17β-雌二醇对骨骼肌的影响

方法的设计和详细说明 这是一项平行组随机对照试验，对每天服用的 17β-雌二醇 (n=10) 或安慰剂 (n=10) 补充剂设盲，持续 10 天。 将招募 12 名健康年轻男性（年龄：18-25 岁；BMI：22-33 kg/m2）参与这项研究。 在电话或电子邮件对话中，我们将解释研究的目的和实验设计，并解决参与者可能提出的所有问题（参见电话和电子邮件脚本）。 参与者将访问实验室进行筛查，以评估他们是否有资格参与这项研究。 在筛选过程中，我们将首先解释实验设计并获得书面知情同意书。 参与者将完成一份医疗问卷，以评估他们的总体健康状况和药物使用情况。 身高和体重将作为参与者的基线特征进行测量。 将要求参与者填写一份 3 天饮食记录，以评估习惯性能量和蛋白质摄入量。 参与者将被随机分配到 17β-雌二醇 (n=10) 或安慰剂 (n=10) 补充剂组。 将使用计算机化的列表随机化器 (https://www.random.org/lists/) 进行随机化， 参与者将根据随机列表依次分配到一个条件。 实验性试验包括 10 天的 17β-雌二醇（Estrace，Acerus Pharmaceuticals Corporation，Mississauga，ON，加拿大）或安慰剂（400 mg/day Polycose，Abbott Laboratories，St. Laurent，QC，Canada）补充剂，包括 3 天的预固定，单腿固定 7 天。 在固定前三天（t=-3 天），将获取血液样本并评估肌肉力量，然后开始每天补充 17β-雌二醇或安慰剂。 参与者将每天消耗 1 毫克，持续 3 天，每天消耗 3 毫克，持续 7 天，或每天消耗 400 毫克 Polycose，持续 7 天。 雌激素和安慰剂瓶都经过编码，以确保研究人员和参与者完全失明。 将获得额外的血液样本以评估参与者对补充剂的依从性。 此外，在 t=-3 天时，将在摄入 150 mL 氘标记水 (D2O) 之前获取唾液样本。 每日唾液采样将持续到实验试验结束以评估前体池富集。 饮食摄入量将控制 10 天（包括固定前 3 天和固定后 7 天），提供能量均衡的饮食，每天含 1 个重量，平均分配在早餐、午餐和晚餐 (15)。 将指示参与者避免剧烈运动（跑步、快速骑自行车、竞技运动、负重等），并在 7 天单腿固定之前和期间 3 天避免饮酒。 将使用 SenseWear 臂带监测日常活动，受试者需要从 t=-3 天佩戴臂带直至实验结束。

参与者将通过膝盖支撑固定一条腿 (http://www.breg.com/products/knee-bracing/post-op) 因此对侧肢体将作为内部控制。 将以随机平衡的方式选择要固定的腿，以导致相同数量的参与者固定其较弱或较强的腿。 支具 (http://www.breg.com/products/knee-bracing/post-op) 将以 140° 的固定屈曲位置佩戴（即，从完全伸展的 40°），每天取下塑料带以检查压力点，并用定制改良的塑料带重新密封，该塑料带熔化以密封带，正如我们之前所做的那样 19,20。 这样做的原因是，如果不破坏塑料密封，就无法取下支架，但在紧急情况下可能会破裂，如果需要，可能会完全取下支架。 使用这种废用模型，我们发现固定支架耐受性良好，没有限制性，重要的是它不会阻塞腘动脉和/或股动脉血流，而且我们在之前的研究中没有出现水肿或静脉血栓形成的病例。 还将为参与者提供弹性支撑绷带，以降低深静脉血栓形成的风险。

在 t=0 天，将收集血液样本、唾液样本和肌肉活组织检查以评估肌肉蛋白质合成率。 肌肉力量和体积将分别使用 Biodex 和超声检查进行评估。 将放置一个护膝以开始为期 7 天的单腿固定阶段。 用于固定的腿的选择将根据最大等长强度随机和平衡支配。 在固定阶段结束时（t = 7 天），将获取血液样本，从固定和非固定腿上收集肌肉活检，并评估肌肉体积和力量。 在评估双腿的力量后，将进行进一步的肌肉活检，以评估 17β-雌二醇对运动后 3 小时非固定腿和固定腿的单次运动 (Biodex) 肌肉反应的影响回合。