahlzeitenverabreichung erfolgen
2. Zur Entnahme von Blutproben wird ein Katheter in die andere Ellenbogenvene eingeführt.
3. 8 Uhr morgens: Stoffwechselstudie: Basiszeitraum: Basisblut- und Atemproben zur Bestimmung der Hintergrundanreicherung von Isotopen. Anschließend nimmt der Proband eine flüssige Testmahlzeit zu sich, die vom CRU-Ernährungspersonal zubereitet wurde und aus 27 g Sol Carb, 1032 g Boost Plus, 3,2 g Rapsöl, 0,2 g Lecithin, 5 mg/kg [1,2, 3, 7, 8-13C8] Glyceryltrioleat und 40 g Wasser. Um die Konsistenz zu gewährleisten, werden die Teilnehmer gebeten, die flüssige Mahlzeit innerhalb von 20 Minuten zu verzehren, wobei die Seiten des Behälters abgekratzt werden, um eine maximale Aufnahme sicherzustellen. Zusätzlich wird 30 Minuten nach dem Verzehr der Mahlzeit eine Bolusinfusion von (1,1,2,3,3-2H5)Glycerin mit 75 Mikromol/kg eingeleitet, um den VLDL-Katabolismus zu verfolgen. Blut- und Atemproben werden um 0, 15, 30, 45, 60, 90, 120, 150, 180, 240, 300 und 360 Minuten nach der Mahlzeit entnommen. Vor jeder Atemprobenentnahme wird außerdem 10 Minuten lang eine indirekte Kalorimetrie unter Verwendung der belüfteten Haubentechnik durchgeführt, um die Stoffwechselrate im Ruhezustand für Tracerberechnungen und die Messung der gesamten Fettsäureoxidation zu bestimmen. Blutproben werden auf Traceranreicherung und Gesamtkonzentration an freien Fettsäuren, Triglyceriden und Cholesterin analysiert.
4. 14:00 Uhr: Das Mittagessen wird von CRU serviert und von der CRU-Küche zubereitet. Ende des Studienbesuchs.