Effekter af blyeksponering på ferroptose

Baggrund:

Bly (Pb) er et udbredt og meget giftigt tungmetal. Menneskelige aktiviteter har været den primære årsag til blyforurening i miljøet i det sidste århundrede. Blyeksponering udgør en global bekymring, især for børn, og individer kan blive udsat for bly på forskellige måder, såsom forurenet jord, støv, mad, vand eller fremmedlegemer. Centralnervesystemet (CNS) er særligt sårbart over for de toksiske virkninger af bly (Pb), især hos børn, primært på grund af umodenhed af blod-hjerne-barrieren.

Ferroptose er en nyligt defineret form for reguleret celledød karakteriseret ved jernafhængig celledød som følge af akkumulering af lipidhydroperoxider. En nylig undersøgelse har vist, at bly(II)acetat, en almindelig opløselig blyforbindelse, der findes i forurenet jord, kan inducere ferroptose i nerveceller og forårsage nerveskade gennem MiR-378a-3p/SLC7A11-aksen. Den nøjagtige mekanisme, der ligger til grund for de neurotoksiske virkninger af kronisk lav-niveau blyeksponering-induceret ferroptose på neuronal skade, er endnu ikke fuldt ud forstået. Derfor, baseret på tidligere undersøgelser, antager vi, at kronisk lav-niveau blyeksponering-induceret ferroptose kan forårsage neurotoksicitet ved at dysregulere jernmetabolisme og den Nrf2-afhængige ferroptose-vej.

Metoder:

Efterforskerne analyserer først forskellen i blodets blyniveau ved hjælp af atomabsorptionsspektrometri.

Efterforskerne indskrev 20 arbejdere med kronisk blyeksponering fra en blysyrebatterifabrik og en alderssvarende kontrolgruppe af ikke-blyeksponerede arbejdere.

TNF-α ELISA KIT blev brugt til at sammenligne de proinflammatoriske cytokiner i to grupper Kvantitativ revers transkriptions-PCR (Polymerase Chain Reaction) blev brugt til at sammenligne messenger ribonukleinsyre (mRNA) ekspression af jernmetabolisme (FTH1, FPN1, DMT1) og den Nrf2-afhængige ferroptose pathway (Nrf2, SLC7A11, GPX4) Detaljeret metodeprotokol

1. Kriterierne for tilmeldte deltagere i kronisk blyeksponering var som følger: Inklusion: arbejde for denne blysyrebatterifabrik i mere end 10 år; Udelukkelse: udsættelse for enhver kemiforurening før; neurologiske lidelser; endokrine sygdomme; Kræft
2. Prøveindsamling: Ved afslutningen af ​​rekrutteringen i denne undersøgelse vil alle de tilmeldte deltagere komme til hospitalet for at indsamle perifert blod (Northern Jiangsu People's Hospital, tilknyttet Yangzhou University), og blodprøverne vil blive indsamlet i EDTA (ethyleneDiamine tetraeddikemiddel). syre) vacutainer-rør og derefter opdelt i leukocytter og plasma til yderligere eksperimenter
3. TNF-α ELISA KIT: Plasma TNF-α koncentrationer blev påvist ved den kompetitive ELISA metode
4. primersekvens: h-DMT1 fremad: 5'-CTAGACTGGGAGTGGTTACTGG-3' h-DMT1 omvendt: 5'-AGGATGACTCGTGGGACCTT-3' h-FTH1 fremad: 5'-CTGGTGGCCGAATCTTCCTTCA-3' h-FTH1 omvendt: 5'-GCCTTAGTTAGTG3-CCGTTAGTTTGTG ' h-FPN1 frem: 5'-CTACTTGGGGAGATCGGATGT-3' h-FPN1 baglæns: 5'-CTGGGCCACTTTAAGTCTAGC-3' h-GPX4 frem: 5'-GAGGCAAGACCGAAGTAAACTAC-3' h-GPX4 baglæns: 5'-CCGAAGGTTACACGGGA -SLC7A11 frem: 5'-TCTCCAAAGGAGGTTACCTGC-3' h-SLC7A11 baglæns: 5'-AGACTCCCCTCAGTAAAGTGAC-3' h-Nrf2 fremad 5'-ATAGCTGAGCCCAGTATC-3' h-Nrf2 baglæns 5'- CACTGACTCAHCGAG: H 5'-GGAGCGAGATCCCTCCAAAAT-3' h-GAPDH omvendt: 5'-GGCTGTTGTCATACTTCTCATGG-3'