Vliv SB CD na Chylomicron

Pozadí:

B1 Předchozí literatura a studie Crohnova nemoc (CD) je charakterizována spontánním, chronickým recidivujícím a remitentním zánětem gastrointestinálního traktu. Základní etiologie onemocnění není známa, ale pravděpodobně se vyvine sekundárně po stimulu prostředí u geneticky predisponované osoby, což vede k dysregulované imunitní odpovědi na střevní mikrobiom. Značné úsilí bylo věnováno pochopení úlohy střevního mikrobiomu, genetické náchylnosti ve hře a imunologie za tímto stavem, aby bylo možné upravit léčbu zaměřenou na snížení zánětu.

Před příchodem současných lékařských terapií byla definující charakteristikou CD, kterou zaznamenali raní patologové hodnotící vzorky tkáně, významná alterace gastrointestinálního lymfatického systému s lymfocytárními tromby, agregáty lymfocytů a lymfatických uzlin s granulomem v souladu s chronickou lymfangitidou (2). Navíc první výzkumníci ukázali, že obstrukční segmenty regionálních lymfatických uzlin tenkého střeva vedly k segmentálnímu střevnímu onemocnění podobnému CD (3). Imunohistochemické barvení potvrdilo přítomnost lymfangiektázií, lymfocytární perilymphangitidy, lymfatických obstrukcí lymfocyty nebo granulomy a zánětlivých lymfoidních folikulů u pacientů s CD (4). Před těmito ucpanými lymfatickými cévami zůstávají cévy roztažené lymfocyty (5). Novější studie ukázaly, že lymfatická denzita je také významně zvýšena v ileální tkáni a tkáni tlustého střeva pacientů s CD (6). Kromě toho byl vztah mezi zdravím střev a lymfatickým systémem zdůrazněn ve studiích, které zjistily, že určité typy bakterií a virů vedly k hluboce přebudovanému mezenterickému lymfatickému systému. Nálezy zahrnovaly rozvoj chronické lymfadenopatie a zvýšenou permeabilitu, podobně jako u CD (7). Vzhledem k výrazným strukturálním změnám, ke kterým dochází v mezenterickém lymfatickém systému u CD (1), jsou zapotřebí studie k posouzení, zda je změněna také lymfatická funkce.

Chylomikrony jsou lipoproteiny bohaté na cholesterol a triacylglycerol syntetizované tenkým střevem a transportované lymfatickým systémem. Orální příjem trioleátu a cholesterolu tedy povede k začlenění indikátorů do chylomikronů.

Pomocí ELISA a hmotnostní spektrometrické analýzy lze tyto značené chylomikrony kvantifikovat v séru, a tak slouží jako marker absorpce a tranzitu lymfatickým systémem. Studie na zdravých subjektech využily tento ověřený prostředek k posouzení lymfatického vychytávání a transportu. Po požití dochází ke zpoždění <60 minut ve výskytu chylomikronů značených 13C v séru, přičemž vrchol se vyskytuje mezi 180 a 240 minutami. Náš protokol je navržen tak, aby využil znalostí, které se naučily jiné studie orálních stopovacích látek na Washingtonské univerzitě při optimalizaci takových studií, včetně probíhajících studií Dr. Todda Cadea, které se zaměřují na sekreci chylomikronů u prediabetických pacientů. Naše studie vyhodnotí pacienty s významnou CD tenkého střeva a porovná je se zdravými kontrolami pomocí podobné metody.

Tato pilotní studie by byla první, která by zhodnotila kvantitativní funkci lymfatických uzlin u CD. Poskytlo by základ pro další studie hodnotící mezenterické lymfatické cévy a jejich roli v patogenezi CD a jako cíl léčby.

C Cíle studie

C1 Primární cíl Sledování nákladu přepravovaného lymfatickou cévou u pacientů s Crohnovou chorobou s postižením tenkého střeva jako způsob hodnocení možných defektů lymfatického systému u pacientů ve srovnání se zdravými kontrolními subjekty.

C2 Sekundární cíl Charakterizujte změny v pre- a postprandiálním metabolismu lipidů v důsledku Crohnovy choroby postihující tenké střevo.

C3 Terciární cíl Proveďte lipidomické analýzy, abyste určili, zda chylomikrony absorbované z tenkého střeva nesou odlišné mikrobiální lipidové signatury ve srovnání se zdravými kontrolními subjekty (např. LPS, commendamid (8)).

C4 Kvartérní Cíl Změřte absorpci lipidů ze střeva pomocí dechové analýzy 13CO2.

