重症患者における高酸素症、赤血球生成および微小循環

介入:

合計で40人の患者が登録されました。 最初の 20 人の患者 (高酸素グループ) は、適用されたプロトコルに従って、2 時間の正常圧高酸素 (FiO2 1.0) を受けました。 他の 20 人の患者 (対照群) には FiO2 の変動は適用されませんでした。 EPO 産生の概日リズムによる変動を最小限に抑えるために、すべての患者を午前中に登録し、午前 10 時から午後 2 時までの時間範囲で高酸素症を実施しました。 研究期間中、鎮静または昇圧剤の投与量に変更はありませんでした。

測定:

試験当日、ベースライン (t0)、FiO2 が 1.0 未満 (t1)、ベースライン FiO2 に戻った後 (t2) の 2 時間間隔で測定を行いました。 これらには、体温、心拍数 (HR)、平均動脈圧 (MAP)、動脈血酸素飽和度 (SaO2)、酸素分圧 (PaO2) および二酸化炭素 (PaCO2)、PaO2/FiO2、動脈血 pH、重炭酸塩、塩基過剰) および中心静脈飽和度 (ScvO2) 血液ガス、動脈乳酸、舌下微小循環および組織酸素化の評価。 対照群でも同じ測定を 2 時間間隔で行った。 24 人の患者 (1 グループあたり 12 人の患者) で、各時点で動脈血サンプル (10 mL) が採取され、すぐに遠心分離されました。血漿と血清は、その後の分析のために-70°Cで保存されました。 血清 EPO、網状赤血球数、ヘモグロビン (Hb)、およびヘマトクリットは、研究日の午前 8 時、24 時間および 48 時間にすべての患者で測定されました。

サイドストリーム暗視野イメージングによる微小循環測定 舌下微小循環は、サイドストリーム暗視野（SDF）ビデオ顕微鏡（Microscan、Microvision Medical、オランダ、アムステルダム）で評価されました。 この手法は、他の場所で詳細に説明されています。

低品質の画像は破棄され、各時点で 3 つの画像が選択され、コンピューター ソフトウェア パッケージ (自動血管解析ソフトウェア; Microvision Medical BV) を使用して解析されました。 SDF イメージングを使用した微小循環のパフォーマンスと評価に関するコンセンサス レポートによると、総血管密度 (TVD)、灌流血管密度 (PVD)、De Backer スコア、灌流血管の割合 (PPV)、微小循環フロー インデックス (MFI)、流量前述のように、不均一性指数（FHI）と血流速度（BFV）は、小血管または中血管（それぞれ直径≤または> 20μm）で計算されました。 2 時間間隔での不連続な微小血管測定に加えて、研究者は、微小血管の密度と流量のわずかな変化を検出するために、舌下粘膜の 1 つの同じ部位での FiO2 の変動に対する微小循環の初期応答を評価しました。 5 つの異なる部位から測定値を取得した直後に、SDF プローブを安定した位置に配置し、分析を妨げる圧力アーチファクトや分泌物を回避するように操作しました。 顕微鏡を手動で支えることにより、FiO2 の変動中 (高酸素症の開始または終了) に少なくとも 2 分間、連続ビデオ録画が実行されました。 続いて、FiO2 の変動の前 (ベースラインまたは 2 時間 FiO2 1.0) および後 (2 分 FiO2 1.0 またはベースライン FiO2 に戻ってから 2 分) に対応する 10 秒 (時点ごとに 2 つ) のビデオ クリップを選択して分析しました。

近赤外分光法による末梢組織の酸素化と微小血管反応性の評価。

近赤外反射分光測光法 (NIRS) (InSpectra™ モデル 650; Hutchinson Technology Inc.、Hutchinson、USA) を使用して、ベースライン時および血管閉塞試験中に末梢組織酸素飽和度 (StO2) および組織 Hb 指数 (THI) を測定しました ( VOT）。 15 mm サイズのプローブを母指球隆起の皮膚に配置し、血圧計のカフを (上) 腕の周りに配置して上腕動脈を閉塞しました。 StO2 信号が 3 分間安定した後、カフを収縮期動脈圧より 50 mmHg 高くすることで、動脈の流入を止めました。 StO2 が 40% に減少するまでカフを膨らませたままにし、その後解放しました。 StO2 は、安定するまで再灌流段階で継続的に記録されました。 StO2 下降勾配 (%/分) は、閉塞後の StO2 減衰の最初の 1 分間の回帰直線から計算され、O2 消費率の指標を提供します。 StO2 アップスロープ (%/分) は、再灌流期の StO2 増加の回帰直線から得られました。 充血反応の曲線下面積(AUC)も計算した。 StO2 アップスロープと StO2 の AUC は、微小血管の反応性を反映しています。 すべてのパラメーターは、コンピューター ソフトウェア パッケージ (バージョン 3.03 InSpectra Analysis Program; Hutchinson Technology Inc.) を使用して計算されました。

免疫学的検査 ：

ROSおよびGSHのレベルは、製造元の指示に従って測定されました。

統計分析：

統計分析は、GraphPad Prism バージョン 6 (GraphPad Software、米国) を使用して実行されました。 分布の正規性は、コルモゴロフ-スミルノフ検定を使用してチェックされました。 データは、必要に応じて平均 ± 標準偏差または中央値 [第 1 ～第 3 四分位数] として提示されました。 ボンフェローニ事後検定による反復測定またはダンの多重比較検定によるフリードマン検定の一元配置分散分析 (ANOVA) を使用して、同じグループの経時変化を評価しました。 該当する場合、ボンフェローニ事後検定による反復測定の双方向 ANOVA を使用して、2 つのグループ間の差異を評価しました。 非正規分布変数については、マンホイットニーの U 検定を適用して、同じ時点での 2 つのグループ間の差を評価しました。 変数間の相関を評価するために、スピアマン相関係数が計算されました。 有意水準のアルファは、アプリオリに 0.05 に設定されました。