Hiperoksja, erytropoeza i mikrokrążenie u krytycznie chorego pacjenta

Interwencje:

Łącznie zarejestrowano czterdziestu pacjentów. Pierwszych 20 pacjentów (grupa hiperoksji) przeszło 2-godzinny okres hiperoksji normobarycznej (FiO2 1,0), zgodnie z zastosowanym protokołem. W przypadku pozostałych 20 pacjentów (grupa kontrolna) nie zastosowano żadnych zmian w FiO2. Wszystkich pacjentów zapisywano rano, a hiperoksję wykonywano w przedziale czasowym między 10:00 a 14:00, aby zminimalizować zmienność wynikającą z rytmu okołodobowego produkcji EPO. W okresie badania nie stosowano żadnych zmian w sedacji ani dawce wazopresyjnej.

Wymiary:

W dniu badania pomiary wykonywano w odstępach 2-godzinnych: wyjściowy (t0), poniżej 1,0 FiO2 (t1) oraz po powrocie do wyjściowego FiO2 (t2). Były to: temperatura ciała, tętno (HR), średnie ciśnienie tętnicze (MAP), wysycenie krwi tętniczej tlenem (SaO2), tętnicze ciśnienie parcjalne tlenu (PaO2) i dwutlenku węgla (PaCO2), PaO2/FiO2, pH krwi tętniczej, wodorowęglany, nadmiar zasad) i saturację żył centralnych (ScvO2), gazometrię krwi, mleczany tętnicze, ocenę mikrokrążenia podjęzykowego i utlenowania tkanek. Te same pomiary wykonano w grupie kontrolnej w odstępach 2-godzinnych. Od 24 pacjentów (12 pacjentów na grupę) w każdym punkcie czasowym pobrano próbki krwi tętniczej (10 ml) i natychmiast odwirowano; osocze i surowicę przechowywano w temperaturze -70°C do dalszych analiz. EPO w surowicy, liczbę retikulocytów, hemoglobinę (Hb) i hematokryt mierzono o 8 rano u wszystkich pacjentów w dniu badania, po 24 i 48 godzinach.

Pomiary mikrokrążenia za pomocą obrazowania bocznego strumienia ciemnego pola Mikrokrążenie podjęzykowe oceniano za pomocą wideomikroskopii bocznego strumienia ciemnego pola (SDF) (Microscan, Microvision Medical, Amsterdam, NL). Ta technika została szczegółowo opisana w innym miejscu.

Obrazy niskiej jakości zostały odrzucone, a trzy obrazy dla każdego punktu czasowego zostały wybrane i przeanalizowane za pomocą pakietu oprogramowania komputerowego (Automated Vascular Analysis Software; Microvision Medical BV). Zgodnie z raportem konsensusu dotyczącym wydajności i oceny mikrokrążenia za pomocą obrazowania SDF, całkowita gęstość naczyń (TVD), gęstość naczyń perfundowanych (PVD), wynik De Backera, odsetek naczyń perfundowanych (PPV), wskaźnik przepływu mikrokrążenia (MFI), przepływ wskaźnik niejednorodności (FHI) i prędkość przepływu krwi (BFV) obliczono w małych lub średnich naczyniach (odpowiednio średnica ≤ lub> 20 μm), jak opisano wcześniej. Oprócz nieciągłych pomiarów mikrokrążenia w odstępach 2-godzinnych badacze oceniali wczesną odpowiedź mikrokrążenia na zmiany FiO2 w jednym i tym samym miejscu błony śluzowej podjęzykowej w celu wykrycia nawet niewielkich zmian w gęstości mikrokrążenia i przepływie. Bezpośrednio po uzyskaniu pomiarów z 5 różnych miejsc sondę SDF umieszczono w stabilnej pozycji i manipulowano nią, aby uniknąć artefaktów ciśnienia lub wydzielin zakłócających analizę. Poprzez ręczne podpieranie mikroskopu wykonywano ciągłe nagrywanie wideo przez co najmniej 2 minuty podczas zmian FiO2 (początek lub koniec hiperoksji). Następnie wybrano i przeanalizowano klipy wideo trwające 10 s (2 na punkt czasowy) odpowiadające przed (linia bazowa lub 2 godz. FiO2 1,0) i po (2 min FiO2 1,0 lub 2 min po powrocie do linii podstawowej FiO2) zmienność FiO2.

Ocena utlenowania tkanek obwodowych i reaktywności mikrokrążenia za pomocą spektroskopii w bliskiej podczerwieni.

Spektrofotometria odbiciowa w bliskiej podczerwieni (NIRS) (InSpectra™ Model 650; Hutchinson Technology Inc., Hutchinson, USA) została wykorzystana do pomiaru wysycenia tlenem tkanek obwodowych (StO2) i wskaźnika Hb tkankowego (THI) na początku badania i podczas testu okluzji naczyń ( GŁOSOWANIE). Sondę wielkości 15 mm umieszczono na skórze wyniosłości kłębu, a mankiet sfigmomanometru umieszczono wokół (górnego) ramienia w celu zamknięcia tętnicy ramiennej. Po 3-minutowym okresie stabilizacji sygnału StO2 napływ tętniczy zatrzymywano przez napełnienie mankietu do 50 mmHg powyżej skurczowego ciśnienia tętniczego. Mankiet utrzymywano napompowany, aż StO2 spadło do 40%, a następnie puszczono. StO2 rejestrowano w sposób ciągły podczas fazy reperfuzji aż do stabilizacji. Spadek StO2 (%/minutę) obliczono z linii regresji pierwszej minuty zaniku StO2 po okluzji, dostarczając wskaźnik szybkości zużycia O2. Nachylenie w górę StO2 (%/minutę) uzyskano z linii regresji wzrostu StO2 w fazie reperfuzji. Obliczono również pole pod krzywą (AUC) odpowiedzi przekrwienia. Nachylenie w górę StO2 i AUC StO2 odzwierciedlają reaktywność mikrokrążenia. Wszystkie parametry obliczono przy użyciu pakietu oprogramowania komputerowego (wersja 3.03 InSpectra Analysis Program; Hutchinson Technology Inc.).

Testy immunologiczne:

Poziomy ROS i GSH mierzono zgodnie z zaleceniami producenta.

Analiza statystyczna:

Analizę statystyczną przeprowadzono przy użyciu GraphPad Prism w wersji 6 (GraphPad Software, USA). Normalność rozkładu sprawdzono za pomocą testu Kołmogorowa-Smirnowa. Dane przedstawiono odpowiednio jako średnią ± odchylenie standardowe lub medianę [1-3 kwartyl]. Do oceny zmian w czasie w tej samej grupie zastosowano jednoczynnikową analizę wariancji (ANOVA) dla powtarzanych pomiarów z testem post-hoc Bonferroniego lub testem Friedmana z testem wielokrotnych porównań Dunna. W stosownych przypadkach do oceny różnic między dwiema grupami zastosowano dwukierunkową ANOVA dla powtarzanych pomiarów z testem post-hoc Bonferroniego. W przypadku zmiennych o rozkładzie innym niż normalny zastosowano test U Manna-Whitneya, aby ocenić różnicę między dwiema grupami w tym samym punkcie czasowym. W celu oceny korelacji między zmiennymi obliczono współczynnik korelacji Spearmana. Poziom istotności alfa ustalono a priori na 0,05.