Badanie pilotażowe celekoksybu u pacjentów z rakiem macicy stopnia 2 lub 3

Rak endometrium jest najczęstszym nowotworem ginekologicznym w Stanach Zjednoczonych. Liczba zgonów z powodu raka endometrium wzrosła od 1987 roku o 128%. Szacuje się, że w 2001 r. u około 38 300 kobiet rozwinie się rak endometrium (ACS Fakty i liczby), a około 6 600 kobiet umrze z powodu raka endometrium. Przedinwazyjne i dobrze zróżnicowane raki endometrium są uwarunkowane hormonalnie i często można je wyleczyć wyłącznie chirurgicznie. Guzy o wyższym stopniu złośliwości zwykle nie są napędzane przez hormony i rozmnażają się za pomocą nieznanych mechanizmów. Guzy te są w dużej mierze odpowiedzialne za rosnącą śmiertelność. Odpowiedzi na toksyczne protokoły leczenia nawracającego raka endometrium są fatalne. Niestety, te kobiety po menopauzie często mają również choroby współistniejące, które ograniczają ich kwalifikację do aktualnej chemioterapii i radioterapii.

Ekspresję COX-II zidentyfikowano w wielu ludzkich nowotworach, w tym: raku okrężnicy, raku żołądka, raku przełyku, raku pęcherza moczowego, raku głowy i szyi, raku wątroby, raku trzustki, raku prostaty i raku piersi. Ekspresja COX-II jest również silnie eksprymowana w guzie pierwotnym i miejscu przerzutów w ludzkim raku szyjki macicy. COX-II może wpływać na kontrolę cyklu komórkowego poprzez zwiększanie zdolności proliferacyjnej nowotworowych komórek endometrium. Ponadto inhibitory COX-II hamują proliferację guza nawet w komórkach, które nie wykazują ekspresji COX. Sugeruje to alternatywny, niezdefiniowany jeszcze mechanizm działania, który może odgrywać rolę w hamowaniu wzrostu tkanki nowotworowej.

Zwiększona ekspresja COX-II skłoniła badaczy do stosowania inhibitorów COX-II w profilaktyce i/lub leczeniu raka okrężnicy i prostaty, zarówno in vivo, jak i in vitro. Celekoksyb jest obecnie zatwierdzony przez FDA do chemoprewencji raka okrężnicy u pacjentów z rodzinną polipowatością gruczolakowatą. Jeśli można wykazać, że COX-II jest regulowany w dół przez inhibitory COX-II w raku endometrium, mogą one oferować podobny potencjał chemoprewencyjny lub chemioterapeutyczny, który został już udowodniony w raku okrężnicy.

Aktywność enzymatyczna COX-II nie zawsze koreluje z ekspresją genów narządu końcowego. W szlaki apoptozy zaangażowanych jest wiele genów, na które wpływają inhibitory COX-II. NS-398, selektywny inhibitor COX-II, powoduje podwyższenie ekspresji APC i obniżenie poziomu c-myc. Poziomy odpowiedzi 4 na apoptozę gruczołu krokowego (Par-4) są zwiększone w komórkach traktowanych inhibitorami COX. PTEN i hMLH1 to geny zaangażowane w transformację złośliwą tkanki endometrium. 5-lipooksygenaza (5-LOX) jest często skorelowana z COX-I i COX-II. Tak więc, oprócz COX-I i COX-II, są to dobre geny kandydujące do badania wpływu inhibitorów COX-II na raka macicy.

Dane wstępne Ponieważ ekspresję COX-II obserwuje się w endometrium i innych guzach zależnych od hormonów, zbadaliśmy ekspresję COX-II w raku endometrium. Nasze wstępne badania na 41 utrwalonych próbkach łagodnego i nowotworowego endometrium wykazały, że COX-II nie ulega ekspresji w łagodnej tkance endometrium, minimalnie wybarwia się (~1% komórek nowotworowych) w dobrze zróżnicowanych rakach endometrium, a najsilniej wybarwia się w słabo zróżnicowanych raki (~12% komórek nowotworowych, większość silnie wybarwiająca się). COX-II ulega ekspresji we wszystkich słabo zróżnicowanych rakach macicy. Nasze badanie wykazało również, że COX-II był również silnie eksprymowany w rakach surowiczych brodawkowatych macicy (UPSC), jak również rakach jasnokomórkowych macicy. Odkrycia te zostały potwierdzone przez Ferrandinę i in. Niewielki procent naszych pacjentów, a także pacjentów w badaniu Ferrandina ma tylko 1+ lub 1-5% barwienia. Te „osoby o niskim poziomie ekspresji” stanowiły tylko 1/13 (7,7%) naszych pacjentów.

