이상성 인산칼슘의 골형성 가능성에 대한 조직학적 분석

이 연구는 무작위 대조 임상 시험으로 설계되었습니다. 연구에 참여하려면 환자는 적어도 하나의 치아가 발치되기 쉽고 치유 기간이 완료된 후 치과 임플란트를 식립해야 합니다. 치아 추출의 적응증은 만성 치근단 돌기, 만성 치주 질환 또는 수직 뼈의 골절입니다. 포함 기준은 다음과 같습니다: 18세에서 60세 사이, 온전한 신체적, 정신적 건강, 환자는 연구 프로토콜을 이해해야 하며, 환자는 사전 동의에 서명해야 합니다. Wang과 Hwang이 설명한 임플란트 보철 치료에 대한 절대 금기 사항 중 하나 이상을 가진 환자는 연구에서 제외됩니다. 기타 제외 기준에는 조절되지 않는 당뇨병, 골다공증 및 골감소증, 비타민 D 결핍증, 비스포스포네이트 요법, 글루코코르티코이드 요법, 갑상선 기능 저하증, 조절되지 않는 심혈관 질환(고혈압, 관상동맥 질환, 울혈성 심부전) 및 다음과 같은 국소 요인과 같은 전신 질환이 포함되었습니다. 담배 제품 사용(하루 최대 10개비) 및 구강 위생 불량. 임산부와 수유 중인 여성은 연구에 포함되지 않습니다.

위에서 언급한 일반적인 건강 기준 외에도 환자는 적어도 하나의 구강 내 기준, 즉 천공이나 열개와 같은 협측 뼈 결함의 존재를 충족해야 합니다. 포함 기준을 충족하고 참여할 의향이 있는 환자는 웹 인터페이스(https://www.randomizer.org/)를 통해 무작위로 배정됩니다.

참가자 및 자료 참가자는 구강외과 진료실에서 모집됩니다. 총 36명의 건강한 환자가 연구에 포함될 것입니다. 시험의 타당성 분석에서는 시험방법의 동등성, 기존방법 대비 시험방법의 비열등성 접근방식을 사용하였다. 유의 수준 α 0.05, 검정력 80%, 예측 결과의 예상 표준 편차 10, 동등성 한계 d = 10을 사용하여 연구에 최소 36명의 피험자를 포함해야 했으며, 18명의 피험자를 포함해야 했습니다. 그룹당.

테스트 그룹의 총 18명의 환자에게 I-BCP(Maxresorb® 주사제, Botiss GmbH, 독일 베를린 소재)를 투여하게 됩니다. 이 생체재료는 플라스틱 주사기를 사용하여 결함 부위에 배치하는 페이스트 형태의 동종이형 뼈 대체 재료입니다. 이 물질은 60% HA와 40% β-TCP(입자 크기 15-50nm)의 조성으로 이상성 인산칼슘 과립을 함유한 수성 젤로 구성됩니다. 대조군의 환자는 BX(cerabone®, Botiss GmbH, Berlin, Germany)를 투여받게 됩니다. 이 물질은 완전히 무기물이며 100% HA로 구성되어 있습니다. 이 연구에서 재료는 결함에 배치하기 전에 생리학적 용액과 혼합된 과립 형태(과립의 크기는 0.5~1mm)로 사용됩니다.

첫 번째 수술 단계 및 치유 기간 수술 전 환자에게 3% 클로르헥시딘 용액을 투여하여 1분간 구강을 헹구게 됩니다. 그런 다음 국소 마취(2% Lidocaine®, Belupo, Koprivnica, 크로아티아)를 실시하고 수술 부위를 멸균 천으로 덮습니다. 전체 두께의 점막 골막 플랩이 추출 부위에서 상승됩니다. 무외상적으로 발치를 하기 위해서는 발치 전 드릴을 이용하여 다근치의 뿌리를 분리하게 됩니다. 추출은 가능한 한 폐포에 대한 외상을 최소화하면서 무외상성 기구를 사용하여 수행됩니다. 그런 다음 폐포를 주의 깊게 검사하고 큐렛 처리하여 과립을 제거하고 폐포의 새로운 출혈을 자극합니다. 테스트 그룹에서는 I-BCP, 컨트롤 그룹에서는 BX를 사용하여 폐포를 가장자리까지 채웁니다. 결국 뼈 이식 생체재료는 두 그룹 모두에서 돼지 심낭에서 얻은 흡수성 천연 콜라겐 막(Jason® 막, Botiss GmbH, 독일 베를린)으로 덮여 있습니다. 그런 다음 점막골막 플랩을 조정하고 닫아 콜라겐 막이 연조직(5.0 모노필라멘트)으로 완전히 덮이도록 합니다. 그런 다음 환자에게 진통제(이부프로펜 400mg)를 처방하고 다음 7일 동안 항생제(클라불란산 또는 클린다마이신과 함께 아목시실린)를 복용하도록 지시합니다. 수술 후 10일째 봉합사를 제거합니다.