D Návrh studie

Přehled D1 nebo shrnutí návrhu Tato studie bude využívat dvouskupinový design studie, ve kterém 40 účastníků (20 pacientů s CD a 20 kontrol) navštíví jednou tuto studii krmení (perorální indikátor) a infuzi po celonočním hladovění.

Účastníci se budou rekrutovat z centra IBD Lékařské fakulty Washingtonské univerzity, Dobrovolníků pro zdraví Washingtonské univerzity, Centra pro komunitní výzkum a klinik IBD přidružených k Washingtonské univerzitě v okolní komunitě St. Louis.

Hlavní řešitel, spolupracující lékaři a koordinátoři studie budou odpovědní za identifikaci účastníků pomocí plakátů, e-mailu a existujících databází účastníků.

E Studijní postupy

E1 Screening pro způsobilost Personál IBD centra identifikuje způsobilé subjekty z pacientské větve. Po telefonu bude každému účastníkovi položena řada předběžných screeningových otázek k určení okamžitého vyloučení ze studie na základě kritérií vyloučení a zařazení. Účel studie a stručný přehled postupů, časového závazku a kompenzace budou projednány po telefonu, než jednotlivec souhlasí s účastí.

E2 Studijní návštěva

1. 7:00: Subjekt se hlásí oddělení klinického výzkumu na lékařské fakultě Washingtonské univerzity.

   1. Subjekt bude požádán, aby vynechal snídani a po celonočním lačnění (> 8 hodin) s ničím neužívaným ústy kromě vody, se hlásil na oddělení klinického výzkumu. Subjekty budou požádány, aby se alespoň 24 hodin před přijetím ke studijní návštěvě vyhýbaly kofeinu a alkoholu. Den před studijní návštěvou budou subjektům poskytnuty pokyny pro standardizované jídlo na snídani, oběd a večeři obsahující celkem 2 165 kalorií (46 % celkové energie ze sacharidů, 40 % z tuků a 14 % z bílkovin) . Tekuté složení (Ensure; Ross Laboratories, Columbus, OH) obsahující 250 kcal (40 g sacharidů, 6,1 g tuku a 8,8 g bílkovin) k zajištění úplného naplnění zásob jaterního glykogenu jako svačina před spaním. Tato svačina je zahrnuta v celkových kaloriích uvedených výše.
   2. Účastníkovi bude změřena jeho výška a hmotnost pomocí elektronické váhy a stadiometru v rámci oddělení klinického výzkumu. BMI se vypočítá z výšky a hmotnosti pomocí vzorce: [hmotnost (kg)/[výška (metry)2]. Krevní tlak bude změřen a zaznamenán.
   3. Účastník vyplní dotazník o anamnéze, který zahrnuje získání seznamu aktuálních léků. K vyplnění dotazníku může dojít po základním odběru krve a podání jídla
2. Do druhé antekubitální žíly se zavede katétr pro získání vzorků krve.
3. 8:00: Metabolická studie: Základní období: Výchozí vzorky krve a dechu pro stanovení obohacení pozadí izotopy. Poté subjekt zkonzumuje tekuté testovací jídlo připravené personálem CRU, které se skládá z 27 g Sol Carb, 1032 g Boost Plus, 3,2 g kanolového oleje, 0,2 g lecitinu, 5 mg/kg [1,2, 3, 7, 8-13C8] glyceryltrioleát a 40 g vody. Účastníci budou požádáni, aby tekutou potravu zkonzumovali do 20 minut, aby byla zajištěna její konzistence, s oškrábanými stranami nádoby, aby se zajistilo maximální požití. Navíc 30 minut po konzumaci jídla bude zahájena bolusová infuze 75 mikromol/kg (1,1,2,3,3-2H5)glycerolu ke sledování katabolismu VLDL. Vzorky krve a dechu budou odebírány v 0, 15, 30, 45, 60, 90, 120, 150, 180, 240, 300 a 360 minutách po požití jídla. Nepřímá kalorimetrie bude také prováděna s použitím techniky ventilované kukly po dobu 10 minut před každým odběrem vzorku dechu, aby se stanovila klidová rychlost metabolismu pro výpočty indikátoru a měření celkové oxidace mastných kyselin. Vzorky krve budou analyzovány na obohacení indikátorem a celkovou koncentraci volných mastných kyselin, triglyceridů a cholesterolu.
4. 14 hod.: Oběd bude podávat CRU, připravuje CRU kuchyně. Konec studijní návštěvy.