17β-estradiolin vaikutukset luustolihakseen

Metodologian suunnittelu ja yksityiskohtainen kuvaus Tämä on rinnakkaisten ryhmien satunnaistettu kontrolloitu tutkimus, joka on sokkoutunut 17β-estradioli (n = 10) tai lumelääke (n = 10) lisäravinteeseen, jota annettiin päivittäin 10 päivän ajan. Kaksitoista tervettä nuorta miestä (ikä: 18-25 v; BMI: 22-33 kg/m2) värvätään osallistumaan tähän tutkimukseen. Puhelin- tai sähköpostikeskustelujen aikana selitämme tutkimuksen tarkoituksen ja kokeellisen suunnittelun sekä vastaamme kaikkiin osallistujilla mahdollisesti oleviin kysymyksiin (katso puhelin- ja sähköpostikäsikirjoitukset). Osallistujat vierailevat laboratoriossa seulonnassa arvioidakseen, ovatko he oikeutettuja osallistumaan tähän tutkimukseen. Seulonnan aikana selitämme ensin kokeen suunnittelun ja hankimme kirjallisen tietoisen suostumuksen. Osallistujat täyttävät lääketieteellisen kyselyn arvioidakseen yleistä terveyttään ja lääkkeiden käyttöä. Kehon pituus ja massa mitataan osallistujien perusominaisuuksina. Osallistujia pyydetään täyttämään 3-päiväinen ruokavaliotietue arvioidakseen tavanomaista energian ja proteiinin saantia. Osallistujat jaetaan satunnaisesti 17β-estradiolia (n=10) tai lumelääkettä (n=10) saavaan ryhmään. Satunnaistaminen suoritetaan käyttämällä tietokoneistettua listasatunnaistajaa (https://www.random.org/lists/), ja osallistujat jaetaan peräkkäin satunnaistetun luettelon mukaiseen ehtoon. Kokeellinen koe koostuu 10 päivän 17β-estradiolilisästä (Estrace, Acerus Pharmaceuticals Corporation, Mississauga, ON, Kanada tai lumelääke (400 mg/vrk Polycose, Abbott Laboratories, St. Laurent, QC, Kanada), mukaan lukien 3 päivää esi-immobilisaatio ja 7 päivää yhden jalan immobilisaatiota. Kolme päivää ennen immobilisaatiota (t = -3 d) otetaan verinäyte ja lihasvoima arvioidaan ennen päivittäisen 17β-estradiolin tai lumelääkehoidon aloittamista. Osallistujat kuluttavat 1 mg/vrk 3 päivän ajan ja 3 mg/vrk 7 vrk Estracea tai 400 mg/vrk Polycose 7 vrk. Estrogeeni- ja lumepullot on koodattu varmistamaan täydellinen sokeuttaminen sekä tutkijoille että osallistujille. Lisäverinäytteitä otetaan sen arvioimiseksi, miten hyvin osallistujat noudattavat lisäravintoa. Lisäksi t = -3 d:nä otetaan sylkinäyte ennen 150 ml:n deuteriumleimattua vettä (D2O) nauttimista. Päivittäistä sylkinäytteenottoa jatketaan kokeellisen kokeen loppuun asti, jotta voidaan arvioida esiastepoolin rikastumista. Ravinnon saantia valvotaan 10 päivän ajan (mukaan lukien 3 päivää ennen immobilisaatiota ja 7 päivää immobilisaatiota) tarjoamalla energiatasapainoista ruokavaliota, joka sisältää yhden painon päivässä jaettuna tasaisesti aamiaisen, lounaan ja illallisen aikana (15). Osallistujia ohjeistetaan pidättäytymään voimakkaasta fyysisestä aktiivisuudesta (juoksu, nopea pyöräily, kilpaurheilu, raskaiden taakkojen kantaminen jne.) ja pidättäytymään alkoholin käytöstä 3 päivää ennen 7 päivän yhden jalan immobilisointia ja sen aikana. Päivittäistä aktiivisuutta seurataan SenseWear-käsivarsinauhalla, jota koehenkilöiden tulee käyttää t=-3 vuorokaudesta kokeen loppuun asti.

Osallistujien toinen jalka immobilisoidaan polvituen avulla (http://www.breg.com/products/knee-bracing/post-op) siten vastakkainen raaja toimii sisäisenä kontrollina. Immobilisoitava jalka valitaan satunnaisesti tasapainotetulla tavalla siten, että yhtä monta osallistujaa immobilisoi heikommat tai vahvemmat jalat. Ahdin (http://www.breg.com/products/knee-bracing/post-op) käytetään kiinteässä taivutusasennossa 140° (eli 40° täydestä ulokkeesta) muovinauhan kanssa, joka poistetaan painepisteiden tarkistamiseksi päivittäin ja sinetöidään uudelleen räätälöidyllä muovihihnalla, joka sulatetaan hihnan sulkemiseksi, kuten olemme tehneet aiemmin19,20. Syynä tähän on se, että tukia ei voida irrottaa rikkomatta muovitiivistettä, mutta se voidaan murtaa hätätilanteessa ja tarvittaessa poistaa tuki kokonaan. Tätä käytöstäpoistomallia käyttämällä olemme havainneet, että immobilisoiva tuki on hyvin siedetty, ei rajoittava, ja mikä tärkeintä, se ei tukkeudu polvitaipeen ja/tai reisivaltimon verenkiertoon, eikä meillä ole ollut yhtään turvotusta tai laskimotromboosia aiemmissa tutkimuksissa. Osallistujat saavat myös joustavat tukisiteet syvälaskimotukosriskin vähentämiseksi.

Päivänä t = 0 d otetaan verinäyte, sylkinäyte ja lihasbiopsia lihasproteiinisynteesin arvioimiseksi. Lihasvoima ja tilavuus arvioidaan käyttämällä Biodexia ja ultraäänitutkimusta. Polvituki asetetaan 7 päivän yhden jalan immobilisaatiovaiheen aloittamiseksi. Jalkojen valinta immobilisointia varten satunnaistetaan ja tasapainotetaan dominanssin suhteen suurimman isometrisen vahvuuden mukaan. Immobilisaatiovaiheen lopussa (t=7 d) otetaan verinäyte, otetaan lihaskoepalat sekä immobilisoidusta että immobilisoimattomasta jalasta ja mitataan lihasten tilavuus ja voima. Kun molempien jalkojen vahvuus on arvioitu, otetaan uusi lihasbiopsia, jotta voidaan arvioida 17β-estradiolin vaikutus lihasvasteeseen yksittäisessä harjoituksessa (Biodex) sekä immobilisoidussa että immobilisoidussa jalassa 3 tuntia harjoituksen jälkeen. ottelu.