임계크기 골결손 환자의 유도막에서 Type H 혈관 형성의 역할

IMT(Induced Membrane Technique)라고도 불리는 마스크렛 기법은 1986년 Pr. Alain Charles Masquelet 외. IMT는 골절 불유합뿐만 아니라 임계 크기 뼈 결함의 치료를 위해 최근에 보다 인기 있는 옵션을 제공하는 2단계 외과 수술입니다. 기본적으로 IMT의 첫 번째 단계는 항생제가 함유된 폴리메틸메타크릴레이트(PMMA) 시멘트 스페이서를 결손 부위에 이식하는 것입니다. 6~8주 동안 이 스페이서는 이물질 면역 반응을 통해 이를 둘러싼 유도막이라는 얇은 층의 형성과 성숙을 유도합니다. 2기에서는 골절 부위에 유도막을 유지하면서 스페이서를 조심스럽게 제거한 후 자가골이식을 시행하여 골치유를 유도합니다. IMT는 상대적으로 관리가 간단하고 혈관이 있는 비골 이식편과 다양한 결손 크기 간에 치유 시간에 큰 차이가 없는 등 몇 가지 유익한 효과를 부여합니다. 여러 번의 수술과 긴 회복 시간은 IMT로 치료받는 환자에게 여전히 극복해야 할 어려움입니다. 유도막은 성공적인 유합을 위해 필수불가결한 요소로 여겨져 왔다는 점에서 이에 대한 보다 상세하고 포괄적인 분석은 IMT 과정을 개선하여 이러한 어려움을 개선할 것입니다.

임상 연구 설계는 각 그룹당 15명의 환자에 도달할 때까지 첫해에 시작되는 창궁의료재단 임상심사위원회의 설명을 따를 것입니다. 간단히 말해서, 개방성 골절 환자는 선택 바이오스를 감소시키기 위해 스페이서(유도 막 포함) 및 스페이서 그룹 없음(유도 막 없음)을 포함하는 두 그룹으로 무작위로 나뉩니다. 스페이서가 없는 군(1기 수술 없음)에서는 1cm2 크기의 골절 부위 주변 연조직을 채취하여 스페이서군(1기 + 2기)에서 유도막(1cm2)의 적절한 대조군으로 사용합니다. ) IMT II기 시점. 조직은 proteomics, metabolomics 및 paraffinized section을 위해 세 부분으로 해부되며 실험 전에 영하 80도에 보관됩니다. 섹션은 이 프로젝트에서 유형 H 혈관 형성과 뼈 치유 능력을 특성화하는 데 필수적입니다. 이를 위해 면역조직화학(IHC) 또는 면역형광(IF)을 수행하여 연조직과 유도된 막 모두에서 단백질체학 결과에서 확인된 단백질을 측정합니다. 분화 31 클러스터(CD31) 및 엔도뮤신(Emcn)을 포함하는 특징화된 마커는 유형 H 혈관을 검출하는 데 사용될 것입니다. Masson's trichrome, Alcian blue, Alizarin red S, H&E 및 Safranin O-Fast green을 포함한 비색 방법을 수행하여 유도된 막의 조직학적 통찰력을 밝힐 수도 있습니다. 다중 오믹스에서는 조직을 사용하여 새로운 표적을 밝히고 이를 혈관 내피 성장 인자(VEGF) 및 오스테오칼신 수준과 비교합니다. 또한 확인된 대사산물의 다운스트림 조절을 검증하기 위해 웨스턴 블롯팅 및 실시간 역전사효소-중합효소 연쇄반응(RT-PCR)을 수행할 것입니다.

정맥혈(헤파린이 함유된 베큐테이너의 3ml)은 대만 타오위안 창궁 기념 병원 정형외과에서 두 그룹 모두에서 수집됩니다. 이 프로토콜은 VEGF를 IMT에서 조합의 잠재적 바이오마커로 식별하는 보고서를 기반으로 합니다. 채혈 후 혈액은 30분 동안 원심분리(1000RPM, 실온에서 10분)한 후 분석 전까지 영하 80도에서 보관합니다. 유도막 채취 시점의 혈액 샘플을 준비하여 H형 혈관 또는 유도막에 대한 전신 표지자를 확인하기 위한 다중 오믹스 분석을 실시하고, VEGF와 오스테오칼신을 골량의 혈청 지표로 사용한다. 모든 시점의 혈액 샘플은 H형 혈관 및 뼈 치유를 위한 새로운 바이오마커를 식별하는 데 사용됩니다. 대사체 표적에 대해서는 대사체학의 표적 방법을 사용하여 혈액에서 확인합니다. I기 혈액 채취 시점은 수술 당일, 수술 다음날, 수술 후 1주, 2주, 4주가 될 것이다. 2기는 수술 당일, 수술 다음날, 수술 후 1주, 2주, 12주, 14주가 됩니다.