Wartość prognostyczna mitochondrialnego DNA i cytochromu C w osoczu po zatrzymaniu krążenia

Tło naukowe

Zatrzymanie krążenia jest jedną z głównych przyczyn zgonów w krajach rozwiniętych. Przeżycie waha się między 15 a 22%. Pacjenci, którzy przeżyli zatrzymanie krążenia, mogą mieć znaczne zaburzenia neurologiczne. Żadna z obecnie dostępnych metod diagnostycznych nie jest w stanie wykryć następstw neurologicznych we wczesnym okresie poresuscytacyjnym. Biomarkery (NSE – enolaza swoista dla neuronów, białko S100, GFAP – kwaśne białko fibrylarne gleju), badania obrazowe (tomografia komputerowa, rezonans magnetyczny) oraz badania czynnościowe (EEG – elektroencefalografia, SSEP – somatosensoryczne potencjały wywołane) wykazały jedynie ograniczoną wartość prognostyczną w przewidywaniu przeżycia z dobrym wynikiem neurologicznym po zatrzymaniu krążenia.

Uszkodzenie mitochondriów jest jednym z kluczowych mechanizmów dysfunkcji poresuscytacyjnych. Podwyższone wartości wzorców molekularnych związanych z uszkodzeniem mitochondriów były już powiązane z najgorszym przeżyciem po zatrzymaniu krążenia i krytycznej chorobie.

Uszkodzenia mitochondriów często prowadzą do śmierci komórek, a wzorce molekularne związane z uszkodzeniami mitochondriów są uwalniane do krwioobiegu. Wzorce molekularne związane z uszkodzeniem mitochondriów, które można wykryć w surowicy lub osoczu, to: mitochondrialne DNA, mitochondrialny czynnik transkrypcyjny A, peptydy N-formylowe, bursztynian, kardiolipina, cytochrom C...

Dzięki bardziej czułej metodzie wczesnego neuroprognostyki po zatrzymaniu krążenia ograniczone zasoby medyczne mogłyby być efektywniej wykorzystane u pacjentów z szansą na dobry powrót do zdrowia neurologicznego.

Cel badania

Celem pracy jest zbadanie roli wzorców molekularnych związanych z uszkodzeniem mitochondriów u pacjentów po zatrzymaniu krążenia.

1. Określenie prawidłowych wartości w osoczu wzorców molekularnych związanych z uszkodzeniem mitochondriów w zdrowej populacji.
2. Porównaj aktualne procedury prognostyczne poresuscytacyjnych uszkodzeń neurologicznych z wartością prognostyczną mitochondrialnego DNA i cytochromu C w osoczu.

Oczekiwane rezultaty

Ze względu na centralną rolę mitochondriów w niedotlenieniowo-niedokrwiennym uszkodzeniu tkanki, oczekuje się, że większe uszkodzenie mitochondriów (mierzone poprzez uwalnianie wzorców molekularnych związanych z uszkodzeniem mitochondriów) będzie miało bezpośrednią korelację z zakresem uszkodzenia tkanki (również neurologicznego). Obecnie publikowane dane wskazują, że pacjenci z wyższymi poziomami mitochondrialnego DNA w osoczu po zatrzymaniu krążenia mają wyższą śmiertelność. Korelacja wzorców molekularnych związanych z uszkodzeniem mitochondriów z zakresem uszkodzeń neurologicznych u osób, które przeżyły zatrzymanie krążenia, nie była jeszcze badana.

Metody

1. Pomiar wzorców molekularnych związanych z uszkodzeniami mitochondriów w zdrowej populacji (mitochondrialne DNA i cytochrom C).
2. Określenie profilu uwalniania mitochondrialnego DNA i cytochromu C u osób, które przeżyły zatrzymanie krążenia oraz ustalenie najlepszego czasu pobrania próbki.
3. Obliczanie wartości predykcyjnej dla przeżycia zatrzymania krążenia z dobrym wynikiem neurologicznym dla mitochondrialnego DNA i cytochromu C.

Wzorce molekularne związane z uszkodzeniem mitochondriów będą mierzone w próbkach osocza. Mitochondrialne DNA będzie mierzone metodą PCR. Cytochrom C będzie mierzony za pomocą testu ELISA.