Effect van SB CD op chylomicron

Achtergrond:

B1 Eerdere literatuur en studies De ziekte van Crohn (CD) wordt gekenmerkt door een spontane, chronische relapsing en remissie van ontsteking van het maagdarmkanaal. De onderliggende etiologie van de ziekte is onbekend, maar het ontwikkelt zich waarschijnlijk secundair aan een omgevingsstimulus bij een persoon met een genetische aanleg die resulteert in een ontregelde immuunrespons op het darmmicrobioom. Er is veel moeite gedaan om de rol van het darmmicrobioom, de genetische gevoeligheden die een rol spelen en de immunologie achter de aandoening te begrijpen om behandelingen op maat te maken die gericht zijn op het verminderen van ontstekingen.

Voorafgaand aan de komst van de huidige medische therapieën was een bepalend kenmerk van coeliakie dat werd opgemerkt door vroege pathologen die weefselmonsters evalueerden, een significante verandering van het gastro-intestinale lymfestelsel met lymfocytaire trombi, ophopingen van lymfocyten en door granuloom geblokkeerde lymfevaten, consistent met chronische lymfangitis (2). Bovendien toonden vroege onderzoekers aan dat obstructie van segmenten van de regionale lymfevaten van de dunne darm resulteerde in een segmentale darmziekte vergelijkbaar met CD (3). Immunohistochemische kleuring heeft de aanwezigheid bevestigd van lymfangiëctasie, lymfatische perilymfhangitis, door lymfocyten of granuloom geblokkeerde lymfevaten en inflammatoire lymfoïde follikels bij patiënten met CD (4). Stroomopwaarts van deze verstopte lymfevaten blijven de vaten opgezwollen met lymfocyten (5). Meer recente studies hebben aangetoond dat de lymfatische dichtheid ook significant verhoogd is in het ileum- en colonweefsel van patiënten met de ziekte van Crohn (6). Bovendien is de relatie tussen darmgezondheid en lymfevaten benadrukt in studies die vonden dat bepaalde soorten bacteriën en virussen hadden geresulteerd in een grondig hervormd mesenterisch lymfestelsel. Bevindingen omvatten de ontwikkeling van chronische lymfadenopathie en verhoogde permeabiliteit, vergelijkbaar met wat wordt gezien bij CD (7). Gezien de prominente structurele veranderingen die optreden in het mesenteriale lymfestelsel bij coeliakie (1), zijn studies nodig om te evalueren of de lymfefunctie ook veranderd is.

Chylomicronen zijn cholesterol- en triacylglycerolrijke lipoproteïnen die door de dunne darm worden gesynthetiseerd en door de lymfevaten worden getransporteerd. Aldus zal orale opname van trioleaat en cholesterol leiden tot opname van de tracers in chylomicrons.

Met behulp van ELISA en massaspectrometrische analyse kunnen deze gelabelde chylomicronen in het serum worden gekwantificeerd, waardoor ze dienen als een marker voor absorptie en doorvoer door de lymfevaten. Studies van gezonde proefpersonen hebben dit gevalideerde middel gebruikt om de opname en het transport van lymfatische organen te beoordelen. Na inname is er een vertraging van <60 minuten in het verschijnen van 13C-gelabelde chylomicronen in het serum, met een piek tussen 180 en 240 minuten. Ons protocol is ontworpen om te profiteren van de kennis die andere orale tracerstudies aan de Washington University hebben opgedaan bij het optimaliseren van dergelijke studies, waaronder lopende studies door Dr. Todd Cade die zich richten op chylomicronsecretie bij pre-diabetische patiënten. Onze studie zal patiënten met significante dunne darm CD evalueren en ze vergelijken met gezonde controles met behulp van een vergelijkbare methode.

Deze pilootstudie zou de eerste zijn om de kwantitatieve functie van lymfevaten bij coeliakie te evalueren. Het zou de basis vormen voor verdere studies ter evaluatie van de mesenteriale lymfevaten en hun rol in de pathogenese van CD en als behandeldoel.

C Studiedoelstellingen

C1 Primair doel Volg door lymfevaten vervoerde lading bij patiënten met de ziekte van Crohn met betrokkenheid van de dunne darm als een manier om mogelijke defecten in het lymfestelsel bij patiënten te beoordelen in vergelijking met gezonde controlepersonen.

C2 Secundair doel Veranderingen karakteriseren in pre- en postprandiaal lipidenmetabolisme als gevolg van de ziekte van Crohn die de dunne darm aantasten.

C3 Tertiair doel Voer lipidomische analyses uit om te bepalen of chylomicronen die uit de dunne darm worden geabsorbeerd, duidelijke microbiële lipidesignaturen dragen in vergelijking met gezonde controlepersonen (bijv. LPS, commendamide (8)).

C4 Kwartair Doel Meet de opname van lipiden uit de darm met behulp van 13CO2-ademanalyse.