Ekspresja COX-II w raku endometrium ma niewielką odwrotną korelację z apoptozą (r=-0,534). Jednak ekspresja COX-II w raku endometrium korelowała z inwazją naczyń limfatycznych (r = 0,69) i głębokością inwazji (r = 0,68). Nie było korelacji między ekspresją COX-II a ER (r=0,03) lub PR (r=-0,02). Obecność słabo zróżnicowanego guza może sugerować szlak niezależny od hormonów, prowadzący do odróżnicowania. Podsumowując, nasze wstępne dane ujawniają, że ekspresja COX-II jest wysoka w raku endometrium typu endometrioidalnego stopnia 2 i 3, jak również podtypach UPSC i jasnokomórkowych i jest skorelowana ze znanymi klinicznymi czynnikami prognostycznymi.

Ekspresję COX-II zidentyfikowano w wielu typach ludzkich nowotworów. Rak macicy jest najczęstszym nowotworem ginekologicznym w Stanach Zjednoczonych, aw ciągu ostatniej dekady nastąpił wzrost liczby zgonów z powodu raka macicy, głównie z powodu trudności w leczeniu nawrotów w bardziej agresywnych typach histologicznych. Współautorzy badania zidentyfikowali również ekspresję COX-II w raku endometrioidalnym, jasnokomórkowym i brodawkowatym macicy stopnia 2 i 3. Regulacja w górę COX-II może kontrolować cykl komórkowy poprzez regulację zdolności proliferacyjnej nowotworowych komórek endometrium. Jest to badanie porównawcze fazy II przed i po interwencji u kwalifikujących się pacjentek, oceniające wpływ inhibitora COX-II na raka macicy. Pacjentki, u których biopsja endometrium wykaże raki endometrioidalne, jasnokomórkowe i brodawkowate macicy stopnia 2 lub 3 stopnia, będą otrzymywać selektywny inhibitor COX-II, Celebrex (Celecoxib) do dnia operacji. Ekspresja COX-II i p21 zostanie określona ilościowo po leczeniu celekoksybem u kwalifikujących się pacjentów. Ta ekspresja zostanie oceniona przez wykonanie barwienia immunohistochemicznego biopsji endometrium (przed interwencją) i próbki po histerektomii (po interwencji). Apoptoza, oceniana za pomocą testu TUNEL (TUNEL), w którym pośredniczy terminalna transferaza deoksynukleotydylowa (TdT), będzie również oceniana i porównywana z ekspresją COX-II w raku endometrium w dwóch próbkach, biopsja endometrium (przed interwencją ) i macicy (po interwencji). Oprócz analizy IHC i apoptozy, ekspresja genów związanych z COX w próbkach macicy po interwencji będzie. Ta ekspresja genu zostanie porównana z dopasowanymi kontrolami, które nie były leczone inhibitorem COX-II. Ekspresja COX-II będzie skorelowana z ustalonymi klinicznymi czynnikami prognostycznymi, w tym inwazją naczyń limfatycznych, głębokością inwazji mięśniówki macicy i zajęciem węzłów chłonnych. Stawiamy hipotezę, że celekoksyb obniży ekspresję COX-II w tych typach nowotworów, tak jak ma to miejsce w innych podobnych nowotworach. Stawiamy również hipotezę, że apoptoza, mierzona testem TUNEL, będzie zwiększona w obszarach o mniejszej ekspresji COX-II i powinna być odwrotnie proporcjonalna do komórkowej ekspresji p21. Dodatkowo inhibitory COX-II wpływają na szlaki apoptotyczne nawet w komórkach, które nie wykazują ekspresji COX-II. W przypadku komórek o niskiej ekspresji aktywność inhibitora COX-II można lepiej udokumentować za pomocą apoptozy. Stawiamy hipotezę, że ekspresja genów związana z COX zostanie zmieniona, co sugeruje regulację w górę lub w dół tych genów w tkance narządu końcowego. Udokumentowanie obniżenia poziomu enzymu COX-II i zmienionej ekspresji genów w raku endometrium po leczeniu celekoksybem może zaowocować dalszymi badaniami prospektywnymi z zastosowaniem selektywnych inhibitorów COX-II jako skutecznych, dobrze tolerowanych środków chemioterapeutycznych w tych rakach macicy, które są oporne na wiele obecnie stosowanych terapii.