人类对臭氧引起的气道炎症的遗传易感性 (GARBOZ)

痰液评估日：体检后符合要求的健康状况的受试者将收到一份口头和书面说明，说明所有实验程序及其参与可能涉及的风险。 所有受试者都需要提供书面知情同意书才能参与研究。 还将确定受试者产生足够的诱导痰样本的能力。 因此，将要求受试者在吸入高渗盐水（3%、4% 和 5%）后产生痰液。 每个样本的受试者应该能够产生至少 50 mg 的痰（选定的痰）。 每个痰样必须包含至少 100,000 个细胞的总细胞计数、含有少于 40% 鳞状上皮细胞的分类细胞计数和至少 50% 的细胞活力，从而最大限度地减少细胞回收和鳞状细胞污染的变异性。 然后，将安排有效痰液产生者参加培训课程。 如果无法进行充分的肺功能测试，受试者仍可能被排除在研究之外。

培训课程：培训课程将在暴露前不少于 2 天进行

• 肺功能测试，包括肺活量测定法和体积描记法（体盒测量）。
• 臭氧暴露室简介。
• 有关如何使用跑步机的说明，包括每分钟通气量测量以达到研究所需的运动水平。
• 一氧化氮测量 - 这测量呼出空气中存在的一氧化氮 (NO) 的量。 上呼吸道感染期间患有急性炎症的正常人可能会发现呼出空气中 NO 浓度增加，并且与过敏性鼻炎患者的症状有关。 因此，测量呼出气体中的 NO 浓度可能有助于间接评估气道炎症。 肺中 NO 的产生将通过收集呼出气体样本来测量。 通过将 NO 分析仪采样管连接到一个鼻孔，另一个鼻孔对环境空气开放，直接测量鼻腔产生的 NO。 在鼻腔测量期间，受试者将通过纸板、带有阻力的一次性管呼气，以关闭上颚并防止鼻腔样本受到污染。 整个过程应在 15 分钟内完成。

暴露和测试方案：到达实验室后，医务人员将确定受试者的临床健康状况，包括基线心率、血压、呼吸系统症状（呼吸音）评估和一般健康状况。 所有女性受试者都需要提供月经周期史，并且需要尿液样本进行妊娠试验。 每次验孕棒的有效期为 7 天。 如果受试者超过先前设定的限制，测试将被推迟。

0.4 ppm 臭氧暴露将在臭氧暴露室中进行。 每个受试者将暴露在臭氧中 2 小时。 在暴露期间，受试者将在跑步机上进行四次 15 分钟的适度运动（每分钟通气量或 VE = 30·40 L/min），每次间隔 15 分钟的坐姿休息。 暴露前后，将评估肺功能和呼吸音是否有任何支气管收缩迹象。 静脉穿刺（如上所述）将在暴露之前进行。 在每个锻炼期间将获得心肺功能的测量值。

暴露于臭氧后大约 4-6 小时，将进行静脉穿刺。 受试者将使用雾化吸入的高渗盐水（3%、4% 和 5%）执行上述痰诱导程序。 在离开实验室之前，受试者将继续接受医疗监督，直到肺功能（肺量计）恢复到暴露前基线值的 5% 以内。 臭氧暴露后大约 24 小时，除了静脉血样外，受试者将返回实验室进行肺功能测试和痰液诱导。

在每个时间点（暴露前和暴露后，以及暴露后 24 小时），血液将从前臂的静脉抽取到临床实验室试管中。 在其中一次抽血期间，将抽取额外的 5ml 用于基因分型。 血浆将从 4 ml 中分离出来并冷冻在 70 摄氏度下，用于未来分析感兴趣的介质，例如细胞因子，以及臭氧的其他全身效应。 剩余血液将通过全血化验评估炎症和免疫激活标志物（CD11b、CD14、CD64、CD16、HLA-DR、CD45、CD3、CD80、CD86）和功能（吞噬作用和氧化爆发），通过两种颜色流流式细胞术。 将从痰炎性细胞中提取 RNA 用于微阵列分析。

在参与过程中，所有主题都将被要求弃权；摄入维生素 C 和 E、阿司匹林或任何其他抗炎药物、接触香烟烟雾或其他刺激物。 此外，受试者将被要求在痰液诱导前 2 小时禁食。 他们将被要求在培训日和暴露后日到达研究实验室 NPO x 2 小时，并在暴露日的午餐时间允许 2 小时 NPO 要求。