뼈 결함이 재생되는 데는 6개월이 소요됩니다. 방사선 사진을 바탕으로 적절한 보형물을 선택하고 위치를 정하게 됩니다.

두 번째 수술 단계 발치 후 6개월이 지나면 환자는 확대된 부위에 치과 임플란트(Ankylos®, Dentsply Sirona, Charlotte, USA)를 식립하기 위해 진료실을 방문합니다. 환자 준비(구강 세척, 국소 마취, 작업 영역의 멸균 덮음)는 첫 번째 수술 절차와 동일합니다. 이어서, 전체 두께 플랩을 올리고 트레핀 드릴(내경 2.5 mm; Ustomed® intrumente, Tuttlingen, Germany)을 사용하여 조직학적 분석을 위해 확대된 부위의 생검을 실시합니다. 환자의 뼈가 불필요하게 제거되는 것을 방지하기 위해 트레핀 드릴의 내경은 임플란트 베드를 준비하는 데 사용되는 최종 드릴의 내경보다 작다는 점을 강조하는 것이 중요합니다. 또한, 각 생검은 잘못된 생검 가능성을 줄이기 위해 확대된 부위의 중앙 부분에서 채취됩니다(예: 생체 재료로 확대되지 않은 원래 뼈만 생검).

조직학적 분석 트레핀 드릴을 4% 포름알데히드 용액이 들어 있는 밀봉된 플라스틱 튜브에 넣고 추가 분석을 위해 조직학 실험실로 보냅니다. 조직은 2주 동안 4% 포름알데히드 용액에 고정됩니다. 그 후, 생검은 뼈의 부드러운 석회질 제거에 사용되는 25% 에틸렌디아민테트라아세트산(EDTA)(Decalcifier Soft®, Solvagreen®, Karlsruhe, Austria)에 보관됩니다. 석회질 제거 후, 조직은 조직 처리기(MTP, SLEE Medical GmbH, Mainz, Germany)에서 표준 프로토콜을 받게 됩니다. 이어서 파라핀 블록(MPS/P, SLEE Medical GmbH, Mainz, Germany)이 형성됩니다. 회전식 마이크로톰(CUT 4062, SLEE Medical GmbH, Mainz, Germany)을 사용하여 각 생검에서 5μm 두께의 6개 연속 섹션을 준비합니다. 그런 다음 표본을 Masson trichrome 염색 및 Movat pentachrome 염색으로 염색합니다. 준비물에 대한 현미경 검사는 비디오 카메라(Axio Imager M2, Zeiss, Oberkochen, Germany)와 함께 광학 현미경(Leica DMRB, Leica Microsystems GmbH, Wetzlar, Germany)을 사용하여 수행됩니다. 병리조직학적 분석은 이식된 생체재료에 대한 조직 반응, 즉 섬유아세포, 혈관, 호중구, 단핵구/대식세포 및 다핵거대세포(MGC)의 존재를 평가합니다.

표본의 조직형태학적 처리는 무료 ImageJ 소프트웨어(https://imagej.nih.gov/ij/download.html)를 사용하여 수행됩니다. 새로운 뼈의 표면, 생체재료의 표면, 연조직의 표면이 표본에 표시됩니다. 그런 다음 표본의 표면을 측정하고 얻은 데이터로부터 다음 사항을 계산합니다: 형성된 새로운 뼈의 비율, 남은 생체 물질의 비율, 연조직의 비율.

통계 분석 범주형 변수는 절대 빈도와 상대 빈도로 보고됩니다. 범주형 변수 간의 차이는 Fisher-Freeman-Halton 테스트를 통해 테스트되었습니다.

분포의 정규성은 Shapiro-Wilk 테스트를 통해 테스트됩니다. 연속형 데이터는 산술평균과 표준편차로 설명하겠습니다. 연속형 변수의 차이는 Mann-Whitney U 테스트(해당 차이 및 95% 신뢰 구간 차이 포함)로 테스트됩니다.

모든 P 값은 양면입니다. 유의 수준은 알파 = 0.05로 설정되었습니다. IBM SPSS 통계 소프트웨어, 버전 27.0.1, 분석에 사용될 예정입니다.