痴呆症患者的牙周炎和牙周细菌

目的和目标

该研究旨在调查牙周炎和不同牙周病原菌菌株的存在是否与痴呆症诊断以及记忆诊所（明尼莫塔宁）评估的患者的认知障碍程度有关。 具体来说，通过分析脑脊液 (CSF) 样本，研究人员打算澄清所谓的牙龈卟啉单胞菌 (P. AD 病因学中的牙龈杆菌）在瑞典人群中得到支持，以及它们是否分别对牙龈卟啉单胞菌（与其他牙周致病菌相比）和阿尔茨海默型痴呆（与其他病因性痴呆类型相比）具有特异性。

研究问题

在瑞典痴呆病例中，牙周病原体的细菌 DNA、牙周病原体抗体、牙龈卟啉单胞菌的牙龈蛋白酶蛋白和脑脊液中的牙龈蛋白酶活性占多大比例？与认知功能障碍水平较低的个体（例如， 轻度认知障碍、主观认知障碍或未诊断）？ 是认知功能的测量，例如 简易精神状态检查 (MMSE) 分数，与脑脊液中的细菌学发现相关，包括牙龈蛋白酶活性？ 与认知功能障碍水平较低的参与者相比，诊断为痴呆症的参与者的牙周炎患病率是否更高？ 与认知功能障碍水平较低的参与者相比，诊断评估前 5 - 15 年牙周炎的患病率是否在接受痴呆诊断的参与者中更高？ 是认知功能的测量，例如 简易精神状态检查 (MMSE) 评分与牙周炎相关发现相关？ 在那种情况下，相关性是否取决于牙周和认知评估之间的时间间隔？ 与轻度或无牙周炎参与者相比，严重牙周炎参与者的脑脊液中上述细菌学发现是否更常见或更高？ 牙周炎相关发现是否与脑脊液中的细菌学发现相关，包括牙龈蛋白酶活性？ 在那种情况下，相关性是否取决于牙周评估和脑脊液样本之间的时间间隔？ 在任何这些潜在关系中，与牙龈卟啉单胞菌相关的发现是否比与其他牙周病原体相关的发现更常见或更明显？ 与非阿尔茨海默痴呆症患者相比，AD 患者脑脊液中与牙龈卟啉单胞菌相关的发现和其他细菌学发现是否更常见或更高？ CSF 中与牙龈卟啉单胞菌相关的发现和其他细菌学发现是否与 CSF 中的 AD 标志物相关，例如 β-淀粉样蛋白、tau 蛋白和磷酸化 tau 蛋白？

参加者

该研究基于一组参与者，这些参与者在厄勒布鲁大学医院老年医学系的记忆诊所 (Minnesmottagningen) 接受了假定的认知障碍调查。 临床检查包括认知测试、脑成像等。 可能会给出痴呆症或轻度认知障碍的诊断，但其他病例不会接受任何这些诊断。 作为这些调查的一部分，通常会进行腰椎穿刺以分析脑脊液 (CSF) 中的 AD 标记物。 每年进行大约 200 次腰椎穿刺，每个样本的等分试样 (1-2 mL) 通常存储在生物库中 5 年或更长时间。 据调查人员所知，至少存储了 300 个样本。 对这些 CSF 样本的回顾性分析将构成研究人员生化调查的基础。 从这大约 300 个案例中，我们将选择 120 名参与者纳入我们的研究。 那些被诊断为痴呆症的人将作为病例组，那些不符合痴呆症标准（约 25%）的人将作为对照组。 在我们达到 120 个纳入之前，拥有最完整可用临床数据的参与者将被包括在内。

数据采集

认知功能和现有 CSF 数据

来自 Minnesmottagningen 的医疗记录包括认知测试的结果，例如 MMSE、时钟绘图测试、试车测试等。 这些将被检索和注册。

在 Minnesmottagningen 给出的诊断，即痴呆症（如果有的话，还有痴呆症的病因类型）、轻微认知障碍、其他诊断或没有诊断，将被记录在案。

将检索和登记 AD 标记物（例如 β-淀粉样蛋白、tau 和磷酸化 tau）的 CSF 分析结果记录。

阿尔茨海默病和牙周炎的危险因素

从参与者的医疗记录中，将收集有关 AD 和牙周炎已知危险因素的信息，特别是高血压、高脂血症、糖尿病、吸烟、饮酒、超重和肥胖、冠心病。

牙周评估

牙科记录，包括参与者的牙医 15 年前的射线照片，将被搜索和审查。 研究牙医将根据从研究参与者的牙科记录中提取的放射照片和临床检查来评估牙周状况。

脑脊液分析

这些分析被视为探索性的。 因此，研究人员计划在前 30 个结果（针对每个分析）之后进行中期评估，以估计继续分析的可行性。 一些分析将在研究小组可用的实验室进行，其他分析将发送到已建立的研究实验室。 分析将包括：

通过聚合酶链反应 (PCR) 从选定物种中提取的细菌 DNA。 Gingipain 使用酶联免疫吸附测定 (ELISA) 和特定传感器进行分析。

使用 ELISA 检测选定细菌的抗体。 使用 ELISA/Multiplex 的细胞因子、趋化因子和生长因子。 该研究计划包括例如 Aggregatibacter actinomycetemcomitans、Tannerella forsythia 和 Treponema denticola，但重点是 P. gingivalis。

统计考虑

功率分析基于 2019 年的一项研究。 在 10 名 AD 患者的 CSF 中，有 7 名检测到牙龈卟啉单胞菌 DNA，但未包括对照 CSF。 然而，在他们的死后脑实质分析中，牙龈卟啉单胞菌毒素存在于 91-96% 的 AD 大脑和 39-52% 的对照大脑中。 基于此，研究人员可能设想痴呆症参与者的 CSF 阳性结果为 70%，而对照组为 30%。 对于 80% 的统计功效和 α 设置为 0.05，研究人员需要至少 61 名患者的样本量。 由于研究人员研究的探索性以及这些计算的一些不确定性，研究人员希望将 120 名患者纳入研究，并在 30 次分析后对 CSF 分析进行中期评估。

统计分析将在社会科学统计软件包 (SPSS) 计算机程序中进行，并将包括已建立的标准分析，例如 T 检验、Mann-Whitney 检验、Pearson 和 Spearman 相关性、逻辑回归和多元回归。

意义和科学新颖性

这项研究的结果可以为牙周炎和与牙周炎的发展有关的特定细菌参与痴呆症的发病机制和发展的理论提供支持。 阐明阿尔茨海默氏病和其他类型痴呆症的发病机制是未来寻找更有效的预防和治疗这些疾病的策略的重要一步。