Bifaasisen kalsiumfosfaatin osteogeenisen potentiaalin histologinen analyysi

Tutkimus suunniteltiin satunnaistetuksi kontrolloiduksi kliiniseksi tutkimukseksi. Osallistuakseen tutkimukseen potilaalla on oltava vähintään yksi poistoon taipuvainen hammas ja hammasimplantti asetetaan paranemisjakson päätyttyä. Indikaatioita hampaanpoistoon ovat: krooninen periapikaalinen prosessi, krooninen parodontaalisairaus tai pystysuoran luun murtuma. Osallistumiskriteerit ovat: ikä 18-60 vuotta, ehjä fyysinen ja henkinen terveys, potilaan on ymmärrettävä tutkimusprotokolla, potilaan tulee allekirjoittaa tietoinen suostumus. Potilaat suljetaan pois tutkimuksesta, jos heillä oli vähintään yksi ehdottomista vasta-aiheista implanttiproteesihoitoon, jonka Wang ja Hwang kuvaavat. Muita poissulkemiskriteereitä olivat seuraavat systeemiset sairaudet: hallitsematon diabetes, osteoporoosi ja osteopenia sekä D-vitamiinin puutos, bisfosfonaattihoito, glukokortikoidihoito, kilpirauhasen vajaatoiminta, hallitsematon sydän- ja verisuonisairaus (hypertensio, sepelvaltimotauti, kongestiivinen sydämen vajaatoiminta) ja seuraavat paikalliset tekijät: tupakkatuotteiden käyttö (enintään 10 savuketta päivässä) ja huono suuhygienia. Raskaana olevat ja imettävät naiset eivät ole mukana tutkimuksessa.

Edellä mainittujen yleisten terveydellisten kriteerien lisäksi potilaan tulee täyttää ainakin yksi intraoraalinen kriteeri, nimittäin poskiluun vaurion, kuten fenestration tai dehiscention, esiintyminen. Potilaat, jotka täyttivät osallistumiskriteerit ja olivat halukkaita osallistumaan, jaetaan satunnaisesti verkkokäyttöliittymän (https://www.randomizer.org/) kautta.

Osallistujat ja materiaalit Osallistujat rekrytoidaan suukirurgian toimistosta. Tutkimukseen osallistuu yhteensä 36 tervettä potilasta. Testin validiteettia analysoitaessa käytettiin testattujen menetelmien ekvivalenssin ja testatun menetelmän ei-alempiarvoisuuden lähestymistapaa olemassa olevaan menetelmään verrattuna. Merkitystasolla α 0,05, testiteholla 80 %, ennustetun tuloksen odotetulla keskihajonnalla 10 ja ekvivalenssirajalla d = 10 tutkimukseen oli otettava mukaan vähintään 36 henkilöä, 18 henkilöä. ryhmää kohden.

Kaikkiaan 18 testiryhmän potilasta saavat I-BCP:n (Maxresorb®-injektio, Botiss GmbH, Berliini, Saksa). Tämä biomateriaali on alloplastista luunkorvikemateriaalia tahnan muodossa, joka asetetaan defektin sisään muoviruiskulla. Materiaali koostuu vesipitoisesta geelistä, joka sisältää kaksifaasisen kalsiumfosfaatin rakeita koostumuksessa 60 % HA:ta ja 40 % β-TCP:tä (partikkelikoko välillä 15-50 nm). Kontrolliryhmän potilaat saavat BX:n (cerabone®, Botiss GmbH, Berliini, Saksa). Materiaali on täysin epäorgaanista ja koostuu 100 % HA:sta. Tässä tutkimuksessa materiaalia käytetään rakeisessa muodossa (rakeiden koko on 0,5 - 1 mm), sekoitettuna fysiologiseen liuokseen ennen vaurioon sijoittamista.

Ensimmäinen leikkausvaihe ja paranemisjakso Ennen toimenpidettä potilaalle annetaan 3 % klooriheksidiiniliuosta suuontelon huuhteluun minuutin ajan. Sitten annetaan paikallispuudutus (2 % Lidocaine®, Belupo, Koprivnica, Kroatia) ja leikkausalue peitetään steriileillä verhoilla. Täyspaksuinen limakalvon läppä nostetaan poistokohtaan. Jotta hampaanpoisto suoritetaan atraumaattisesti, monijuuristen hampaiden juuret erotetaan poralla ennen poistoa. Poisto suoritetaan atraumaattisilla instrumenteilla siten, että keuhkorakkuloihin kohdistuu mahdollisimman vähän traumaa. Alveoli tutkitaan sitten huolellisesti ja kuretoidaan rakeiden poistamiseksi ja tuoreen verenvuodon stimuloimiseksi alveoleissa. Alveoli täytetään reunaan asti I-BCP:llä testiryhmässä ja BX:llä kontrolliryhmässä. Lopulta luusiirteen biomateriaali peitetään kummassakin ryhmässä resorboituvalla natiivilla kollageenikalvolla, joka on saatu sian sydänpussista (Jason®-kalvo, Botiss GmbH, Berliini, Saksa). Limakalvon läppä säädetään sitten ja suljetaan niin, että kollageenikalvo peittyy kokonaan pehmytkudoksella (5,0 monofilamentti). Tämän jälkeen potilaalle määrätään kipulääkettä (400 mg ibuprofeenia) ja häntä neuvotaan ottamaan antibiootteja (amoksisilliinia ja klavulaanihappoa tai klindamysiiniä) seuraavat 7 päivää. 10. päivänä leikkauksen jälkeen ompeleet poistetaan.

