위축소술이 Amoxicillin 매개변수에 미치는 영향

연구 인구

18세에서 60세 사이의 남녀 비만 지원자 8명이 Federal Medical Council(2015)에서 정한 기준에 따라 비만 수술의 징후가 있는 César Cals 병원장 박사의 비만 프로그램에서 선발되어 수술을 받았습니다. RYGB 수술 기법을 사용합니다.

모든 피험자는 정보에 입각한 동의서에 서명했습니다. 이 연구는 Ceará 연방 대학의 기관 검토 위원회(IRB)의 승인을 받았으며, 국립 연구 윤리 위원회(National Health Council, National Health Council, Ministry of Health) 및 병원 일반 Dr. César Cals의 과학 위원회의 인증을 받았습니다. 본 연구는 2013년 개정된 헬싱키 선언의 윤리적 원칙과 Good Clinical Practice Guidelines에 따라 수행되었습니다.

연구 설계 및 약동학 샘플링

이 연구는 수술 전(시간 0 - T0)과 비만 수술 후 2개월(시간 2 - T2)의 두 가지 치료 기간으로 단일 중심, 공개 라벨, 무작위, 단일 용량 연구로 수행되었습니다. 각 기간에 비만 지원자들은 하룻밤 금식(약 8시간) 후 200mL의 물과 함께 아목시실린 500mg 캡슐(Amoxil®, GlaxoSmithKline Brazil Ltda.)을 단일 경구 투여 받았습니다. 피험자는 약물 복용 후 최대 3시간 동안 금식 상태를 유지했습니다. 물과 음식 제한은 제형 섭취 후 최대 3시간 동안 유지되었습니다. 모든 피험자에게 표준 식사가 제공되었습니다. 임의의 약물(항고혈압제, 항당뇨병제 및 기타)을 사용해야 하는 지원자는 아목시실린 섭취 3시간 후 사용하도록 지시받았다. 아목시실린의 혈장 농도 측정을 위한 혈액 샘플(6mL)을 투여 전(0시간), 0.33, 0.66, 1, 1.5, 2, 2.5, 3, 4, 6 및 8에서 정맥 카테터를 통해 헤파린화된 튜브로 수집했습니다. h 투여 후. 크로마토그래피 분석을 위한 혈장 샘플은 혈액 샘플을 원심분리(4ºC에서 2000g x 12분)하여 얻었습니다. 혈장 샘플은 분석 전까지 -20°C에서 보관했습니다.

수술 전후의 인체 측정 파라미터

각 방문(T0 및 T2)에서 모든 지원자의 체중과 키를 측정한 후 비만 수술 전후 인체 측정 비교를 위해 체질량 지수(BMI)를 계산했습니다. 체중은 디지털 저울을 이용하여 측정하였으며 지원자들은 가벼운 옷차림, 맨발, 빈주머니, 장신구 없이 착용하였다. 신장은 2미터 연장된 스타디오미터를 사용하여 측정되었습니다. 피험자는 맨발로 다리와 발이 평행하고 양발에 체중이 분산되어 있으며 팔은 몸 옆면에 이완되어 있고 손바닥은 몸을 향하고 머리는 프랑크푸르트 평면에 위치합니다.

비만 수술 절차

이 시험에 포함된 모든 지원자는 소화관 루프 크기(길이 1.20m)와 담도췌장 루프(길이 1m)에 대한 표준화에 따라 동일한 외과 팀이 수행한 RYGB 수술 기법을 사용하여 수술을 받았습니다. 위 공장 문합은 Fouchet 32F 프로브로 보정되어 직경이 12mm가 되었습니다.

분석 방법

아목시실린 혈장 농도는 질량 분석법(LC-MS/MS) 및 액체-액체 추출과 결합된 액체 크로마토그래피로 정량화되었습니다.

시료 준비를 위해 각 혈장 시료 100µL, 내부 표준(IS) cephalexin(2.5µg/mL) 50µL 및 acetonitrile(100%) 500µL를 유리관에 넣었습니다. 샘플을 와동(30초)하고 원심분리했습니다(4ºC에서 2000g x 4분). 유기상을 다른 유리관으로 옮겨 500 μL의 탈이온수를 첨가하고 와동시켰다(10초). 샘플에 10mL의 디클로로메탄(100%)을 첨가하고, 와류(10초)하고 원심분리했습니다(4ºC에서 2000g x 4분). 유기상을 자동 주입기 PCR 플레이트로 옮겼습니다.

고압 액체 크로마토그래피(HPLC) 시스템(Agilent, Germany)은 LC-10AD 펌프, 자동 주입기 모델 CTC HST PAL/110695 및 G1316A/DE03018295 오븐으로 구성되었습니다. 추출된 용액(10µL)을 65ºC로 유지되는 150 x 4.6mm(5µm 입자) Inertsil ODS-C18 컬럼에 주입하고 이동상은 methanol/water(30/70, v/v) + 0.1% 유속 900 μL/min, 분할 비율 1:3의 포름산. 사용된 질량 분석계는 아목시실린 및 세팔렉신에 대해 각각 366.00 > 348.90 및 348.00 > 158.00 전이를 모니터링하기 위해 MRM(다중 반응 모니터링)에 대해 포지티브 모드에서 전기분무가 있는 Quattro Micro(Micromass, Manchester, UK)였습니다.