D Studieontwerp

D1 Overzicht of Opzet Samenvatting Deze studie zal een proefopzet met 2 groepen gebruiken waarin 40 deelnemers (20 CD-patiënten en 20 controles) één keer zullen bezoeken voor deze voedings- (orale tracer) en infusiestudie, na een nacht vasten.

Deelnemers zullen worden gerekruteerd uit het Washington University School of Medicine IBD Center, Washington University's Volunteers for Health, het Center for Community Based Research en IBD-klinieken die zijn aangesloten bij Washington University in de omliggende gemeenschap van St. Louis.

De hoofdonderzoeker, samenwerkende artsen en studiecoördinator(en) zijn verantwoordelijk voor het identificeren van deelnemers door middel van posters, e-mail en bestaande deelnemersdatabases.

E Studieprocedures

E1 Screening op geschiktheid Medewerkers van het IBD-centrum zullen in aanmerking komende proefpersonen uit de patiëntenarm identificeren. Telefonisch wordt aan elke deelnemer een reeks voorbereidende screeningvragen gesteld om te bepalen of hij onmiddellijk uit het onderzoek wordt uitgesloten op basis van uitsluitings- en inclusiecriteria. Het doel van het onderzoek en een kort overzicht van de procedures, tijdsbesteding en vergoeding zullen telefonisch worden besproken voordat de persoon ermee instemt deel te nemen.

E2 Studiebezoek

1. 07:00 uur: Onderwerp rapporteert aan de Clinical Research Unit van de Washington University School of Medicine.

   1. De proefpersoon zal worden gevraagd het ontbijt over te slaan en zich te melden bij de Clinical Research Unit na een nacht vasten (> 8 uur) waarbij niets via de mond is ingenomen behalve water. Proefpersonen wordt gevraagd om cafeïne en alcohol gedurende ten minste 24 uur vóór toelating voor het studiebezoek te vermijden. De dag voorafgaand aan het studiebezoek krijgen proefpersonen instructies voor een gestandaardiseerde maaltijd voor ontbijt, lunch en diner met in totaal 2.165 calorieën (46% van de totale energie uit koolhydraten, 40% uit vet en 14% uit eiwitten). . Een vloeibare formule (Ensure; Ross Laboratories, Columbus, OH) met 250 kcal (40 g koolhydraten, 6,1 g vet en 8,8 g eiwit) om ervoor te zorgen dat de glycogeenvoorraden in de lever volledig gevuld zijn als tussendoortje voor het slapengaan. Deze snack is inbegrepen in de hierboven vermelde totale calorieën.
   2. De deelnemer zal zijn/haar lengte en gewicht laten meten met behulp van de elektronische weegschaal en stadiometer binnen de Clinical Research Unit. BMI wordt berekend op basis van lengte en gewicht met behulp van de formule: [massa(kg)/[lengte(meter)2]. De bloeddruk wordt gemeten en geregistreerd.
   3. De deelnemer vult een vragenlijst over de medische geschiedenis in, inclusief het verkrijgen van een lijst met huidige medicijnen. Het invullen van de vragenlijst kan plaatsvinden na de baseline bloedafname en maaltijdtoediening
2. Een katheter wordt in de andere antecubitale ader ingebracht om bloedmonsters te verkrijgen.
3. 08.00 uur: Metabolismestudie: Baseline-periode: Baseline-bloed- en ademmonsters om achtergrondverrijking van isotopen te bepalen. Vervolgens consumeert de proefpersoon een vloeibare testmaaltijd bereid door CRU-voedingspersoneel bestaande uit 27 g Sol Carb, 1032 g Boost Plus, 3,2 g koolzaadolie, 0,2 g lecithine, 5 mg/kg [1,2, 3, 7, 8-13C8] glyceryltrioleaat en 40 g water. Deelnemers wordt gevraagd om de vloeibare maaltijd binnen 20 minuten te consumeren voor consistentie, met de zijkanten van de container geschraapt om maximale inname te garanderen. Bovendien zal 30 minuten na consumptie van de maaltijd een bolusinfusie van 75 micromol/kg (1,1,2,3,3-2H5)glycerol worden geïnitieerd om VLDL-katabolisme te volgen. Bloed- en ademmonsters worden verzameld op 0, 15, 30, 45, 60, 90, 120, 150, 180, 240, 300 en 360 minuten na inname van de maaltijd. Indirecte calorimetrie zal ook worden toegediend met behulp van de geventileerde kaptechniek gedurende 10 minuten voorafgaand aan elke verzameling van ademmonsters om de ruststofwisseling te bepalen voor tracerberekeningen en meting van de totale vetzuuroxidatie. Bloedmonsters zullen worden geanalyseerd op tracerverrijking en totale concentratie van vrije vetzuren, triglyceriden en cholesterol.
4. 14.00 uur: Lunch wordt geserveerd door CRU, bereid door CRU keuken. Einde studiebezoek.