铅暴露对铁死亡的影响

背景：

铅（Pb）是一种普遍存在且剧毒的重金属。 过去一个世纪以来，人类活动一直是环境中铅污染的主要原因。 铅暴露引起全球关注，特别是对于儿童而言，个人可以通过各种方式接触铅，例如受污染的土壤、灰尘、食物、水或异物。 中枢神经系统 (CNS) 特别容易受到铅 (Pb) 的毒性作用，尤其是儿童，这主要是由于血脑屏障的不成熟。

铁死亡是最近定义的一种受调节的细胞死亡形式，其特征是由于脂质氢过氧化物的积累而导致铁依赖性细胞死亡。 最近的一项研究表明，醋酸铅（II）是污染土壤中常见的可溶性铅化合物，可诱导神经细胞铁死亡，并通过 MiR-378a-3p/SLC7A11 轴造成神经损伤。 然而，慢性低水平铅暴露引起的铁死亡对神经元损伤的神经毒性作用的确切机制尚不完全清楚。 因此，根据之前的研究，我们假设慢性低水平铅暴露引起的铁死亡可通过铁代谢失调和Nrf2依赖性铁死亡途径引起神经毒性。

方法：

研究人员首先使用原子吸收光谱法分析血铅水平的差异。

研究人员招募了来自一家铅酸电池工厂的 20 名长期接触铅的工人和一组年龄匹配的非铅接触工人作为对照组。

采用 TNF-α ELISA KIT 比较两组促炎细胞因子。采用定量逆转录 PCR（聚合酶链式反应）比较铁代谢（FTH1、FPN1、DMT1）信使核糖核酸（mRNA）表达及 Nrf2 依赖性铁死亡途径（Nrf2、SLC7A11、GPX4）详细方法方案

1. 纳入慢性铅暴露参与者的标准如下： 范围：在该铅酸电池厂工作10年以上；排除：之前接触过任何化学污染；神经系统疾病；内分泌疾病；癌症
2. 样本采集：本研究招募结束后，所有入组受试者均来医院（扬州大学附属苏北人民医院）采集外周血，将血样采集至EDTA（乙二胺四乙酸）中。酸）真空采血管，然后分为白细胞和血浆用于进一步实验
3. TNF-α ELISA KIT：采用竞争性ELISA方法检测血浆TNF-α浓度
4. 引物序列： h-DMT1 正向：5'-CTAGACTGGGAGTGGTTACTGG-3' h-DMT1 反向：5'-AGGATGACTCGTGGGACCTT-3' h-FTH1 正向：5'-CTGGTGGCCGAATCTTCCTTCA-3' h-FTH1 反向：5'-GCCAGTTTGTGCAGTTCCAG-3 ' h-FPN1 正向：5'-CTACTTGGGGAGATCGGATGT-3' h-FPN1 反向：5'-CTGGGCCACTTTAAGTCTAGC-3' h-GPX4 正向：5'-GAGGCAAGACCGAAGTAAACTAC-3' h-GPX4 反向：5'-CCGAACTGGTTACACGGGAA-3' h -SLC7A11 正向：5'-TCTCCAAAAGGAGGTTACCTGC-3' h-SLC7A11 反向：5'-AGACTCCCCTCAGTAAAGTGAC-3' h-Nrf2 正向 5'-ATAGCTGAGCCCAGTATC-3' h-Nrf2 反向 5'-CATGCACGTGAGTGCTCT-3' h-GAPDH 正向： 5'-GGAGCGAGATCCCTCCAAAAT-3' h-GAPDH 反向：5'-GGCTGTTGTCATACTTCTCATGG-3'