Окислительно-восстановительный дисбаланс и развитие муковисцидозного диабета (Redoxy)

Цель 1: Будут оцениваться три группы субъектов: 1. 27 детей с муковисцидозом с мутациями класса I-III в возрасте от 1 до 9 лет с нормальной толерантностью к глюкозе (НГТ), 2. 27 контрольных детей того же возраста с НГТ и 3. 15 детей с муковисцидозом. дети с мутациями трансмембранного регулятора проводимости (CFTR) МВ класса IV-VI в возрасте от 1 до 9 лет. После получения информированного согласия родителей субъекты будут подвергаться ночному голоданию без еды и питья, кроме воды, в течение 10 часов. Детей попросят воздержаться от приема всех бронходилататоров короткого действия до начала исследовательского визита и воздержаться от приема всех бронходилататоров длительного действия как минимум за десять часов до начала исследовательского визита. Перед ознакомительным визитом родителям будет выдан трехдневный дневник питания, в котором они будут подробно записывать все, что каждый ребенок потребляет в течение периода записи. Подробная информация включает количество продуктов питания или напитков и торговые марки, а также дозу заместительной терапии ферментами поджелудочной железы (PERT), вводимую с каждым приемом пищи или закуской. Период записи будет включать два рабочих дня и один выходной день. Детям установят внутривенный (IV) катетер и возьмут кровь для измерения уровня глюкозы в плазме, инсулина и окислительно-восстановительного состояния цистеина (CyS)/цистина (CySS). Затем ребенку дадут от 1,75 г/кг до максимум 75 г перорального раствора глюкозы для питья и научат пить его в течение 10 минут. Кровь будет взята через 30 минут после приема глюкозы для повторных измерений уровня глюкозы, инсулина и редокс-статуса. Кровь будет взята через 2 часа после приема глюкозы для повторных измерений уровня глюкозы, инсулина и редокс-статуса. Субъектам, заполнившим протокол, будет предложено дать повторное согласие и ежегодно повторять протокол, чтобы отслеживать их уровень непереносимости глюкозы и следить за переходом в диабет CF. У дееспособных детей конденсат выдыхаемого воздуха (КВВ) также будет собираться перед пероральным тестом на толерантность к глюкозе (ОГТТ) и сразу после завершения 2-часового забора крови. EBC будет проанализирован на окислительно-восстановительное взаимодействие Cys/CySS.

Цель 2a. Сорок четыре субъекта с муковисцидозом в возрасте 12 лет и старше с НГТ или нарушением уровня глюкозы будут проходить провокационную пробу с приемом пищи, половина из которых будет рандомизирована для получения тестовой пищи с высоким гликемическим индексом, а половина — с низким индексом. Субъекты будут голодать в течение ночи в течение 10 часов, не принимая ничего, кроме воды. Субъекты будут проинструктированы воздержаться от приема всех бронходилататоров короткого действия как минимум за четыре часа до начала исследовательского визита и воздержаться от приема всех бронходилататоров длительного действия как минимум за десять часов до начала исследовательского визита. После информированного согласия участники сначала пройдут непрямую калориметрию для определения скорости метаболизма в состоянии покоя и окисления субстрата; это произойдет только у участников 16 лет и старше. Затем будет вставлена ​​внутривенная линия (IV); и датчик iPro, установленный для непрерывного мониторинга уровня глюкозы (CGM); размещение CGM будет необязательным, поскольку наш опыт работы с этим протоколом показывает, что некоторые пациенты с муковисцидозом не будут добровольно ставить CGM, но будут делать внутривенное введение. Если датчик iPro вставлен; он должен находиться на месте как минимум за 60 минут до исходного забора крови, чтобы сенсорное устройство iPro точно определяло уровень интерстициальной глюкозы. Кровь будет взята для измерения глюкозы, инсулина, окислительно-восстановительного статуса Cys / CySS, ацилкарнитина, общего карнитина, протеомного и метаболического анализа у субъектов старше 16 лет. У субъектов в возрасте от 12 до 15 лет будет взята кровь для измерения уровня глюкозы, инсулина, окислительно-восстановительного статуса Cys/CySS и протеомики. Затем субъекту будет предложено съесть один из двух тестовых приемов пищи за десять минут. Субъекты должны закончить трапезу. Питание будет изокалорийным завтраком, при этом один прием пищи будет иметь высокий гликемический индекс, а другой — низкий. Питательный состав каждого приема пищи будет составлять 10 ккал на кг, 50% ккал из углеводов, 20% ккал из белков и 30% ккал из жиров. Кровь будет взята для повторных измерений уровня глюкозы, инсулина, окислительно-восстановительного состояния CyS/CySS через 1, 2 и 3 часа после тестового приема пищи у всех субъектов. Кровь для протеомики будет взята на исходном уровне и через 3 часа у всех субъектов. Дополнительная кровь будет взята на исходном уровне и через 2 часа после еды для измерения ацилкарнитина, общего карнитина, а также метаболических показателей и биомаркеров, связанных с метаболизмом жирных кислот, у субъектов в возрасте 16 лет и старше. После 3-часового забора крови внутривенный катетер и датчик iPro, если они установлены, будут прекращены. По завершении 3-часового забора крови для анализа состава тела будет проведено двухэнергетическое рентгеновское абсорбциометрическое сканирование всего тела (DEXA); этот тест будет проводиться только для субъектов в возрасте 16 лет и старше. Участникам женского пола необходимо будет пройти тест мочи на беременность перед сканированием DEXA, чтобы подтвердить отсутствие беременности. Если тест мочи на беременность участницы покажет положительный результат, сканирование DEXA не будет завершено. После сканирования DEXA субъект будет выписан домой. Перед исследовательским визитом участникам 16 лет и старше будет дано указание заполнить 3-дневную запись о еде для оценки обычного пищевого рациона в рамках их стандартного ухода за CF.