방법 검증은 미국 식품의약국(FDA) 생체 분석 방법 검증 지침[22] 및 브라질 국가위생감시국(ANVISA)[23]에 따라 수행되었습니다. 이 방법의 특이성을 평가하기 위해 제안된 추출 절차와 크로마토그래피 또는 분광 조건을 사용하여 간섭에 대해 8개의 다른 블랭크 혈장 로트(정상 4개, 용혈 2개 및 지방혈성 2개)를 테스트하고 정량화 하한(LLOQ). 검량선은 아목시실린(20-5000 ng/mL)의 8가지 농도에서 표준 혈장 샘플을 3중으로 분석하여 작성되었으며 각 검량선의 선형성은 아목시실린/IS 대 공칭의 피크 면적비(y)를 플로팅하여 결정되었습니다. 분석물의 농도. 보정 곡선은 가중(1/x) 최소 제곱 선형 회귀로 구성되었습니다. 분석의 정확성과 정밀도는 분석 내 및 분석 간 연구를 통해 평가되었습니다. LLOQ 및 각 품질 관리(QC) 혈장 샘플(60, 850, 2500, 4000 및 12000 ng/mL)의 7개 분취량을 서로 다른 3일 동안 3개의 검증 배치에서 실행했습니다. 일중 및 일중 정밀도는 변동 계수, CV(%) = (SD/M) x 100으로, 정확도는 백분율 상대 오차, RE(%) = [(E - T)/T] x 100으로 결정되었습니다. , 여기서 M은 평균, SD는 M의 표준 편차, E는 실험적으로 결정된 농도, T는 이론적 농도입니다. 기질 효과 실험은 아목시실린(60 및 4000 ng/mL)과 이동상에 직접 주입된 IS와 바탕 혈장 추출물에 첨가된 표준 용액(정상 4개, 용혈 2개 및 지방혈 2개) 사이의 비율을 사용하여 수행되었습니다. 각 샘플은 다음 공식에 따라 IS(MFN)로 정규화된 매트릭스 인자로 얻었습니다. MFN = (매트릭스 내 분석물의 반응/내부 표준 반응 매트릭스)/(용액 내 분석물의 반응/내부 표준 용액의 반응 ). 안정성 QC 혈장 샘플(60 및 4000 ng/mL)은 단기(6.0 h) 실온, 3번의 동결-해동(-20 ~ 25 °C) 주기 및 46.5시간 자동 시료 주입기(25 ºC) 안정성 테스트를 3번 수행했습니다. . 안정성 결과를 공칭 값과 비교했습니다.

약동학 분석

약동학 매개변수는 Phoenix WinNonlin® 소프트웨어 버전 5.0(Pharsight Corp, MoutainView, CA, USA)을 사용하여 비구획 모델로 분석한 혈장 농도 대 시간 곡선을 기반으로 얻었습니다. 최대 혈장 농도(Cmax) 및 Cmax까지의 시간(tmax) 값은 관찰된 개별 혈장 농도 대 시간 곡선에서 직접 얻었습니다. 시간 0에서 최종 정량화 가능한 농도 시간까지의 혈장 농도 대 시간 곡선 아래 면적은 선형 사다리꼴 규칙에 의해 계산되었습니다. 제거율상수(ke)는 대수선형회귀분석으로 구하였고 제거반감기(t1/2)는 [t1/2=ln(2)/ke]식으로 계산하였다.

통계 분석

양적 변수(연속 및 불연속)는 초기에 분포의 정규성을 확인하기 위해 Kolmogorov-Smirnov 테스트로 분석되었습니다. 대부분의 경우 이 요건이 검증되었기 때문에 기술통계를 위해 평균과 표준편차(SD)를 계산하였다. 파라메트릭 테스트는 분석 통계에 사용되었습니다.

비만 수술 전(T0)과 후(T2)에서 얻은 비만 지원자의 약동학 매개변수를 비교하기 위해 대응 데이터에 대한 t-검정을 사용했습니다. 평균 차이(또는 차이의 평균) 및 각각의 95% 신뢰 구간(95% CI)도 결정되었습니다. 또한 비만 수술 전과 후의 검증된 매개변수 값의 비율을 기하 평균과 95% CI로 나타내었다. 두 변수 간의 선형 상관 관계의 정도와 부호는 95% CI와 함께 Pearson 상관 계수로 평가되었습니다.

모든 분석에서 양측 검정을 사용하여 유의 수준을 0.05로 설정했습니다. GraphPad Prism 소프트웨어 버전 5.00(GraphPad Software, San Diego, California, USA)을 통계 분석 및 그래픽 모두에 사용했습니다.