H型血管形成在临界尺寸骨缺损患者诱导膜中的作用

Masquelet 技术，也称为诱导膜技术 (IMT)，于 1986 年由 Pr 首次引入以治疗高达 25 cm 的临界尺寸骨缺损。 阿兰·查尔斯·马斯奎莱特等人。 IMT 是一种两阶段外科手术，最近为治疗临界尺寸骨缺损和骨折不愈合提供了更受欢迎的选择。 基本上，IMT 的第一阶段包括将载有抗生素的聚甲基丙烯酸甲酯 (PMMA) 水泥垫片植入缺损部位。 在 6 到 8 周内，该间隔区通过异物免疫反应诱导形成和成熟周围称为诱导膜的薄层。 在第二阶段，在骨折部位保留诱导膜的同时小心移除间隔物，然后进行自体骨移植以促进骨愈合。 IMT 具有多种有益效果，包括相对于带血管的腓骨移植物而言管理相对简单，并且不同尺寸缺损的愈合时间没有显着差异。 值得注意的是，多次手术和较长的恢复时间是接受IMT治疗的患者仍需克服的困难。 鉴于诱导膜已被认为是成功结合不可或缺的组成部分，对其进行更详细和全面的分析将改进 IMT 过程以改善这些困难。

临床研究设计将遵循长庚医学基金会机构审查委员会的描述，第一年开始，直至达到每组15名患者。 简而言之，将开放性骨折患者随机分为两组以减少选择 bios，包括垫片组（有诱导膜）和无垫片组（无诱导膜）。 在无垫片组（I期未手术）中，将收集大小为1 cm2的骨折部位附近的软组织作为来自垫片组（I + II期）的诱导膜（1 cm2）的适当对照) 在 IMT 第二阶段的时间点。 组织将被分为三个部分，用于蛋白质组学、代谢组学和石蜡化切片，在实验前储存在负 80 度。 该部分在该项目中必不可少，用于描述 H 型血管形成和骨愈合能力的特征。 为此，将进行免疫组织化学 (IHC) 或免疫荧光 (IF) 以测量从软组织和诱导膜中的蛋白质组学结果中鉴定出的蛋白质。 包含分化簇 31 (CD31) 和内粘蛋白 (Emcn) 的特征标记将用于检测 H 型血管。还可以执行比色法，包括马松三色、阿尔新蓝、茜素红 S、H&E 和番红 O-Fast 绿，以揭示诱导膜的组织学见解。 在多组学中，组织将用于揭示新靶点，然后将其与血管内皮生长因子 (VEGF) 和骨钙素的水平进行比较。 此外，将进行蛋白质印迹和实时逆转录聚合酶链反应 (RT-PCR) 以验证已鉴定代谢物的下游调节。

将在台湾桃园长庚纪念医院骨科从两组收集静脉血（含肝素的 3 毫升真空采血管）。 该协议基于一份报告，该报告将 VEGF 确定为 IMT 联盟的潜在生物标志物。 抽取后，将血液离心（1000RPM，室温10分钟）30分钟，并在-80度下储存直至分析。 收集诱导膜时间点的血样用于多组学分析，以确定 H 型血管或诱导膜的系统标志物，VEGF 和骨钙素将用作骨量的血清指标。 来自所有时间点的血液样本将用于鉴定 H 型血管和骨愈合的新型生物标志物。 至于代谢靶点，将采用代谢组学的靶向方法在血液中进行验证。 I期采血时间点为手术当天、手术次日、术后1、2、4周。 对于Ⅱ期，时间点为手术当天、手术次日、术后1、2、12、14周。