Цель 2б. Сорок четыре субъекта с муковисцидозом в возрасте 12 лет и старше с НГТ или нарушением уровня глюкозы сначала будут подвергнуты контрольной пробе с напитком с использованием тестовой газированной воды, содержащей 60% фруктозы и 40% глюкозы, или фруктового сока, содержащего комбинацию фруктозы, глюкозы и сахарозы. в дозе 1,75 г на килограмм массы тела до максимум 75 г. Через одну-четыре недели у всех испытуемых будет ПГТТ, то есть пероральный прием раствора глюкозы в дозе от 1,75 грамма на килограмм до максимальной дозы 75 граммов. Из 44 испытуемых, выпивавших тестируемый напиток, 22 будут принимать содовую, а 22 — фруктовый сок. Субъекты будут проинструктированы воздержаться от приема всех бронходилататоров короткого действия как минимум за четыре часа до начала исследовательского визита и воздержаться от приема всех бронходилататоров длительного действия как минимум за десять часов до начала исследовательского визита. После получения информированного согласия участникам будет вставлена ​​внутривенная линия (IV). Кровь будет взята для измерения уровня глюкозы, инсулина и окислительно-восстановительного статуса Cys/CySS на исходном уровне или в нулевые минуты. Затем субъекту будет предложено выпить тестовый напиток, либо тестовую газировку, либо фруктовый сок, за десять минут, приготовленный исследователем-биодиетологом. Повторные образцы крови будут взяты для измерения уровня глюкозы, инсулина и окислительно-восстановительного состояния CyS/CySS через ½ часа, 1 час и 2 часа после первоначального употребления тестируемого напитка. Во время исследовательского визита будет введена анкета по потреблению напитков, чтобы оценить общее потребление пациентом подслащенных напитков. По завершении визита участнику будет назначен следующий визит через одну-четыре недели для повторного тестирования с использованием тех же рекомендаций, что и выше, но в качестве тестового напитка будет использоваться раствор глюкозы (глюкола), используемый для стандартного ПГТТ. 75-граммовый напиток с глюкозой будет использоваться для тестирования; вводимая доза будет определяться путем умножения веса пациента на 1,75 грамма; вводимая доза не должна превышать 75 граммов. Субъекты должны выпить весь напиток. Образцы крови будут взяты на исходном уровне (до приема глюкозы), а затем будут взяты повторные образцы крови для измерения уровня глюкозы, инсулина и окислительно-восстановительного состояния CyS/CySS через ½ часа, 1 час и 2 часа после первоначального употребления напитка с глюкозой. . Установка непрерывного монитора глюкозы не является обязательной во время контрольной пробы с напитком и окислительно-восстановительного ПГТТ.