Colangióides para definir os fatores genéticos envolvidos na colangite esclerosante primária atípica (CILIA)

A colangite esclerosante primária (PSC) é uma doença rara, progressiva e muitas vezes fatal dos ductos biliar intra -hepáticos ou extra -hepáticos, com uma prevalência estimada em países ocidentais de 1/10.000. A doença biliar no PSC é representada pela colestase, inflamação crônica dos ductos biliares, os pequenos tubos através dos quais passa biliar, fibrose concêntrica progressiva ao redor dos ductos biliar2. Isso resulta em uma obstrução à passagem da bile, o que pode levar ao desenvolvimento de cirrose com complicações relacionadas à hipertensão portal, colangite e geralmente progride para o câncer de ducto biliar (colangiocarcinoma). A única terapia curativa em pacientes com PSC é o transplante de fígado, uma vez que nenhum medicamento demonstrou ser eficaz na prevenção da progressão da doença. A etiologia é provavelmente imune-mediada por multifatorial, onde o início do PSC é desencadeado por fatores ambientais em um host2genome em todo o Host2Genome em todo o Host (GWAS) identificou variações no complexo de antígeno de leucócitos humanos (HLA) no cromossomo 6 e em vários outros loci, mas apenas um pequeno parto, mas apenas um pequeno parto, mas apenas um pequeno parto, mas apenas um pequeno complexo de parto. Na maioria dos casos, o PSC ocorre em homens de 30 e 40 anos com doença inflamatória intestinal (DII), sugerindo um papel fundamental da permeabilidade intestinal alterada e inflamação. No entanto, aproximadamente 30% dos pacientes não apresentam inflamação colônica, o que é consistente com a heterogeneidade da doença. Os dados preliminares obtidos em nosso laboratório analisando uma coorte de indivíduos italianos com PSC atípico (APSC), identificaram um enriquecimento sugestivo de variantes raras em genes envolvidos na morfogênese dos cílios (CEP120 e AHI1). Esses dados são consistentes com os achados anteriores, mostrando a correlação entre as variantes de genes envolvidas nas ciliopatias, incluindo o gene DCDC26 e distúrbios colestáticos crônicos que podem imitar o PSC. Cilias primárias são organelas presentes na membrana externa das células ductais, chamadas colangiócitos. Essas organelas funcionam como antenas que detectam estímulos da bile e transmitem informações às células, regulando várias vias de sinalização envolvidas na secreção, proliferação e apoptose. Portanto, a alteração dos cílios primários desempenha um papel importante na diferenciação de colangiócitos e, portanto, no desenvolvimento de colangiopatias, na invasão de células inflamatórias e no processo fibrótico. No entanto, até o momento se sabe pouco sobre a contribuição das variantes genéticas para a gravidade e progressão do PSC, talvez também devido à falta de um modelo confiável de ducto biliar. Recentemente, as culturas de células tridimensionais, chamadas organoides, foram propostas como uma ferramenta revolucionária no campo da biologia celular, pois são capazes de imitar o órgão correspondente in vivo. Os organóides podem ser derivados de células-tronco pluripotentes induzidas (iPSCs) ou células-tronco adultos residentes em tecidos. Comparados às culturas 2D convencionais e modelos animais, os organoides permitem reproduzir o fundo genético do paciente no modelo, recapitulando estruturas e funções in vitro semelhantes aos tecidos in vivo. Por esse motivo, os organoides foram explorados em diferentes aplicações, incluindo descoberta e teste de medicamentos, medicina de precisão e terapia celular 9311. No entanto, os organoides ainda mostram várias limitações para modelar doenças hepáticas. De fato, eles são capazes de recapitular o componente epitelial hepático, colangiócitos e/ou hepatócitos e, acima de tudo, não têm o microambiente hepático em 3D, como células estromais e imunes, que desempenham um papel importante na patogênese de várias doenças fígado. O presente estudo faz parte de um projeto financiado pela Fundação Regional de Pesquisa Biomédica (FRRB) cujo objetivo geral é gerar modelos tridimensionais de colangite esclerosante primária (PSC), denominada Assemblylóides, e estudar os mecanismos celulares e moleculares através das variantes genéticas associadas a pós envolvidas. Nossa hipótese é que a perda de função dos cílios em colangiócitos pode representar uma ligação entre senescência celular, desenvolvimento de inflamação, fibrose e, finalmente, câncer de fígado. As variantes relacionadas a ciliopatias podem levar a uma maturação incompleta de colangiócitos com conseqüente mau funcionamento que pode, portanto, levar a uma inflamação crônica de células ductais e, portanto, a uma ativação persistente e descontrolada de células estromais e infiltração de células imunes. Além disso, a geração de Lonóides de Assembléia capaz de reproduzir o tecido nativo o mais fiel possível fornecerá um novo modelo in vitro para testar novas abordagens farmacológicas destinadas a corrigir mutações genéticas para melhorar a medicina de precisão.