Los efectos del 17β-estradiol en el músculo esquelético

Diseño y descripción detallada de la metodología Este es un ensayo controlado aleatorio de grupos paralelos, cegado al suplemento de 17β-estradiol (n=10) o placebo (n=10) administrado todos los días durante 10 días. Doce hombres jóvenes sanos (edad: 18-25 años; IMC: 22-33 kg/m2) serán reclutados para participar en este estudio. Durante las conversaciones telefónicas o por correo electrónico, explicaremos el propósito y el diseño experimental del estudio y abordaremos todas las preguntas que puedan tener los participantes (consulte los guiones telefónicos y de correo electrónico). Los participantes visitarán el laboratorio para una evaluación para evaluar si son elegibles para participar en este estudio. Durante la proyección, primero explicaremos el diseño experimental y obtendremos el consentimiento informado por escrito. Los participantes completarán un cuestionario médico para evaluar su salud general y el uso de medicamentos. La altura y la masa corporal se medirán como características de referencia de los participantes. Se solicitará a los participantes que completen un registro dietético tridimensional para evaluar la ingesta habitual de energía y proteínas. Los participantes serán asignados aleatoriamente al grupo de suplementación con 17β-estradiol (n=10) o placebo (n=10). La aleatorización se realizará utilizando un aleatorizador de lista computarizado (https://www.random.org/lists/), y los participantes serán asignados secuencialmente a una condición de acuerdo con la lista aleatoria. El ensayo experimental se compone de 10 días de suplementos de 17β-estradiol (Estrace, Acerus Pharmaceuticals Corporation, Mississauga, ON, Canadá o placebo (400 mg/día Polycose, Abbott Laboratories, St. Laurent, QC, Canadá), incluidos 3 días de preinmovilización y 7 días de inmovilización de una sola pierna. Tres días antes de la inmovilización (t=-3 días) se obtendrá una muestra de sangre y se evaluará la fuerza muscular antes de iniciar la suplementación diaria con 17β-estradiol o placebo. Los participantes consumirán 1 mg/día durante 3 días y 3 mg/día durante 7 días de Estrace o 400 mg/día de Polycose durante 7 días. Los frascos de estrógeno y placebo están codificados para garantizar el cegamiento total tanto de los investigadores como de los participantes. Se obtendrán muestras de sangre adicionales para evaluar el cumplimiento de los participantes con la suplementación. Además, en t=-3 d se obtendrá una muestra de saliva antes de ingerir 150 mL de agua marcada con deuterio (D2O). El muestreo diario de saliva continuará hasta el final de la prueba experimental para evaluar los enriquecimientos de la reserva de precursores. La ingesta dietética se controlará durante 10 días (incluidos los 3 días previos a la inmovilización y los 7 días de la inmovilización) proporcionando una dieta balanceada en energía que contenga 1 peso por día distribuido equitativamente en el desayuno, el almuerzo y la cena (15). Se indicará a los participantes que se abstengan de realizar actividades físicas de intensidad vigorosa (correr, ciclismo rápido, deportes competitivos, cargar cargas pesadas, etc.) y abstenerse de consumir alcohol durante 3 días antes y durante la inmovilización de una sola pierna de 7 días. La actividad diaria se monitoreará con un SenseWear Armband, que los sujetos deberán usar desde t = -3 d hasta el final de la prueba experimental.

Los participantes tendrán una pierna inmovilizada por medio de rodilleras (http://www.breg.com/products/knee-bracing/post-op) por tanto, la extremidad contralateral actuará como un control interno. La pierna que se va a inmovilizar se elegirá de manera contrapesada al azar para dar como resultado un número igual de participantes con las piernas más débiles o más fuertes inmovilizadas. El aparato ortopédico (http://www.breg.com/products/knee-bracing/post-op) se usará en una posición de flexión fija a 140° (es decir, 40° desde la extensión completa) con una banda de plástico que se quita para verificar los puntos de presión diariamente y se vuelve a sellar con una correa de plástico modificada a medida que se derrite para sellar la correa, como hemos hecho anteriormente19,20. La razón de esto es que la abrazadera no se puede quitar sin romper el sello de plástico, pero podría romperse en caso de emergencia y quitarse la abrazadera por completo, si es necesario. Usando este modelo de desuso, hemos encontrado que la abrazadera inmovilizadora es bien tolerada, no restrictiva y, lo que es más importante, no ocluye el flujo sanguíneo de la arteria poplítea y/o femoral, y no hemos tenido casos de edema o trombosis venosa en estudios previos. Los participantes también recibirán vendajes elásticos de soporte para disminuir el riesgo de trombosis venosa profunda.

En t = 0 d, se recolectarán una muestra de sangre, una muestra de saliva y una biopsia muscular para la evaluación de las tasas de síntesis de proteínas musculares. La fuerza y ​​el volumen muscular se evaluarán mediante un Biodex y una ecografía, respectivamente. Se colocará una rodillera para iniciar la fase de inmovilización de una sola pierna de 7 días. La elección de la pierna para la inmovilización será aleatoria y equilibrada por dominancia de acuerdo con la fuerza isométrica máxima. Al final de la fase de inmovilización (t=7 d), se obtendrá una muestra de sangre, se tomarán biopsias musculares tanto de la pierna inmovilizada como de la no inmovilizada, y se evaluará el volumen y la fuerza muscular. Después de evaluar la fuerza en ambas piernas, se realizará una biopsia muscular adicional para evaluar el efecto del 17β-estradiol en la respuesta muscular a una sola sesión de ejercicio (Biodex) tanto en la pierna no inmovilizada como en la inmovilizada 3 horas después del ejercicio. combate.