Os efeitos do 17β-estradiol no músculo esquelético

Desenho e descrição detalhada da metodologia Este é um estudo randomizado controlado de grupos paralelos, cego para o suplemento de 17β-estradiol (n=10) ou placebo (n=10) administrado todos os dias durante 10 dias. Doze homens jovens saudáveis ​​(idade: 18-25 anos; IMC: 22-33 kg/m2) serão recrutados para participar deste estudo. Durante as conversas por telefone ou e-mail, explicaremos o objetivo e o desenho experimental do estudo e responderemos a todas as perguntas que os participantes possam ter (consulte os roteiros por telefone e e-mail). Os participantes visitarão o laboratório para uma triagem para avaliar se são elegíveis para participar deste estudo. Durante a triagem, primeiro explicaremos o desenho experimental e obteremos o consentimento informado por escrito. Um questionário médico será preenchido pelos participantes para avaliar sua saúde geral e uso de medicamentos. A altura e a massa corporal serão medidas como características basais dos participantes. Os participantes serão solicitados a preencher um registro alimentar de 3 dias para avaliar a ingestão habitual de energia e proteína. Os participantes serão designados aleatoriamente para o grupo de suplementação de 17β-estradiol (n=10) ou placebo (n=10). A randomização será realizada usando um randomizador de lista computadorizado (https://www.random.org/lists/), e os participantes serão alocados sequencialmente a uma condição de acordo com a lista aleatória. O ensaio experimental é composto por 10 dias de suplementação de 17β-estradiol (Estrace, Acerus Pharmaceuticals Corporation, Mississauga, ON, Canadá) ou placebo (400 mg/dia Polycose, Abbott Laboratories, St. Laurent, QC, Canadá), incluindo 3 dias de pré-imobilização e 7 dias de imobilização unipodal. Três dias antes da imobilização (t=-3 d) uma amostra de sangue será obtida e a força muscular será avaliada antes que a suplementação diária de 17β-estradiol ou placebo seja iniciada. Os participantes consumirão 1 mg/dia por 3 dias e 3 mg/dia por 7 dias de Estrace ou 400 mg/dia de Polycose por 7 dias. Os frascos de estrogênio e placebo são codificados para garantir o cegamento completo tanto para os pesquisadores quanto para os participantes. Amostras de sangue adicionais serão obtidas para avaliar a adesão dos participantes à suplementação. Além disso, em t=-3 d uma amostra de saliva será obtida antes da ingestão de 150 mL de água marcada com deutério (D2O). A amostragem diária de saliva será continuada até o final do ensaio experimental para avaliar os enriquecimentos do pool de precursores. A ingestão dietética será controlada por 10 dias (incluindo 3 d antes da imobilização e 7 d de imobilização), fornecendo uma dieta balanceada em energia contendo 1 peso por dia igualmente distribuído no café da manhã, almoço e jantar (15). Os participantes serão instruídos a abster-se de atividade física de intensidade vigorosa (corrida, ciclismo rápido, esportes competitivos, carregar cargas pesadas, etc.) e abster-se do consumo de álcool por 3 d antes e durante a imobilização unipodal de 7 dias. A atividade diária será monitorada com uma braçadeira SenseWear, que os sujeitos deverão usar de t=-3 d até o final do ensaio experimental.

Os participantes terão uma perna imobilizada por meio de joelheiras (http://www.breg.com/products/knee-bracing/post-op) assim, o membro contralateral atuará como um controle interno. A perna a ser imobilizada será escolhida de forma aleatória contrabalançada para resultar em igual número de participantes com suas pernas mais fracas ou mais fortes sendo imobilizadas. A cinta (http://www.breg.com/products/knee-bracing/post-op) será usado em uma posição de flexão fixa a 140° (ou seja, 40° da extensão total) com uma faixa de plástico que é removida para verificar os pontos de pressão diariamente e selada novamente com uma tira de plástico personalizada que é derretida para selar a tira, como já fizemos anteriormente19,20. A razão para isso é que a órtese não pode ser removida sem quebrar o selo de plástico, mas pode ser quebrada em caso de emergência e a órtese totalmente removida, se necessário. Usando este modelo de desuso, descobrimos que a órtese imobilizadora é bem tolerada, não restritiva e, importantemente, não oclui o fluxo sanguíneo da artéria poplítea e/ou femoral, e não tivemos casos de edema ou trombose venosa em estudos anteriores. Os participantes também receberão bandagens de suporte elástico para diminuir o risco de trombose venosa profunda.

Em t=0 d, serão coletadas amostras de sangue, amostra de saliva e biópsia muscular para avaliação das taxas de síntese proteica muscular. A força e o volume muscular serão avaliados por Biodex e ultrassonografia, respectivamente. Uma joelheira será colocada para iniciar a fase de imobilização de perna única de 7 dias. A escolha da perna para imobilização será randomizada e balanceada para dominância de acordo com a força isométrica máxima. Ao final da fase de imobilização (t=7 d), uma amostra de sangue será obtida, biópsias musculares serão coletadas da perna imobilizada e não imobilizada, e o volume e a força muscular serão avaliados. Após a avaliação da força em ambas as pernas, uma nova biópsia muscular será realizada para avaliar o efeito do 17β-estradiol na resposta muscular a uma única sessão de exercício (Biodex) na perna não imobilizada e imobilizada 3 horas após o exercício ataque.