Genetisk mottakelighet FOR Ozon-indusert luftveisbetennelse hos mennesker (GARBOZ)

Sputumvurderingsdag: Personer som oppfyller den nødvendige helsestatusen etter den medisinske screeningen vil få en muntlig og skriftlig beskrivelse av alle eksperimentelle prosedyrer og mulige risikoer forbundet med deres deltakelse. Alle forsøkspersoner vil bli pålagt å gi skriftlig informert samtykke for å delta i studien. Evnen til forsøkspersonene til å produsere tilstrekkelige induserte sputumprøver vil også bli bestemt. Derfor vil forsøkspersonene bli bedt om å produsere sputum etter inhalering av hypertonisk saltvann (3, 4 og 5%). Forsøkspersonene skal kunne produsere minst 50 mg sputum (valgt plugg) per prøve. Hver sputumprøve må inneholde et totalt celletall på minst 100 000 celler, et differensielt celletall som inneholder mindre enn 40 % plateepitelceller, og cellelevedyktighet på minst 50 %, og dermed minimere variasjonen i cellegjenvinning og plateepitelforurensning. Emner som er effektive oppspyttprodusenter vil da bli satt opp til en treningsøkt. Forsøkspersoner kan fortsatt ekskluderes fra studien hvis de ikke er i stand til å utføre tilstrekkelige lungefunksjonstester.

Treningsøkt: Treningsøkten vil finne sted ikke mindre enn 2 dager før eksponering

• Lungefunksjonstester, inkludert spirometri og pletysmografi (kroppsboksmålinger).
• Introduksjon til ozoneksponeringskammeret.
• Instruksjoner om hvordan du bruker tredemøllen, inkludert en minutts ventilasjonsmåling for å nå treningsnivået som kreves for studien.
• Nitrogenoksidmåling - dette måler mengden nitrogenoksid (NO) som finnes i utåndet luft. En økt konsentrasjon av NO i utåndet luft kan finnes hos normale personer med akutt betennelse ved øvre luftveisinfeksjoner og i forbindelse med symptomer hos pasienter med allergisk rhinitt. Dermed kan måling av konsentrasjonen av NO i utåndingsluft være nyttig som en indirekte vurdering av luftveisbetennelse. Lungeproduksjonen av NO vil bli målt ved å ta en prøve av utåndet gass. Neseproduksjonen av NO vil bli målt direkte ved å koble en NO-analysator prøvetakingsledning til det ene neseboret med det andre neseboret åpent for omgivelsesluften. Under nesemålingen vil forsøkspersonen puste ut gjennom et engangsrør av papp med motstand for å lukke ganen og forhindre kontaminering av neseprøven med. Hele prosedyren bør fullføres på mindre enn 15 minutter.

Eksponerings- og testprotokoll: Ved ankomst til laboratoriet vil forsøkspersonens kliniske helsestatus bli konstatert av medisinsk personell, inkludert baseline hjertefrekvens, blodtrykk, evaluering av luftveissymptomer (pustelyder) og generell helse. Alle kvinnelige forsøkspersoner vil bli pålagt å oppgi en menstruasjonssyklushistorie og en urinprøve vil være nødvendig for graviditetstesting. Hver graviditetstest regnes som gyldig i 7 dager. Testing vil bli utsatt dersom et emne overskrider tidligere fastsatte grenser.

Ozoneksponeringen på 0,4 ppm vil bli utført i et ozoneksponeringskammer. Hvert forsøksperson vil bli eksponert for ozon i 2 timer. Under eksponeringen vil forsøkspersonene utføre fire 15-minutters anfall med moderat trening (minuttventilasjon eller VE = 30 40 L/min) på en tredemølle, hver atskilt med 15 minutters sittende hvile. Før og etter eksponering vil lungefunksjon og pustelyder bli vurdert for eventuelle tegn på bronkial innsnevring. Venepunktur (som nevnt ovenfor) vil skje før eksponering. Målinger av kardiorespiratorisk ytelse vil bli innhentet under hver treningsperiode.

Omtrent 4-6 timer etter ozoneksponering vil det forekomme venepunktur. Forsøkspersonene vil utføre sputuminduksjonsprosedyrene beskrevet ovenfor med nebulisert inhalert hypertonisk saltvann (3, 4 og 5%). Pasienten vil forbli under medisinsk tilsyn inntil lungefunksjonen (spirometri) kommer tilbake til innenfor 5 % av baselineverdiene før eksponering før de forlater laboratoriet. Omtrent 24 timer etter ozoneksponeringen vil forsøkspersonene returnere til laboratoriet for lungefunksjonstesting og sputuminduksjon, i tillegg til en venøs blodprøve.

Ved hvert tidspunkt (før og etter eksponering, og 24 timer etter eksponering), vil blod trekkes fra venen i underarmen til kliniske laboratorierør. Under en av disse blodprøvene vil de ekstra 5 ml bli trukket for genotyping. Plasma vil bli separert fra 4 ml og frosset ved 70 grader C for fremtidig analyse av mediatorer av interesse, som cytokiner, samt andre systemiske effekter av ozon. Det gjenværende blodet vil bli vurdert ved fullblodsanalyser for markører for inflammatorisk og immunaktivering (CD11b, CD14, CD64, CD16, HLA-DR, CD45, CD3, CD80, CD86) og funksjon (fagocytose og oksidativt utbrudd) ved tofarget strømning cytometri. RNA vil bli ekstrahert fra sputum inflammatoriske celler for mikroarray-analyse.

I løpet av deltakelsen vil alle fag være pålagt å avstå fra; inntak av vitamin C og E, aspirin eller andre anti-inflammatoriske medisiner, eksponering for sigarettrøyk eller andre irriterende stoffer. I tillegg vil forsøkspersonene bli bedt om å ikke ha noe gjennom munnen i 2 timer før sputuminduksjon. De vil bli bedt om å ankomme forskningslaboratoriet NPO x 2 timer på treningsdagen og etter eksponeringsdagen, og vil spise lunsj på eksponeringsdagen på et tidspunkt som tillater 2 timers NPO-kravet.