인간의 오존 유발 기도 염증에 대한 유전적 감수성 (GARBOZ)

가래 평가일: 의료 검진 후 필요한 건강 상태를 충족하는 피험자는 모든 실험 절차 및 참여와 관련된 가능한 위험에 대한 구두 및 서면 설명을 제공받습니다. 모든 피험자는 연구 참여에 대한 서면 동의서를 제공해야 합니다. 적절한 유도 가래 샘플을 생성하는 피험자의 능력도 결정됩니다. 따라서 피험자는 고장 식염수(3, 4 및 5%)를 흡입한 후 가래를 생성하도록 요청받을 것입니다. 피험자는 샘플당 최소 50mg의 객담(선택된 마개)을 생성할 수 있어야 합니다. 각 객담 샘플은 최소 100,000개 세포의 총 세포 수, 40% 미만의 편평 상피 세포를 포함하는 차등 세포 수 및 최소 50%의 세포 생존율을 포함해야 하므로 세포 회수 및 편평 세포 오염의 변동성을 최소화해야 합니다. 효과적인 객담 생산자인 피험자는 교육 세션을 위해 일정을 잡습니다. 적절한 폐 기능 테스트를 수행할 수 없는 경우 피험자는 여전히 연구에서 제외될 수 있습니다.

교육 세션: 교육 세션은 노출 최소 2일 전에 진행됩니다.

• 폐활량 측정법 및 체적 측정법(바디 박스 측정)을 포함한 폐 기능 검사.
• 오존 노출 챔버 소개.
• 학습에 필요한 운동 수준에 도달하기 위한 분당 환기 측정을 포함하여 런닝머신 사용 방법에 대한 지침.
• 산화질소 측정 - 호기 중에 존재하는 산화질소(NO)의 양을 측정합니다. 내쉬는 공기에서 증가된 NO 농도는 상기도 감염 동안 급성 염증이 있는 정상인에서 발견될 수 있으며 알레르기성 비염 환자의 증상과 관련됩니다. 따라서 호기 내 NO 농도 측정은 기도 염증의 간접적인 평가로 유용할 수 있습니다. NO의 폐 생성은 내쉬는 가스 샘플을 수집하여 측정합니다. NO의 비강 생산은 NO 분석기 샘플링 라인을 한쪽 콧구멍에 연결하고 다른 콧구멍은 주변 공기에 개방하여 직접 측정합니다. 비강 측정 중에 대상자는 입천장을 닫고 비강 샘플의 오염을 방지하기 위해 저항이 있는 판지 일회용 튜브를 통해 숨을 내쉴 것입니다. 전체 절차는 15분 이내에 완료되어야 합니다.

노출 및 테스트 프로토콜: 실험실에 도착하면 기준 심박수, 혈압, 호흡기 증상 평가(호흡음) 및 일반 건강을 포함하여 피험자의 임상 건강 상태가 의료진에 의해 확인됩니다. 모든 여성 피험자는 월경 주기 기록을 제공해야 하며 임신 테스트를 위해 소변 샘플이 필요합니다. 각 임신 테스트는 7일 동안 유효한 것으로 간주됩니다. 피험자가 이전에 설정된 제한을 초과하면 테스트가 연기됩니다.

0.4ppm 오존 노출은 오존 노출 챔버에서 수행됩니다. 각 피험자는 2시간 동안 오존에 노출됩니다. 노출 동안 피험자는 러닝머신에서 15분 동안 중간 정도의 운동(분 환기 또는 VE = 30 40 L/min)을 4번 수행하며, 각각 15분 동안 앉은 상태에서 휴식을 취합니다. 노출 전후에 기관지 수축 징후에 대해 폐 기능과 호흡음을 평가합니다. Venipuncture(위에서 언급한 대로)는 노출 전에 발생합니다. 각 운동 기간 동안 심폐 성능 측정이 이루어집니다.

오존 노출 후 약 4-6시간 후에 정맥 천자가 발생합니다. 피험자는 분무된 흡입 고장 식염수(3, 4 및 5%)를 사용하여 위에서 설명한 가래 유도 절차를 수행합니다. 피험자는 실험실을 떠나기 전에 폐 기능(폐활량계)이 사전 노출 기준 값의 5% 이내로 돌아올 때까지 의료 감독을 받게 됩니다. 오존 노출 후 약 24시간 후 피험자는 정맥 혈액 샘플과 함께 폐 기능 검사 및 가래 유도를 위해 실험실로 돌아갑니다.

각 시점(노출 전후 및 노출 후 24시간)에 혈액을 팔뚝의 정맥에서 임상 실험실 튜브로 채취합니다. 이러한 채혈 중 유전자형 분석을 위해 추가로 5ml를 채혈합니다. 혈장은 4ml에서 분리되어 오존의 다른 전신 효과뿐만 아니라 사이토카인과 같은 관심 있는 매개체의 향후 분석을 위해 70°C에서 동결됩니다. 나머지 혈액은 염증 및 면역 활성화(CD11b, CD14, CD64, CD16, HLA-DR, CD45, CD3, CD80, CD86) 및 기능(식균 작용 및 산화 폭발)의 마커에 대한 전혈 분석으로 평가됩니다. 세포 계측법. 마이크로어레이 분석을 위해 객담 염증 세포에서 RNA를 추출합니다.

참여하는 동안 모든 피험자는 다음을 삼가야 합니다. 비타민 C 및 E, 아스피린 또는 기타 항염증제 섭취, 담배 연기 또는 기타 자극제에 대한 노출. 또한 피험자는 객담 유도 2시간 전에 입으로 아무것도 먹지 않도록 요청받습니다. 교육 당일과 노출 후 2시간 동안 연구실 NPO x 2시간에 도착해야 하며 노출 당일 2시간 NPO 요구 사항을 허용하는 시간에 점심을 먹습니다.