Luuvaurion uusiutumisjakso kestää 6 kuukautta. Röntgentutkimuksen perusteella valitaan ja sijoitetaan sopiva implantti.

Toinen leikkausvaihe Kuusi kuukautta poiston jälkeen potilaat tulevat toimistolle asettamaan hammasimplanttia (Ankylos®, Dentsply Sirona, Charlotte, USA) lisätylle alueelle. Potilaan valmistelu (suuontelon huuhtelu antiseptisellä liuoksella, paikallinen anestesia, työalueen steriili peittäminen) on sama kuin ensimmäisessä leikkaustoimenpiteessä. Tämän jälkeen täyteen paksuinen läppä nostetaan ja kasvatetusta alueesta otetaan biopsia histologista analyysiä varten käyttämällä trefiiniporaa (sisähalkaisija 2,5 mm; Ustomed® intrumente, Tuttlingen, Saksa). On tärkeää korostaa, että trefiiniporan sisähalkaisija on pienempi kuin lopullisen poran, jota käytetään implanttialustan valmistukseen, jotta vältetään potilaan luun tarpeeton poistaminen. Lisäksi jokainen biopsia otetaan lisätyn alueen keskiosasta, jotta vähennetään virheellisen biopsian mahdollisuutta (esim. biopsia vain alkuperäisestä luusta, jota ei ole lisätty biomateriaalilla).

Histologinen analyysi Trefiinipora sijoitetaan hermeettisesti suljettuun muoviputkeen, joka sisältää 4 % formaldehydiliuosta, ja lähetetään histologiseen laboratorioon lisäanalyysiä varten. Kudos kiinnitetään 4-prosenttiseen formaldehydiliuokseen kahden viikon ajan. Myöhemmin biopsiat säilytetään 25-prosenttisessa etyleenidiamiinitetraetikkahapossa (EDTA) (Decalcifier soft®, Solvagreen®, Karlsruhe, Itävalta), jota käytetään luun hellävaraiseen kalkinpoistoon. Kalkinpoiston jälkeen kudos alistetaan standardiprotokollalle kudosprosessorissa (MTP, SLEE medical GmbH, Mainz, Saksa). Tätä seuraa parafiinilohkojen muodostuminen (MPS/P, SLEE medical GmbH, Mainz, Saksa). Jokaisesta biopsiasta valmistetaan kuusi peräkkäistä 5 μm:n paksuista leikettä käyttämällä pyörivää mikrotomia (CUT 4062, SLEE medical GmbH, Mainz, Saksa). Näytteet värjätään sitten Massonin trikromipetsillä ja Movat pentakromipetsillä. Valmisteiden mikroskopia suoritetaan valomikroskoopilla (Leica DMRB, Leica Microsystems GmbH, Wetzlar, Saksa) yhdessä videokameran kanssa (Axio Imager M2, Zeiss, Oberkochen, Saksa). Patohistologinen analyysi arvioi kudosvasteen istutettuun biomateriaaliin, eli fibroblastien, verisuonten, neutrofiilien, monosyyttien/makrofagien ja monitumaisten jättiläissolujen (MGC) läsnäolon.

Näytteiden histomorfometrinen käsittely suoritetaan käyttämällä ilmaista ImageJ-ohjelmistoa (https://imagej.nih.gov/ij/download.html). Näytteisiin merkitään uuden luun pinta, biomateriaalin pinta ja pehmytkudoksen pinta. Sitten mitataan näytteen pinta ja saaduista tiedoista lasketaan: muodostuneen uuden luun prosenttiosuus, jäljellä olevan biomateriaalin prosenttiosuus ja pehmytkudoksen prosenttiosuus.

Tilastollinen analyysi Kategoriset muuttujat raportoidaan absoluuttisella ja suhteellisella frekvenssillä. Kategoristen muuttujien välisiä eroja testattiin Fisher-Freeman-Halton-testillä.

Jakauman normaalia testataan Shapiro-Wilk-testillä. Jatkuvat tiedot kuvataan aritmeettisen keskiarvon ja keskihajonnan avulla. Jatkuvien muuttujien erot testataan Mann-Whitney U -testillä (vastaavalla erolla ja eron 95 %:n luottamusvälillä).

Kaikki P-arvot ovat kaksipuolisia. Merkitsevyystasoksi asetettiin alfa = 0,05. IBM SPSS Statistical -ohjelmisto, versio 27.0.1, käytetään analyysiin.